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《二氫楊梅素對非小細胞肺癌a549細胞體外抗腫瘤作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、授予單位代碼10089學號或申請?zhí)?3090HebeiMedicalUniversity碩士學位論文在職科學學位二氫楊梅素對非小細胞肺癌A549細胞體外抗腫瘤作用研究學位申請人：孫大永導師：劉明教授專業(yè)：腫瘤學二級學院；第三醫(yī)院2015年3月河北醫(yī)科大學學位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學位論文在導師（或指導小組）的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權(quán)對本學位論文進行交流、公幵和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、
2、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應(yīng)法律責任。研究生簽名:Mv/?‘導師簽章^^二級學院領(lǐng)導蓋章：河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。?研究生簽名:r導師簽章^日目錄中文摘要………………………………………………………….…………1英文摘要…………………………………………………………….………4英文縮寫…………………………………………
3、………………….………8研究論文二氫楊梅素對非小細胞肺癌A549細胞體外抗腫瘤作用研究前言…………………………………………………………………….10材料和方法……………………………………………….……………10結(jié)果……………………………………………………………………19附圖……………………………………………………………………22附表……………………………………………………………………30討論…………………….………………………………………………31結(jié)論………………….………………………………………………36參考文獻…………………………
4、…..………………………………37綜述放射治療增敏研究進展……………….……………………………41致謝…………………………………………………………………………48個人簡歷…………………………………………………….………………47中文摘要二氫楊梅素對非小細胞肺癌A549細胞體外抗腫瘤作用研究摘要目的：肺癌是人類發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤,放射治療是其重要的治療手段之一。但是放療帶來的正常組織損傷也很重,放射治療后部分惡性腫瘤細胞還會出現(xiàn)不同程度的治療抵抗。因此尋找低毒高效的抗腫瘤新藥和放療增敏劑迫在眉睫。二氫楊梅素(dihydromy
5、ricetin,DMY)是近幾年新發(fā)現(xiàn)的一個黃酮類化合物,有研究顯示DMY在體內(nèi)外均能發(fā)揮抗腫瘤作用,并且低毒高效,同時還有保護肝臟、降血脂、抗氧化、提高免疫力等優(yōu)點,另外也有大量研究表明黃酮類化合物存在放療增敏的作用。那么作為黃酮類化合物的DMY很有可能會成為一種低毒高效的抗腫瘤藥物和腫瘤放療增敏劑,為肺癌的治療提供新思路,同時也為我國天然植物藥物在抗癌方面的開發(fā)應(yīng)用提供進一步資料。方法：1體外培養(yǎng)A549細胞,并穩(wěn)定傳代,取對數(shù)期細胞進行實驗。2取對數(shù)生長期細胞制備單細胞懸液,按照5000個每孔的數(shù)量接種于96孔板,孵育24h后,
6、當細胞貼壁良好,約30%-40%密度時,分別換成含不同濃度(0、20、40、60、80、100、140、200μg/ml)DMY的培養(yǎng)基繼續(xù)孵育,48h后采用MTT比色法檢測不同DMY濃度組A549細胞的增殖活力,計算得出IC50。3按照5000個每孔的數(shù)目接種細胞于96孔板,并用不同濃度(0、20、40、60、80、140μg/ml)DMY作用培養(yǎng)48h后,于倒置顯微鏡下檢測和觀察不同濃度DMY對細胞形態(tài)和生長狀態(tài)的影響。333334按照不同的初始接種密度（1×10、5×10、10×10、50×10、100×10、3500×10個每
7、孔）將細胞分別接種到6孔板中培養(yǎng)24h,當細胞貼壁伸展良好時,并換成含40μg/mlDMY的完全培養(yǎng)基繼續(xù)孵育,48h后取出于倒置顯微鏡下觀察相同濃度DMY對不同接種密度細胞的作用,并拍照記錄。5按照400個/孔的數(shù)量將細胞接種于6孔板中培養(yǎng),24h后當細胞貼壁伸展良好時,分別用不同濃度(0、6、7、8、9、10、12、15μg/ml)的DMY作用48h后繼續(xù)培養(yǎng),觀察克隆形成情況,檢測DMY對于A549細胞的長1中文摘要期抑制作用,并計算得出細胞存活分數(shù)和IC50。6流式細胞術(shù)凋亡試劑盒檢測不同濃度(0、20、40、80μg/ml)
8、DMY作用48h后對A549細胞的誘導凋亡作用。7WesternBlotting檢測不同濃度(0、20、40、80μg/ml)DMY作用A549細胞48h后凋亡通路Bax和Bcl-2蛋白表達。8流式細胞術(shù)檢測IC20濃度
