去乙?;竤irt1調(diào)控卵丘顆粒細胞凋亡對單精子卵胞漿內(nèi)顯微注射助孕的影響

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1、分類號:R392.2學校代碼:10392學科專業(yè)代碼:100102學號:200803043碩士學位論文去乙?;窼IRT1調(diào)控卵丘顆粒細胞凋亡對單精子卵胞漿內(nèi)顯微注射助孕的影響EffectsofapoptosisofgranulosecellregulatedbySIRT1onintracytoplasmicsperminjection學位類型:醫(yī)學碩士所在學院:基礎醫(yī)學院申請人姓名:饒冬東學科、專業(yè):免疫學導師:章濤教授林典梁副主任醫(yī)師研究起止日期:2013年7月至2015年5月答辯委員會主席:王瑋教授答辯日期:2015年5月

2、29日二○一五年六月目錄附錄…………………………………………………………………….1中文摘要……………………………………………………………….2英文摘要……………………………………………………………….3前言…………………………………………………………………….4第一部分論文………………………………………………………….61.材料與方法……………………………………………………….62.實驗結果…………………………………………………………113.討論………………………………………………………………234.小結……………………………

3、…………………………………24第二部分論文…………………………………………………………251.材料與方法………………………………………………………252.實驗結果…………………………………………………………343.討論………………………………………………………………394.小結………………………………………………………………40結論……………………………………………………………………40參考文獻………………………………………………………………40綜述……………………………………………………………………43致謝…………………………

4、…………………………………………48英文縮略表英文縮寫英文全稱中文含義IVF-ETinvitrofertilization-embryotransfer體外受精-胚胎移植SIRT1Silentinformationregulator2homolog1去乙?;?FOXOtheforkheadboxOfamily叉頭轉(zhuǎn)錄因子ARTassistedreproductivetechnology輔助生殖技術ICSIintracytoplasmicsperminjection單精子卵胞漿內(nèi)注射術Caspasecysteinylaspart

5、atespecificproteinase半胱氨酸天門冬氨酸蛋白酶GSISglucose-stimulatedinsulinsecretion胰島素分泌UCP2uncouplingprotein2解偶聯(lián)蛋白2GCgranulosacell顆粒細胞OCCCOoctye-corona-cumuluscomplex卵冠丘復合體1去乙?;窼IRT1調(diào)控卵丘顆粒細胞凋亡對單精子卵胞漿內(nèi)注射助孕的影響中文摘要目的:本研究擬對去乙?;窼IRT1調(diào)控人卵丘顆粒細胞凋亡對單精子卵胞漿內(nèi)顯微注射的影響進行研究,并探討SIRT1、FOXO3a通路

6、調(diào)控顆粒細胞凋亡的機制。方法:采用免疫細胞化學染色、Western-blot法檢測人卵丘顆粒細胞SIRT1和FOXO3a蛋白的表達;采用Real-timePCR技術檢測SIRT1和FOXO3amRNA的表達;采用流式細胞術檢測凋亡蛋白Caspase-3的活化情況,分析顆粒細胞凋亡率;采用化學發(fā)光法檢測卵泡液各項生化免疫指標。結果:1、人卵丘顆粒細胞SIRT1蛋白表達與顆粒細胞凋亡顯著相關(P<0.05)。2、隨著顆粒細胞SIRT1表達增高,顆粒細胞凋亡率隨之升高,穿卵泡數(shù)、獲卵數(shù)、ICSI卵子數(shù)、受精數(shù)、卵裂數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、囊胚

7、形成數(shù)、囊胚冷凍數(shù)則隨之下降(P<0.01)。3、人卵丘顆粒細胞SIRT1基因和蛋白的表達與FOXO3a表達顯著相關(P<0.01)。4、卵泡液雌激素E2水平與顆粒細胞SIRT1表達顯著相關(P<0.01)。結論:人卵丘顆粒細胞中SIRT1蛋白表達增加可促進顆粒細胞凋亡,使ICSI助孕過程中的穿卵泡數(shù)、獲卵數(shù)、ICSI卵子數(shù)、受精數(shù)、卵裂數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、囊胚形成數(shù)、囊胚冷凍數(shù)等指標受到影響,從而影響ICSI助孕結局。其作用機制可能是FOXO3a通過調(diào)控SIRT1基因轉(zhuǎn)錄誘導卵丘顆粒細胞凋亡。關鍵詞:去乙?;?,顆粒細胞,凋亡,

8、單精子卵胞漿內(nèi)注射,體外受精-胚胎移植,叉頭轉(zhuǎn)錄因子2EffectsofapoptosisofgranulosecellregulatedbySIRT1onintracytoplasmicsperminjectionAbstractObjective:Topro

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