廣西犬h9n2和類禽型h1n1豬流感病毒的遺傳進化分析及對小鼠致病性的研究

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3、的指導(dǎo)下獨立進行研究所取得的研究成果。除己特別加標注和致謝的地方外，論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，也不包含本人或他人為獲得廣西大學或其它單位的學位而使用過的材料一。與我同工作的同事對本論文的研究工作所做的貢獻均已在論文中作了明確說明。本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的學位論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬廣西大學。本人授權(quán)廣西大學擁有學位論文的部分使用權(quán)，即：學校有權(quán)保存并向國家有關(guān)部口或機構(gòu)送交學位論文的復(fù)印件和電子版，，允許論文被查閱和借閱可Ｗ將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索和傳播，可采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保

4、存。、匯編學位論文本學位論文屬于；□保密，在年解密后適用授權(quán)。＂＂請在ｉＵ上相應(yīng)方框內(nèi)打Ｖ（）論文作者簽名；日期：Ｉ指導(dǎo)教師簽名日期乂３作者聯(lián)系電話；電子郵箱；廣西犬Ｈ９Ｎ２和類禽型Ｈ１Ｎ１豬流感病毒的遠傳進化分析及對小鼠致病性的研究摘要Ｈ９Ｎ２亞型和Ｈ１Ｎ１亞型流感病毒是流感大家庭里面兩個重要的病原，它們都在正粘病毒科Ａ型流感病毒屬，基因組包括八個分節(jié)１。段的基因片段，共編碼約１種蛋白Ｈ９Ｎ２亞型流感病毒于１９６６年首次在意大利分離到，Ｈ１Ｎ１亞型流感最先于１９１８年在美國報道，目前的研究表明兩種流感病毒都能夠突破種間障礙

5、感染豬、雪貂等動Ｈ９Ｎ２亞，物，但還沒有在犬身上分離到型流感病毒的報道對廣西Ｈ１Ｎ１流感病毒致病性的研究也很少，因此開展對Ｈ９Ｎ２和Ｈ１Ｎ１亞型流感病毒的流行病學調(diào)查、遺傳演化分析和致病性研究有重要意義。本研究對采自廣西各地市的５８８份寵物犬棉拭子樣品和１０３８份發(fā)病豬肺組織樣品進行病毒分離。將采集到的樣品接種１０日齡ＳＰＦ雞胚后收取尿囊液，結(jié)果從犬棉拭子中共分離到１３株Ｈ９Ｎ２亞型流感病毒，而從豬肺組織中共分離到１４株類禽型Ｈ１Ｎ１亞型流感病毒，序列分析表明，１３株Ｈ９Ｎ２亞型流感病毒與近年來廣西分離株Ａｉ／ｅｑｕｉｎｅ／Ｇｕａｎｇｘｉ／３／２０

6、１１氨基酸同源性在９９．０％ｔｉ？上，內(nèi)部基因進化關(guān)系與２０１３年暴發(fā)的人Ｈ７Ｎ９很近，且８個基因片段來自于五個經(jīng)典的毒株一，組成了個新的基因型Ｕ；１４株類禽型Ｈ１Ｎ１豬流感?。崳姡桑崳姡福局校欤椋耄鍋喯担崳?，２０１３年早期分離株的個基因片段全部來自Ａｖｉａｎ隨后一３、４月份分離株中７號和８號有個基因片段來源于２００９甲型流感，Ｓ２分離株中有兩個片段來自甲流，３２號片段有Ｈ個片段來自甲流，而２０１３年５月底和２０１４年３月分離的六株病毒中６個片段來自甲流，病毒的基因中來源于２００９甲型流感的趨勢不斷增加。Ｇ２、Ｇ１４、Ｇ２１、Ｇ３０、Ｓ２、３２、７和８號毒株

7、ＰＢ２氨基酸７０１位發(fā)生了天冬氨酸到天冬醜胺的突變，說明了毒株正逐漸適應(yīng)人源。１３株從犬棉拭子中分離到的病毒經(jīng)雞胚培養(yǎng)，測定每毫升病毒ｗ８３３？所含ＥＩＤｌ〇１０Ｈ１饑ｓｏ為；從發(fā)病豬組織分離到的豬流感病毒６＇０８６—３３？經(jīng)ＭＤＣＫ細胞培養(yǎng)，測定每毫升ＴＣＩＤ值為１〇１〇。Ｗ１〇ＥＩＤｓｏｓ〇或ＴＣＩＤｓｏ的病毒液滴鼻攻毒ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)從健康寵物犬分離到的Ｈ９Ｎ２亞型的流感病毒不能感染小鼠，而