組織中的糖、脂、蛋白質

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1、三、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測的原理[連一連]糖類的檢測蛋白質的檢測脂肪的檢測1.實驗步驟50%酒精的作用——洗掉浮色現(xiàn)配現(xiàn)用2.實驗注意問題注:非還原糖(如蔗糖)+斐林試劑現(xiàn)象:(1)還原糖鑒定實驗淺藍色Cu(OH)2的顏色1.還原性糖與非還原性糖:還原性糖:非還原性糖:有還原性基團——游離醛基或酮基的糖;如:葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、纖維二糖。淀粉、纖維素、蔗糖、糖原。斐林試劑(現(xiàn)配現(xiàn)用)還原性糖(醛基)+斐林試劑→磚紅色沉淀3.反應原理:還原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被還原為Cu2O2.鑒定還原糖的試劑:為什么不用植物的葉或西

2、瓜與西紅柿的果實??由于葉片中葉綠素的顏色較深,西瓜與西紅柿的果實顏色為紅色,對于鑒定時的顏色反應起著掩蓋作用,導致實驗現(xiàn)象不明顯,因此,也不宜作實驗材料。2.實驗注意問題(1)還原糖鑒定實驗①淺色淺:不能用綠色葉片、西瓜、血液等材料,防止顏色的干擾。②還原糖含量高:不能用馬鈴薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)4.材料的要求:(2)鑒定淀粉的方法:碘—碘化鉀溶液(藍色)(3)脂肪的鑒定1.方法:染色時間脂肪滴顏色橘黃色紅色2~3分鐘1分鐘蘇丹III蘇丹IV3.鑒定脂肪的實驗材料最好選擇富含脂肪的種子,如花生種子(取其子葉)。2.實驗注意問題P182種方法2.試

3、劑3.在下列四支試管中分別加入一些物質。甲試管:豆?jié){;乙試管:人體必需的8種氨基酸溶液;丙試管:牛奶和蛋白酶;丁試管:人血液中的紅細胞和蒸餾水。上述四支試管中加入雙縮脲試劑振蕩后,有紫色反應的是()A.甲、丁B.甲、乙、丁C.甲、乙、丙D.甲、丙、丁D(4)蛋白質(三肽、多肽)的鑒定2.實驗注意問題實驗材料:最好選用富含蛋白質的生物組織(或器官),植物材料常用的是大豆,動物材料常用的是雞蛋清注:蛋清作材料,必須稀釋。預留部分組織樣液做對比二苯胺試劑(藍色)(5)DNA的鑒定P26混合染色劑:甲基綠使DNA分子顯綠色。吡啰紅使RNA分子顯紅色。試劑:4.用碘液、

4、蘇丹Ⅲ染液和雙縮脲試劑測得甲、乙、丙三種植物的干種子中三大類有機物的顏色反應如下表,其中“+”的數(shù)量代表顏色反應深淺程度,下列有關說法不正確的是()種子試劑碘液蘇丹Ⅲ染液雙縮脲試劑甲+++++++乙++++++++丙+++++++A.乙種子中主要含蛋白質B.碘液、蘇丹Ⅲ染液和雙縮脲試劑與相應的物質發(fā)生的顏色反應分別是藍色、橘黃色和紫色C.在觀察顏色時有可能用到光學顯微鏡D.這三種試劑的使用均不需要水浴加熱A鑒定物質實驗試劑實驗現(xiàn)象注意事項淀粉斐林試劑磚紅色沉淀試劑現(xiàn)用現(xiàn)配、沸水浴加熱蘇丹III、IVIII橘黃色IV紅色可用顯微鏡觀察雙縮脲試劑紫色先加NaOH,

5、后加CuSO4二苯胺藍色沸水浴加熱碘液藍色操作(見下)P102黑暗處理→對照處理(如遮光)→酒精脫色→清水沖洗→碘液檢驗還原糖、脂肪、蛋白質、DNA的鑒定還原性糖脂肪蛋白質DNA不同點比較項目斐林試劑雙縮脲試劑使用方法實質反應條件反應原理顏色濃度乙液CuSO4濃度為0.05g/mLB液CuSO4濃度為0.01g/mL相同都含有NaOH、CuSO4兩種成分,且所用NaOH濃度都是0.1g/mL甲液和乙液混合均勻后即可使用,且現(xiàn)配現(xiàn)用使用時先加A液再加B液新配制的Cu(OH)2反應堿性條件下的Cu2+需水浴加熱不需加熱即可反應還原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,C

6、u(OH)2被還原為Cu2O具有兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應生成絡合物磚紅色紫色5.根據(jù)“檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質”實驗,回答下列問題:(1)鑒定成熟蘋果果肉中存在還原糖所用的試劑是___,該試劑與細胞內的還原糖發(fā)生作用,形成___沉淀。(2)在鑒定花生子葉中脂肪的實驗中,能將脂肪染成橘黃色的染液是_____,用其染色時,沖洗浮色要用體積分數(shù)為50%的酒精,這是因為體積分數(shù)為50%的酒精能_______。斐林試劑磚紅色蘇丹Ⅲ染液溶解蘇丹Ⅲ染液(3)鑒定黃豆組織中存在蛋白質時,向組織樣液中加入雙縮脲試劑A搖勻,再向樣液中加入雙縮脲試

7、劑B搖勻。其中雙縮脲試劑B的量只有3~4滴,而不能過量,為什么?_____________________________________________。過量的雙縮脲試劑B會與雙縮脲試劑A反應,使溶液呈藍色,而掩蓋了生成的紫色5.根據(jù)“檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質”實驗,回答下列問題:(4)本實驗的注意事項:①斐林試劑極不穩(wěn)定,其甲液和乙液需_____,使用時再臨時混合均勻用于實驗。②雙縮脲試劑的使用,應先加__________________,造成堿性環(huán)境,再加_________________。③在還原糖的鑒定中,對試管中的溶液水浴加熱時,試管底

8、部不要觸及________;試管口不要

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