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1、Survivin和COX-2在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)【摘要】目的探討Survivin和COX-2在人膀胱移行細(xì)胞癌(BTCC)中的表達(dá)及其臨床意義。方法采用S-P免疫組化技術(shù)分別觀察40例BTCC和10例正常膀胱組織標(biāo)本中Survivin和COX-2的表達(dá),分析其表達(dá)水平與BTCC臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。結(jié)果Survivin和COX-2基因在BTCC中的表達(dá)與在正常膀胱黏膜比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.01)。不同臨床分期和病理分級(jí)間Survivin和COX-2表達(dá)的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論Survivin和COX-2的高表達(dá)是BTCC預(yù)后不良的指征,有
2、望成為BTCC預(yù)后不良的獨(dú)立性指標(biāo)?!娟P(guān)鍵詞】移行膀胱癌;Survivin;COX-2 Abstract:ObjectiveToexploretheexpressionofSurvivinandCOX-2inhumanbladdertransitionalcellcarcinoma(BTCC)andthebiologicalsignificance.MethodsImmunohistochemicalS-PmethodandRT-PCR、westernplotwasusedtodetecttheexpressionofSurvivinandCOX-2in40caseswithBTCCa
3、nd10controlswithnormalbladdermucosa.ResultsTheexpressionoftheSurvivinandCOX-2inhumanBTCCwashigherthanthatinnormalbladder9mucosa(P<0.01).TherewassignificantdifferenceintheexpressionofSurvivinandCOX-2amongdifferentclinicalstages(P<0.05).ThesignificantdifferenceintheexpressionofSurvivinandCOX-2amongt
4、hedifferentpathologicalgradeswasfound(P<0.05orP<0.01).ConclusionThehighexpressionofSurvivinandCOX-2couldberegardedasanindependentindicationforevaluatingtheprognosisinBTCC. Keywords:bladderneoplasms;survivin;COX-2膀胱移行細(xì)胞癌(BTCC)的浸潤和轉(zhuǎn)移進(jìn)程復(fù)雜,與多種癌基因和抑癌基因的表達(dá)、調(diào)控以及細(xì)胞凋亡有關(guān)。Survivin基因是近年來發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制基因;COX-2基因是與抑制
5、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因,它們對(duì)多種腫瘤的轉(zhuǎn)移有調(diào)控作用。本研究應(yīng)用SP免疫組化方法和RT-PCR檢測(cè)了40例膀胱癌和10例正常膀胱組織標(biāo)本的Survivin和COX-2的表達(dá),探討其表達(dá)與BTCC臨床分期、病理分級(jí)的相互關(guān)系,為臨床正確估計(jì)預(yù)后和治療提供依據(jù)?! ?材料與方法 1.1研究對(duì)象9寧夏醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科2006年1月—2006年12月電切和開放手術(shù)治療的BTCC患者40例,其中男20例,女20例,年齡31~80歲,平均62歲。經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切(TURBt)20例,膀胱部分切除10例,膀胱全切10例。病理分級(jí)按WHO法,其中G1級(jí)15例,G2級(jí)15例,G3級(jí)10例;腫瘤分期按
6、UICCTNM標(biāo)準(zhǔn),其中T1期12例,T2期15例,T3期13例。組織學(xué)分類:40例均為BTCC。從10例行開放手術(shù)的前列腺增生(BPH)患者取膀胱組織標(biāo)本作對(duì)照?! ?.2染色方法所有標(biāo)本均經(jīng)10%的多聚甲醛固定、石蠟包埋并進(jìn)行連續(xù)超薄切片,分別作蘇木精2伊紅(HE)染色、免疫組織化學(xué)SP染色。所有標(biāo)本均由兩位病理學(xué)專家確診。所有一抗均購自Maixin公司,SP試劑盒由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供。所有操作嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)行。石蠟切片脫蠟,水化后行免疫組織化學(xué)染色??贵w工作濃度Survivin為1∶100,COX-2為1∶200,最后用二氨基聯(lián)苯氨(DAB)染色,蘇木精復(fù)染。以磷酸
7、鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對(duì)照,已知陽性標(biāo)本作為陽性對(duì)照,陽性標(biāo)本顯色后,立即全部終止反應(yīng)?! ?.3結(jié)果判斷9Survivin、COX-2陽性表達(dá)為胞漿成棕黃色。在切片陽性細(xì)胞區(qū)隨機(jī)挑選10個(gè)高倍視野共計(jì)數(shù)1000個(gè)腫瘤細(xì)胞,按照文獻(xiàn)[1]方法,在高倍鏡下對(duì)染色作如下評(píng)分:①染色深淺:無著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分;②染色細(xì)胞計(jì)數(shù):沒有細(xì)胞染色為0分,1%~10%為1分,11%~33%為