芽孢桿菌防治香蕉冠腐病的研究

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1、華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文芽孢桿菌防治香蕉冠腐病的研究姓名：劉愛(ài)榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：黃圣明;張榮意2003.5.1中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)!!!!旦堡主望!!!!苧摘要從海南省東方、樂(lè)東、三亞、瓊海、儋州和澄邁六地對(duì)香蕉進(jìn)行抽樣調(diào)查，對(duì)發(fā)生典型冠腐病癥狀的香蕉進(jìn)行組織分離，培養(yǎng)，統(tǒng)計(jì)出菌率和出菌種類，結(jié)果顯示六地香蕉的出菌率為13．3-87．2％，其中以三亞的最高；在分離到的225個(gè)菌株中，鐮刀菌6種，后經(jīng)過(guò)致病力測(cè)定和生物學(xué)鑒定確定引起省內(nèi)香蕉冠腐病的主要病原菌為亞粘團(tuán)串珠鐮孢霉(FusariummoniliformevaKsubglutinan

2、s)、半裸鐮孢霉(Esemitectum)、導(dǎo)管鐮孢霉(Eaquaeductuum)和彎喙鐮孢霉(Ecamptoceras)。用對(duì)峙培養(yǎng)法，從香蕉園土壤和蕉園雜草上分離到8株對(duì)香蕉冠腐病菌有強(qiáng)烈抑制作用的芽孢桿菌(Bacillussp．)通過(guò)測(cè)定拮抗細(xì)菌無(wú)菌濾液對(duì)香蕉冠腐病菌拮抗作用，篩選出4株拮抗效果較佳的芽孢桿菌，經(jīng)鑒定，為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)．將香蕉冠腐病菌培養(yǎng)在含不同濃度培養(yǎng)濾液的PDA平板上，觀察菌絲的變化，經(jīng)無(wú)菌濾液處理后，首先菌絲頂端和中部腫脹，形成大量念珠狀囊狀體，菌絲直徑是正常菌絲的4．5倍，時(shí)間延長(zhǎng)，菌絲細(xì)胞壁溶解，原生質(zhì)外溢，菌絲細(xì)胞成

3、為空胞。以不同比例將無(wú)菌濾液加入鐮刀菌的孢子懸浮液中，置顯微鏡下定時(shí)觀察。處理12h后，鐮刀菌孢子不能正常萌發(fā)產(chǎn)生芽管，在孢子的頂端或中間產(chǎn)生一個(gè)圓球狀泡，18h后此泡狀結(jié)構(gòu)破裂，孢予的原生質(zhì)隨著溢出。將無(wú)菌濾液經(jīng)121℃處理20分鐘后，測(cè)定其抑菌活性，結(jié)果表明B68和B75的培養(yǎng)濾液不耐高溫，經(jīng)高溫處理后其抑菌活性完全喪失，B63和B74的培養(yǎng)濾液對(duì)高溫不十分敏感，高溫處理后，對(duì)F4和F6的抑菌活性部分喪失，對(duì)Fl的抑菌作用在高溫處理前后無(wú)顯著變化，說(shuō)明對(duì)Fl有抑制作用的物質(zhì)具有耐高溫的性質(zhì)，同時(shí)表明B63和B74的無(wú)菌濾液至少含有兩種抑菌物質(zhì)，一種對(duì)高溫敏感，121℃處理20分鐘，

4、使其活性喪失，劉愛(ài)榮芽孢桿菌防治香蕉冠腐病的研究·-·?！1_。_?！ぁ?。-。_。-___。。_。。’____。。。■。。?！甠。--’_·-_’。。‘--?！?。。?！?。’’’?！??！?。。。一另一種可耐121℃的高溫。四株枯草芽孢桿菌的菌液對(duì)香蕉冠腐病的防效均在70％以上，最高防效達(dá)94．74％，顯著高于生產(chǎn)上常用的殺菌劑施保功的防效(52．63％)。四菌株的無(wú)菌濾液的防效在66．67％-95．24％之間，以無(wú)菌濾液的原液防效最高。稀釋5倍，防效無(wú)顯著變化，稀釋10倍，防效顯著下降。關(guān)鍵詞：香蕉冠腐病生物防治枯草芽孢桿菌作用機(jī)理2中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)2003屆碩士

5、畢業(yè)論文前言(代綜述)1．拮抗菌防治果蔬采后病害的研究進(jìn)展新鮮果蔬采后腐爛是一個(gè)全球性問(wèn)題。果蔬在采摘、運(yùn)銷、以及貯藏過(guò)程中因腐爛造成的損失是巨大的。椐資料報(bào)道，發(fā)達(dá)國(guó)家(如美國(guó))的果蔬采后因腐爛而造成的損失在24％左右，發(fā)展中的地處熱帶的國(guó)家高達(dá)50％Ⅲ，我國(guó)果蔬采后腐爛率在20．30％。腐爛的主要原因絕大多數(shù)要?dú)w咎于微生物的侵染；由于果蔬產(chǎn)品組織柔嫩多汁且富含糖分，同時(shí)由于脫離植株，其抗病性大大降低，因此，在貯藏過(guò)程中極易受病原物的侵染而引起腐爛。控制采后病害的主要措施是使用化學(xué)殺菌劑[21。自18世紀(jì)中葉，人們就開(kāi)始用農(nóng)藥直接防治病害，因其殺菌效果立竿見(jiàn)影，成效卓著，得到了人們的

6、認(rèn)可，并使人類對(duì)其產(chǎn)生了越來(lái)越強(qiáng)的依賴性。在人們對(duì)病菌“趕盡殺絕，徹底消滅”的同時(shí)，化學(xué)藥劑不僅殺死了病原物，而且殺死了許多有益微生物。長(zhǎng)期使用化學(xué)殺菌劑，也使病菌產(chǎn)生了抗藥性，降低了藥劑的防治效果【31[41(51[61。為了達(dá)到防病的目的，只有加大用藥的劑量，這不僅增加了防病的成本，并且殘留在果蔬上的化學(xué)藥劑對(duì)人體健康的危害極大。美國(guó)科學(xué)院(NationalAcademyofSciences)的一份報(bào)告指出，在用于處理食品的殺菌劑中，60％有致癌的危險(xiǎn)性17l。好幾種殺菌劑(如Captan和Benomyl)已被美國(guó)環(huán)保局明令禁止使用或在部分果蔬上限制使用。歐洲議會(huì)(European

7、Parliament)也通過(guò)一項(xiàng)全面禁止在采后果蔬上應(yīng)用殺菌劑的決議【11。公眾對(duì)大劑量使用殺菌劑對(duì)環(huán)境和健康的危害也日益關(guān)注，要求減少采蔬產(chǎn)品上的用藥量的呼聲也日益高漲19】f10】。為了保證農(nóng)產(chǎn)品的衛(wèi)生和安全，各國(guó)科學(xué)家都在積極探索能代替化學(xué)農(nóng)藥的防病新技術(shù)。使用非化學(xué)的、非選擇性的殺菌劑控制果蔬采后病害將是以后的發(fā)展方向tto!。這些方法安全無(wú)毒，大多為綜合性的處理措施。如采收和處理時(shí)減少果蔬型墨墨苧塑塹望墮塑重蔓塑壁墮塑墮壅一的傷12J