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《大鼠全腦缺血模型的改良與熱休克蛋白70HSP70對腦缺血保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠全腦缺血模型的改良與熱休克蛋白70（HSP70）對腦缺血保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：趙珺申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)外科指導(dǎo)教師：傅震20030401南京醫(yī)科大擘碩士季值論文大鼠全腦缺血模型制作的改良與全腦缺血再灌注后HSP70的表達(dá)及其與缺血耐受關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要[目的]改進(jìn)大鼠全腦缺血模型的制作方法并以癥狀學(xué)表現(xiàn)、海馬CAl區(qū)熱休克蛋白70(HSP70)的表達(dá)、海馬區(qū)的病理改變和蘇木素在體染色為指標(biāo)驗(yàn)證該模型成功與否。在此改良模型之上，研究不同持續(xù)時(shí)間的大鼠全腦缺血預(yù)處理誘導(dǎo)熱休克蛋白70(HSP7
2、0)的表達(dá)及其與缺血耐受之間的關(guān)系。／I[材料和方法]實(shí)驗(yàn)第一部分，采用42只成年健康雄性sD大鼠，隨機(jī)分為四動(dòng)脈阻斷組(A組)、單純阻斷頸總動(dòng)脈組(B組)、四動(dòng)脈阻斷在體染色組(C組)、單純頸總動(dòng)脈阻斷在體染色組(D組)和假手術(shù)組(E組)。A組損毀雙側(cè)椎動(dòng)脈+夾閉兩側(cè)頸總動(dòng)脈，又分為缺血10min(AI組)和30rain(AII組)：B組單純阻斷頸總動(dòng)脈，又分為10min(B1組)和30min(B1I組)。AI組和BI組缺血10rain再灌注2d后行免疫組化染色(sP法)，檢測海馬CAl區(qū)熱休克蛋白HSP70的表達(dá)；AII組和B
3、II組缺血30min再灌注5d后行HE染色觀察海馬區(qū)病理改變；C組和D組分別在四動(dòng)脈阻斷和單純頸總動(dòng)脈阻斷后立即進(jìn)行蘇木素在體染色，以腦底動(dòng)脈環(huán)(Willis’環(huán))是否染色來判斷大腦供血是否阻斷；E組為假手術(shù)組。所有大鼠在手術(shù)中均使用乙醚麻醉。實(shí)驗(yàn)第二部分，采用60只同樣的戍年健康雄性SD大鼠，用改良的四動(dòng)脈阻斷法制備全腦缺血模型，分成單純預(yù)缺血組(A組)、預(yù)缺血+再缺血組(B組)、單純?nèi)毖M(C組)和假手術(shù)組(D組)。A組又分為AI—AIV組，分別單純?nèi)X缺血lrain、2min、5min和10rain，2d后處死，用免疫組化染
4、色方法檢測海馬CAl區(qū)HSP70的表達(dá)。B組又分為BI—BIV組，分別予以全腦預(yù)缺血1min、2min、5min和10min，間隔2d后再次給予20min的全腦缺血，南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文5d后處死，行HE染色觀察海馬CAl區(qū)的病理改變。[結(jié)果]實(shí)驗(yàn)第一部分：1．四動(dòng)脈阻斷的A組于夾閉頸總動(dòng)脈1—2min內(nèi)均出現(xiàn)意識喪失，翻正反射和角膜反射消失，口唇紫紺，雙眼球蒼白，瞳孔散大，以金屬鑷刺激口唇無咬嚙活動(dòng)。解除夾閉后1—2min以上癥狀均消失。單純頸總動(dòng)脈阻斷的B組、假手術(shù)組在手術(shù)過程中始終保持意識清楚，翻正反射和角膜反射存在，瞳
5、孔輕度發(fā)白，咬嚙活動(dòng)減弱不明顯。2．AI組大鼠兩側(cè)海馬CAl區(qū)可以見到神經(jīng)元胞體與胞漿中均出現(xiàn)棕黃色染色顆粒，BI組和假手術(shù)組未見到陽性染色。AII組HE染色海馬區(qū)可見到大量錐體細(xì)胞壞死，主要表現(xiàn)為細(xì)胞縮小，胞核皺縮深染，核仁消失，細(xì)胞周圍間隙增大。BII組和假手術(shù)組無病理學(xué)改變。C組在體染色腦底動(dòng)脈環(huán)未見到染色，E組可見到腦底動(dòng)脈環(huán)染成紫藍(lán)色。實(shí)驗(yàn)第二部分：1．AI組未見到HSP70表達(dá)，AII組少量表達(dá)，AIII組大量表達(dá)，AIV組表達(dá)開始減少。2．BI組和BIV組CAl區(qū)錐體細(xì)胞大量壞死，BII組和BIII組壞死細(xì)胞較少。一
6、[結(jié)論]】．四動(dòng)脈阻斷法建立大鼠全腦缺血模型具有無需開顱，更接近于臨床，本法在Pulsinelli的基礎(chǔ)上提出改進(jìn)，無需特殊的儀器，具有方法簡便，易學(xué)易會(huì)，效果可靠等優(yōu)點(diǎn)，熟練掌握后成功率亦較高，利于推廣。2．HSP70是腦缺血敏感的應(yīng)激標(biāo)志，對腦缺血損傷具有保護(hù)作用，在一定的預(yù)缺血時(shí)間窗內(nèi)存在量效關(guān)系。[關(guān)鍵詞]全腦缺血；疾病模型，動(dòng)魄、缺血再灌注；熱休克蛋白70；嵌虹耐愛，南京醫(yī)科走學(xué)碩士學(xué)住論文Themodifiedmethodofglobalcerebralischemia．reperfusionmodelinratand
7、thestudyoftheexpressionofHSP70intheglobalcerebralischemiareperfusionandtherelationtotheischemiatoleranceAbstractIObjectivelTomodifythemethodofglobalcerebralischemia-reperfusionmodelinratandthismodelwasconfirmedbysymptomatology，theexpressionofheat—shockprotein70(HSP70)
8、inthehip[，ocampusCA1region，thepathologicalchangesinthehippo。ampu3andthestainedWillis’circleafterperfusionofhematoxylinsoluti
