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1、安格斯牛除精槳冷凍精液效果的研究碩士研究生:姬云濤指導教師:曹斌云教授(西北農(nóng)林科技大學動物科技學院陜西楊凌，712100)摘要用安格斯牛精液為實驗材料，采用兩步稀釋法，在稀釋前分別以脫脂乳一卵檸液和生理鹽水為洗滌液，以離心法去除精漿，然后計算精子活率和測定精漿中酶的活性，觀察精子頂體狀態(tài)并分析其超微結(jié)構(gòu)，用倉鼠進行穿卵試驗，以探討除精漿對安格斯牛精子冷凍保存效果的影響，并對其發(fā)生的機理進行分析。試驗共分四組:生理鹽水除精漿組、脫脂乳一卵檸液除精漿組、離心不除精漿組及常規(guī)冷凍組。分別對稀釋后、平衡后和解凍后三個階段進行比較，結(jié)果表明:1.以生理鹽水和
2、脫脂乳一卵檸液為離心洗滌劑除精漿的兩個試驗組，解凍后精子活率分別為。.493士0.043和0.497士0.067.I類頂體率分別為(78.3士2.7)%和(78.7土2.8)%，精子畸形率分別是(6.3510.72)%和(6.3210.57)%。這兩組之間這幾項指標差異不顯著(P>0.05)，說明用生理鹽水和脫脂乳一卵檸液為離心洗滌劑除精漿對精子品質(zhì)無顯著影響(P>0.05)。而未除精漿的另兩組，離心與非離心組解凍后精子活率分別為0.312士0.053和0.313士0.062.1類頂體率分別為(58.7士2.9)%和(58.9士2.9)%，精子畸形率
3、分別是(9.42士0.38)%和(9.39士0.82)%。這兩組之間這幾項指標差異也不顯著(P>0.05)，說明離心對牛精子品質(zhì)無明顯影響(P>0.05)。而除精漿的兩組與未除精漿的兩組之間上述指標存在顯著或極顯著差異(P<0.05;P<0.01),表明去除精漿對解凍后牛精液品質(zhì)有顯著提高。2.經(jīng)過稀釋、降溫和平衡以及冷凍等處理過程，除精漿的兩個試驗組精液的精漿中GOT和LDH的活性逐漸上升，并在稀釋后達到一個較高值，分別為(72.17士3.29)lU/ml和(71.98士4.05)lU/ml,(284.1士31.4)IU/ml和(281.9士45.
4、1)IU/ml。而未除精漿的兩組在稀釋后沒有出現(xiàn)較高值，分別是(52.45士5.18)IU/ml和(51.83士7.01)IU/ml,(208.7123.6)IU/ml和(206.9土39.2)IU/ml。表明除精漿增強T精子膜的通透性。從平衡到解凍后，除精漿的兩組GOT和LDH活性與未除精漿的兩組相比較，增加的幅度明顯的緩慢。在解凍后各試驗組的GOT和LDH活性無顯著差異。這可能是由于除精漿降低了冷凍過程中對精子膜有損傷作用成分的原因。3.電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，離心洗滌處理使冷凍前精子質(zhì)膜有輕微擴張。除精漿處理沒有對冷凍前精子膜造成形態(tài)上明顯影響;而冷凍后
5、，未除精漿造成了精子的嚴重損害，出現(xiàn)了類似頂體反應的退行性變化，精子頂體腫脹破裂，內(nèi)容物丟失，線粒體鞘受損。除精漿精子，從整體上觀察所受損傷程度明顯減少。除精漿處理明顯增強了精子的耐凍性。4.用去透明帶倉鼠卵受精試驗檢測凍后精子受精能力，除精漿的兩個試驗組精子穿卵率可達(84.5士7.8)%和(85.1士6.2)。而未除精漿的兩組精子穿卵率僅為(70.4士12.3)%和(71.1士9.7)%。前兩組與后兩組差異顯著(P<0.05)。除精漿的兩組卵內(nèi)平均精子數(shù)為(2.93士0.35)個和(2.91士0.59)個，未除精漿的兩組為(1.58士0.43)個
6、和(1.7010.81)個，前兩組與后兩組也存在明顯的差異(P<0.05)，本實驗結(jié)果表明除精漿可以顯著提高凍后精子受精能力。關鍵詞:離心:洗滌:精子;精漿:冷凍保存:安格斯公牛;StudiesontheEffectofAngusBovineFrozenSemenafterRemovalofSeminalPlasmaPoststudent:JiYun-TaoSupervisor:Prof.CaoBin-Yun(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedcine,NorthwestSci-TechUniversityo
7、fAgricultureandForestry,YanglingShaanxi712100)AbstractInthisstudy,semensamplescollectedfrom4angusbullwerepooledanddividedinto4aliquots.Twoofthem(treatment1andtreatment2)werewashedtwice,withskinmilk-egg-aminomethane-citric-acidand0.9%Naclrespectively,thefluidwasremovedaftercentr
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