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1、紅安格斯牛鮮胚移植效果研究高立芳,陳靜,蔣安,向白菊,黃德均*(重慶市畜牧科學(xué)院,重慶,400015)摘要:為了探討紅安格斯牛超排后的鮮胚移植效果,采用CIDR+PG+FSH法對(duì)紅安格斯牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理,同時(shí),對(duì)西門塔爾受體牛進(jìn)行同期發(fā)情處理,研究了3枚鮮胚移植到3頭西門塔爾受體牛體內(nèi)的受孕數(shù)和產(chǎn)犢數(shù),結(jié)果3頭受體牛均受孕和產(chǎn)犢,受孕率和產(chǎn)犢率均為100%。結(jié)果表明,鮮胚移植是提高胚胎移植成功率的有效手段之一。關(guān)鍵詞:紅安格斯牛;超數(shù)排卵;鮮胚移植紅安格斯牛原產(chǎn)于蘇格蘭東北部的ANGUS,是從安格斯種群中經(jīng)多年選育的優(yōu)秀
2、品種,具有母性強(qiáng),繁殖率高,耐熱,耐粗食,適應(yīng)力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。紅安格斯牛全身被毛紅色,無角,頭小而方,額寬,體軀結(jié)實(shí)而寬深,四肢短而直,前后襠較寬,全身肌肉豐滿。犢牛初生重大(平均31kg左右),幼畜成活率高,生長(zhǎng)發(fā)育快(哺乳期日增重0.9~1kg,育肥期日增重平均0.7~0.9kg),周歲體重可達(dá)400kg,成年公牛體重700~1000kg,成年母牛500~600kg,胴體出肉率高達(dá)75%以上。紅安格斯牛具有良好的肉用性能,肉質(zhì)非常鮮嫩,蛋白質(zhì)含量高,脂肪含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于普通肉牛,營養(yǎng)價(jià)值十分豐富,肌肉大理石花紋明顯,是當(dāng)今國際
3、上公認(rèn)的頂級(jí)優(yōu)質(zhì)肉牛品種,有“肉中之王”的美稱。由于在我國餐飲行業(yè)尚未把紅安格斯牛肉作為主要的選材加以推出,所以紅安格斯牛的存欄量非常有限,是一個(gè)具有潛力、政府積極鼓勵(lì)繁育和推廣的肉牛品種。目前,重慶市良種肉牛繁育場(chǎng)的紅安格斯牛的存欄量?jī)H80余頭,為了快速擴(kuò)繁紅安格斯牛群體,本研究將對(duì)重慶市良種肉牛繁育場(chǎng)的紅安格斯牛進(jìn)行超排和鮮胚移植,以期獲得紅安格斯牛的后代,滿足生產(chǎn)上對(duì)該優(yōu)良肉牛的需求。資助項(xiàng)目:重慶市基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目“紅安格斯牛性控胚胎移植技術(shù)研究與應(yīng)用”;2014年特色效益農(nóng)業(yè)技術(shù)支撐項(xiàng)目“良種肉
4、??焖贁U(kuò)繁關(guān)鍵技術(shù)集成與示范”資助。作者簡(jiǎn)介:高立芳(1976-),女,重慶墊江人,碩士,助理研究員。主要從事草食動(dòng)物胚胎方面的研究。E-mail:glf13@163.com.*通訊作者:黃德均,男,助理研究員,主要從事牛胚胎移植方面的研究。1材料與方法1.1供體牛和受體牛試驗(yàn)選擇了重慶市良種肉牛繁育場(chǎng)的9頭純繁紅安格斯母牛作為供體牛。供體牛要求膘情中上,健康,無生殖系統(tǒng)疾病,有正常發(fā)情周期,單獨(dú)飼養(yǎng),采用精料+干草+鮮青草+青貯料的飼養(yǎng)方式進(jìn)行飼養(yǎng),每日2次,供給充足的清潔飲水。選擇了本試驗(yàn)場(chǎng)的14頭西門塔爾母牛作為受體
5、牛,要求體質(zhì)健壯,膘情中等,青年牛16月齡以上,發(fā)育良好;成年牛3~6歲,健康空懷,產(chǎn)犢后90d以上,有2次正常發(fā)情表現(xiàn),且無流產(chǎn)、難產(chǎn)史等,全部集中舍飼,供給充足的清潔飲水。1.2儀器與藥品SZ61體視顯微鏡:日本OLYMPUS公司;沖胚管:日本富士平公司;CL5500胚胎冷凍儀:澳大利亞Cytologic公司;集卵杯(側(cè)漏式):日本富士平公司。氯前列醇(PG):齊魯動(dòng)物保健品有限公司;CIDR:新西蘭PharmaeiaLimitedCompany;FOLLTROPIN-V(FSH):加拿大AnimalHealthCan
6、adaInc;促排3號(hào)(促黃體素釋放激A3)為寧波第二激素廠產(chǎn)品;維生素ADE注射液:蘇州市蘇牧動(dòng)物藥業(yè)有限公司;鹽酸利多卡因注射液:山東華魯制藥有限公司;沖胚液和胚胎保存液:美國VigroPullman,WA。1.3超排采用常規(guī)的FSH逐次遞減法進(jìn)行超排處理,對(duì)所有供體牛注射6mLPG,計(jì)為0d,第6d后,在供體牛陰道內(nèi)放置CIDR,同時(shí),注射維生素ADE10mL,第12d早上6:30~8:00,晚上6:30~8:00注射FSH,連續(xù)4d,劑量如下:3.5mL×2+3mL×2+1.5mL×2+1mL×2,共18mL。在第
7、14d,在FSH注射的同時(shí)注射PG,早上6mL,下午4mL,下午注射完P(guān)G后撤栓。1.4配種在FSH注射結(jié)束的第2d開始觀察母牛發(fā)情情況,每隔12h觀察1次。母牛發(fā)情后12h開始輸紅安格斯種公牛細(xì)管凍精1支,12h后再輸細(xì)管凍精2支,同時(shí),注射促排3號(hào)1支。1.5同期發(fā)情處理采用兩次PG法對(duì)受體牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。第一次(供體牛注射PG當(dāng)天)注射PG6mL/頭,第12d再一次注射PG6mL/頭,觀察發(fā)情情況并記錄。1.6沖胚、撿胚在供體牛授精后第7d采用二路式采卵管進(jìn)行非手術(shù)沖胚。沖胚方法參考劉俊平等[1]以及桑潤(rùn)滋等[2
8、]。兩側(cè)子宮沖卵結(jié)束后,將空氣放掉,再注入宮得康1支,臀部注射3支氯前列醇,有助于子宮恢復(fù)和防止子宮炎癥發(fā)生。將回收液用集卵杯濾去多余沖卵液,剩下20~30mL回收液,在40倍顯微鏡下鏡檢。按形態(tài)學(xué)分類法評(píng)定胚胎等級(jí),參照桑潤(rùn)滋等[2]方法進(jìn)行。1.7鮮胚移植及妊娠診斷用直腸檢查法檢查發(fā)情受體牛,鑒定其