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《衣霉素在血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移中的作用及分子機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實(shí)的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均己在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：／j筍夥日期：如易．s歹_7學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部?jī)?nèi)容，可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)校可以向國(guó)家有關(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電
2、子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋：本學(xué)位論文屬于保密論文，密級(jí)：——保密期限為——年。學(xué)位論文作者簽名：1尹易日期：為膨一只1指導(dǎo)教師虢慶、)暢B期：酗詫／D主f一’中文摘要學(xué)位論文中英文摘要姓名：伊男學(xué)號(hào)：091201021論文題目：衣霉素在血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移中的作用及分子機(jī)制研究指導(dǎo)教師：劉暢教授所在學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院??‘{由外源性刺激誘發(fā)的血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，是誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化和血管j再狹窄的重要原因。近期的研究表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplaSmicreticulumstress，ERS)i與多種外源性刺激導(dǎo)致的血
3、管平滑肌細(xì)胞的病理、生理活動(dòng)密切相關(guān)。近年來針對(duì)動(dòng)i脈粥樣硬化疾病發(fā)展過程中ERs的研究方興未艾，但研究對(duì)象主要集中在損傷的內(nèi)i皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中，而對(duì)于血管平滑肌細(xì)胞(vascularsmoothmusclecells，VSMCs){中ERS的作用及機(jī)制研究相對(duì)較少。本課題關(guān)注于ERS在VSMCs中可能產(chǎn)生的作i用及作用機(jī)制，為動(dòng)脈粥樣硬化疾病的預(yù)防和治療提供參考。衣霉素(tunicamycin，Tm)作用于VSMCs后可產(chǎn)生明顯ERS?，F(xiàn)象包括：產(chǎn)i生明顯的xBPl的mRNA剪切，并且使ATF6、Bip和cHoP的mIⅢA表達(dá)量以及!xBPls、G印94和Bip蛋白的表達(dá)量呈劑量
4、依賴性上升。然而通過CCK．8及MTT實(shí)}驗(yàn)證明Tm對(duì)于VsMcs的細(xì)胞活力影響有限。Annexin．V-FITC／PI雙染實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Tm僅誘導(dǎo)產(chǎn)生輕微的細(xì)胞凋亡。本研究中我們通過溴脫氧尿苷(BrdU)摻入法和形態(tài)學(xué)觀察的方法首次發(fā)現(xiàn)預(yù)i孵1、m能夠顯著地劑量依賴性地抑制由血小板衍生生長(zhǎng)因子(platelet．derivedgr0謝hjfactor，PDGF)誘導(dǎo)的VSMCs的增殖。同時(shí)我們也首次通過劃痕實(shí)驗(yàn)和遷移小室；(Transwell)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Tm具有明顯抑制PDGF刺激的VSMCs遷移運(yùn)動(dòng)的效果，并i且具有劑量依賴性。在分子水平上我們檢測(cè)了增殖細(xì)胞核抗原(PcNA)和基質(zhì)金
5、屬i蛋白酶2(MMP。2)的蛋白表達(dá)水平以及MMP．2的活性，證實(shí)11m能夠降低PDGF}刺激的VSMCs中PCNA和MMP一2蛋白的活性。經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Tm作用于PDGF刺激的VSMCs可以引起細(xì)胞中血紅素加氧酶1中文摘要一一一●--●----●●●----------●--●----●-●-一一一一一一一’一一__一一__一-●●●●●●●一一__一●一一__一----●---一一_-_一_●_●●●------_一一一一一一--------●●-一；(hemeoxygenaSe．1，Ho．1)的mRNA和蛋白表達(dá)量的升高，并降低ERKl／2的磷酸i化水平和活性。Tm的負(fù)調(diào)控作用與c
6、yclinE．cDK2和cyclinD1．cDK4蛋白活性降低；和p27的活性升高有關(guān)。更重要的是，HO．1的siRNA可以部分抵消Tm抑制PDGF—BB；誘導(dǎo)的vsMcs增殖和遷移的作用。上述結(jié)果說明1’m對(duì)VsMcs增殖和遷移的影響{是通過誘導(dǎo)Ho．1表達(dá)、抑制ERKl／2信號(hào)通路的活化、阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程使之停留j在G1／S期等機(jī)制共同作用產(chǎn)生的。另外，Tm可以降低PDGF作用產(chǎn)生的MCP．1、；PAI．1和0PN等部分炎癥因子的基因表達(dá)水平。j綜上所述，本研究證明了預(yù)孵ERS的誘導(dǎo)物Tm可以防止由PDGF刺激產(chǎn)生的}VsMcs的異常增殖和遷移運(yùn)動(dòng)。在此過程中，Ho．1蛋白及細(xì)胞
7、周期相關(guān)蛋白共同發(fā)i揮調(diào)控作用。因此我們認(rèn)為，適當(dāng)濃度的Tm對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化中VsMcs增殖和向；內(nèi)膜遷移的運(yùn)動(dòng)可能具有良好抑制效果，并對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化等心腦血管疾病具有潛在；的預(yù)防和治療作用。關(guān)鍵詞：衣霉素，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，血管平滑肌細(xì)胞，增殖，遷移，血紅素加氧酶1，血小板衍生生長(zhǎng)因子IIABSTRACTThefhnctionandmechanismstudyoftunicamycinonVascularsmoothmuscleceUproliferation
