資源描述：
《表達(dá)鵝細(xì)小病毒VP3基因重組禽痘病毒的構(gòu)建》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文表達(dá)鵝細(xì)小病毒VP3基因重組禽痘病毒的構(gòu)建姓名：趙麗榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：王君偉2003.6.1摘要—簟-墨田墨_—_l___——_—曾鼉皇-————___—昔——_瞳_墨墨-量___-__—l——-—_____IIII要鵝細(xì)小病毒(GooseParvovirus，GPV)為小鵝瘟的病原體。小鵝瘟主要發(fā)生于1月齡內(nèi)雛鵝和雛番鴨，是以急性腸炎及肝、腎、心實(shí)質(zhì)臟器炎癥為特征的烈性傳染病，對(duì)養(yǎng)鵝業(yè)發(fā)展造成很大威脅。自1956年我國(guó)學(xué)者方定一首次發(fā)現(xiàn)并分離到GPV后，國(guó)外相繼也有分離到該病毒的報(bào)道，說(shuō)明該病毒在世
2、界范圍內(nèi)有較為廣泛的流行。，目前，對(duì)GPV的防制主要是靠疫苗接種。傳統(tǒng)疫苗對(duì)GPV的預(yù)防和控制起到了一定的積極作用，但同時(shí)滅活苗存在生產(chǎn)成本高，注射局部炎癥反應(yīng)較強(qiáng)等弊端，弱毒苗又易發(fā)生毒力返強(qiáng)等。GPV主要免疫原性蛋白VP3的高度保守性給新型疫苗及分子診斷試劑的研制提供了思路。本研究采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法，將含有完整GPVH1分離株VP3基因、報(bào)告基因LacZ、禽痘病毒早／晚期啟動(dòng)子LP2EP2、痘苗病毒啟動(dòng)子P7．5、P1I和FPV一017復(fù)制非必須區(qū)的轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒psY681VP3Lacz與FPV一017共轉(zhuǎn)染雞胚成纖維細(xì)胞，經(jīng)6輪蝕斑克隆、篩選、表
3、達(dá)，PCR鑒定和Dot—ELISA檢測(cè)，證明該重組病毒已構(gòu)建成功，并獲得了遺傳性狀穩(wěn)定的鵝細(xì)小病毒VP3基因的重組禽痘病毒。為新型基因工程疫苗的研制奠定了科學(xué)的基礎(chǔ)，同時(shí)也為我國(guó)高致病力鵝細(xì)小病毒病的防治提供了物質(zhì)準(zhǔn)備f1關(guān)鍵詞鵝細(xì)小病毒：VP3基因：重組禽痘病毒ConstructionofRecombinantFlowpoxvirusExpressingVP3GeneofGooseParvovirusAbstractGooseParvovirus(GPV)isthepathogenofGoslingsplague．Thisdiseaseishighl
4、yfataltogoslingsandmuscovyducklingsunder1monthofagewiththecharacteristicsofacuteenteritisandhepatonephrieandmyocardiumlesions，havingmadelargelOSSeStogoosebreedingindustry．InmanycountriesthevirushasbeenisolatedafterDingYi．Ffirstlyfoundandisolateditinchina,whichsuggestedthatthisdi
5、seasehasbeenprevalentintheworld．Sofaras．preventionofGPVinfectionmainlydependedonvaccinesAlthoughthetraditionalvaccineshaveplayedactiveroleinpreventionandcontrollingthedisease，manydeficienciesexiststillsuchasinactivatedvaccinebeingexpensiveandinducingstronglyresponseattheinjected
6、tissue，aswellastherecoveryoftheattenuatedvaccine．ThehighconservativemainantigenicproteinVP3ofGPVprovidedtheaccesstoproducingthenewtypevaccinesanddiagnosticagent．Inthisstudy,therecombinantfowl—poxvimswastransfectedintoexpressingtheVP3geneofisolatedGPVHIstrainintotheCEFcellswithFP
7、V·017byliposome，whichhavetheLacZreportergene，earlier／latterpromotersLP2EP2ofFPV，promotersP7．5andP7．1ofVacciniavirus，replicationunnecessaryregionofFPV-017．Following6cyclesscreenings，clonings，purificationofblueplaques，detectionofPCRandDot-ELISA，whichverifiedthegeneticstableVP3一fow
8、lpoxvirusrecombinantconstructedSUCCESSfully．Thi
