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《反義ACC氧化酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建及對河套蜜瓜的轉(zhuǎn)化》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文反義ACC氧化酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建及對河套蜜瓜的轉(zhuǎn)化姓名：王翠艷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：云興福2003.5.1摘要本實(shí)驗(yàn)以河套蜜瓜果肉基因組DNA為模板，用甜瓜ACC氧化酶基因特異寡核苷酸鏈為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到128bp的擴(kuò)增產(chǎn)物。將得到的擴(kuò)增產(chǎn)物克隆到質(zhì)粒載體pMD—18一T上，篩選反向克隆，然后將其反向構(gòu)建到植物表達(dá)載體pBINYXW的CaMV35S啟動子和TMV增強(qiáng)子“Q”的下游，構(gòu)建成反義表達(dá)載體pBINYA。并在對河套蜜瓜授粉受精生物學(xué)研究的基礎(chǔ)上，通過花粉管通道法轉(zhuǎn)化河套蜜瓜，共獲76顆瓜，并進(jìn)行了硬度和含糖量的分析。關(guān)
2、鍵詞：ACC氧化酶基因；反義表達(dá)載體：嗄霍≥河套蜜瓜；媛彀，‘了，’＼本實(shí)驗(yàn)由盤古集團(tuán)科技創(chuàng)新基金和內(nèi)蒙古教育廳基金項(xiàng)目(河套蜜瓜徽衛(wèi)星DNA的分離及其遺傳圖譜的構(gòu)建)資助完成。ConstructionofAntisenceACCOxidaseGeneExpressionVectorandTransformationofCucumismeloL．CVHetaoAbStractDegenerate01igonucleotidestohighlyconservedregionsofCucumismelo1．a(chǎn)minocyclopfopane-1-carboxylicacid(ACC)
3、oxidasegenewereusedtoprimetheamplificationoffragmentof128bpbyploymerasechainreaction(PCR)insamplesofgenomicDNAfromfruitofCucumismeloL．cvHetaoflesh，whichwasclonedintoplasmidvectorpMD一18-T．Theclonofantisenseorientationwereselected，anditwasinserteddownstreamofCaMV35Spromoterandenhancer“Q”ofTMVin
4、totheplantexpressionvectorpBINYXW．a(chǎn)ntisenceexpressionvectorpBINYAwasconstructed．AtthebasethatpollinationandfertilizationofCucumismeloL．cvHetaowasstudied，usingpollentubepathwaytransformateCucumismeloL．cvHetao，76fruithadbeenobtained，moreover，hardnessandcontentofsugarwereanalysed．Keywords：ACOxid
5、ase，AntisenceExpressionVector，ConstructionCucumismeloLcvHetao；TransformationDjrectedby：ProfYUNXingfuApp}icantforMasterdegree：WANGCuiyan(Olericulture)(AgriculturalInstitute，InnerMongoliaAgriculturalUniversity，Huhhot010018，China)bpBSAODTriSKanAmpIPTGX～galdNTPPCRSDSNPTIIACC英文縮寫baSepairsBoyiheSer
6、umAlbumenOpticaldensity(hydroxy—methl)一aninomethaneKanamycinAmpiCillinIsopropylthiogalactoside5-bromo——4——chloro——3——indolyl一0一D-galactOSidedeoxynuckotideTriphosphatesPolymeraseChainReaetionSodiumDodecylSulphateneomycinpbosphotransferaseII1一aminocycIopropane一1一carboxylate堿基對牛血清白蛋白光密度三羥甲基氨基甲烷卡
7、那霉素氨芐青霉素異丙基一B～D-硫代半乳糖苷5一澳一4一氯一3一吲哚一B—D-半乳糖苷脫氧核苷三磷酸聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)十二烷基磺酸鈉新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶IIl一氨基環(huán)丙烷一卜羧酸內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文·1引言河套蜜瓜(Cucumisme]oL．CVHetao)俗稱華萊士瓜，屬葫蘆科(Cucurbitaceae)葫蘆亞科，香瓜屬，甜瓜種，屬內(nèi)蒙古巴盟特產(chǎn)。由于該地區(qū)獨(dú)特的土壤和氣候條件，使其瓜香濃郁，風(fēng)味獨(dú)特。但河套蜜瓜成熟后，軟化速度快，僅能存放一周左右，難以貯運(yùn)外銷，對經(jīng)濟(jì)效益的增
