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《小麥抗銹基因的分子標(biāo)記》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文小麥抗銹基因的分子標(biāo)記姓名：高文娜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：王中康;陳萬權(quán)2003.5.1摘要。一。}≮、采用AFLP技術(shù)和方法，對攜帶Lr34的小麥近等基因系、染色體代換系進行了DNA多態(tài)性分析。共篩選了78對EcoRI／MseI引物(上海生工)，篩選獲得一對特異性引物(E03：5’-GACT(ⅪGTACCAArrCAAT-3’和M01：5'-GATGAGTCCl-GAGTAACAT-3’)，可在抗病親本中擴增出兩條大小分別為240bp和300bp的DNA多態(tài)性片段，在感病親本中未能擴增出同等大小的DNA片段。通過對一條多
2、態(tài)性片段(240bp)進行分離克隆和序列測定，表明這一與抗病基因可能有關(guān)的DNA多態(tài)性片段大小為237bp。根據(jù)此序列設(shè)計引物，可進一步對抗病親本進行回檢及開展與抗病基因的連鎖分析。{根據(jù)與持久抗稈銹基因Sr31有關(guān)的DNA多態(tài)性片段序列，利用Primer5．0軟件共設(shè)計出7對特異性引物。通過利用Sr31的小麥近等基因系及其它抗／感材料進行回檢篩選，獲得Sr31的特異性引物(B凡l：5’cacCCCcttg昏ageaca3’和BRl2：5’agccagtatcotccacctoct3’)，可定性擴增DNA特異性區(qū)段，其片段大小為331bp，此可用作Sr3l的SCAR
3、．標(biāo)記。以Kavkaz和Lovrinl3作為供體親本，以完全感病品種McNair701作為母本，分別構(gòu)建了123株和120株F2代分離群體，苗期抗性鑒定結(jié)果表明，二者對小麥稈銹菌優(yōu)勢小種21C3的抗性系分別由一對顯性基因和二對顯性互補基因所控制。利用St31基因的SCAR標(biāo)記對F2代抗感單株進行分子檢測，并用QTXbit軟件進行連鎖遺傳分析。結(jié)果表明，Sr31的8CAR標(biāo)記與抗病基因有較緊密的連鎖遺傳關(guān)系。在Kavkaz×McNair701的雜交組合中，SCAR標(biāo)記與抗稈銹基因Sr31的遺傳距離為25．8cM+4．2cM：在Lovrinl3×McNair701的雜交
4、組合中，其遺傳距離為19．3cM+3．4cM。在小麥抗銹育種中，利用St31的SCAR標(biāo)記進行基因鑒定和輔助選擇具有較高的可靠性?！氨疚倪€就AFLP技術(shù)的可靠性、AFLP分析時應(yīng)注意的問題、RAID標(biāo)記的基因類型、RAPD對易位系的鑒定以及Sr31分子標(biāo)記的應(yīng)用前景等問題進行了討論。關(guān)鍵詞：小麥銹病抗病基因分子標(biāo)記，o。≥乙}’f渣驢D——一—一一一-_—_}一：～二．一l一DevelopmentofDNAMolecularMarkersforGenesofWheatRustResistanceAbstractThegenesforlearrustresistanc
5、e上r34andforstemrustresistanceSt3Iareallthemostimportantresistancegenesagainstrustfungiinwheatintheworld．ItisimportantforutilizingLr34andSt31rapidlyandeffectivelyinwheatbreedingprogramtodevelopthemolecularmarkerslinkedtoresistantgenesandestablishthetechnicalsystemofmolecularmarkerassist
6、antbreeding．DNApolymorphismofthenearisogeniclinesandchromosomesubstitutionlineswith／withoutLr34wereanalyzedusingAFLPmethod．Atotalof78randomprimerpairswerescreenedtoidentifytheAFLPmarkerslinkedtoLr34gene．TwopolymorphicDNAfragmentswiththemolecularweightof237bpand300bprespectivelyWfflt℃am
7、plifiedbyapairofspecificprimers(E03：5’-GACTGCGTACCAATTCAAT-3’andM01：5’．GATGAGTCCTGAGTAACAT-3’)intheresistantparentsandnotinthesusceptibleparents．The237bppolymorphicDNAfragmentwasseparated,clonedandsequenced．Basedonthesequence，thespecificprimerp豳couldbedesignedandthelinkageanalysisbet
