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《叢枝菌根真菌的增殖技術(shù)》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第25卷第3期華僑大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)Vol.25No.32004年7月JournalofHuaqiaoUniversity(NaturalScience)Jul.2004文章編號100025013(2004)0320301204叢枝菌根真菌的增殖技術(shù)王曉琴(華僑大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院,福建泉州362011)摘要對目前國內(nèi)叢枝菌根真菌的主要增殖方法進(jìn)行比較研究.以三葉草作宿主植物,采用單孢和多孢兩種接種方法,分別將摩西球囊霉、地表球囊霉、地球囊霉、縮球囊霉和網(wǎng)狀球囊霉,在土培、沙培、水培的條件下進(jìn)行增殖.收獲后分別測定它們的侵染株率、侵入點(diǎn)的密度和侵染率.研究結(jié)果表明,三葉草是理想的
2、宿主植物,其在液培條件下叢枝菌根真菌侵染能力最高,沙培法法次之,土培法最低,摩西球囊霉和地表球囊霉對三葉草侵染能力較高.關(guān)鍵詞叢枝菌根真菌,三葉草,增殖技術(shù),培養(yǎng)方法,侵染能力中圖分類號Q949.32∶Q932335文獻(xiàn)標(biāo)識碼A菌根是土壤中的真菌與植物根系的共生體,這種共生現(xiàn)象在自然界普遍存在.嚴(yán)格的講,大多數(shù)植物沒有根系,只有菌根.其中,接合菌綱(Zygomycetes)的部分真菌菌絲,可在植物根細(xì)胞內(nèi)形成叢枝狀特殊變態(tài)結(jié)構(gòu),因此我們把這種菌根稱為叢枝菌根(Arbuscularmycorrhiza,簡稱AM).據(jù)統(tǒng)計,地球上90%的有花植物都形成叢枝菌根.也就是說,80%以上的陸生植
3、物都能夠與叢枝菌根真菌(Arbuscularmycorrhiza〔1〕Fungus,簡稱AMF)形成共生體.研究表明,叢枝菌根不僅可促進(jìn)植物對營養(yǎng)元素的吸收,還能提高植物的抗病、抗逆能力,有利于植物的生長,對農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)具有重要的意義.然而,叢枝菌根真菌目前還不能進(jìn)行純培養(yǎng),必須與植物共生才得以繁殖.目前,盆栽法仍是普遍應(yīng)用和大力推廣的一種方法.盆栽法主要有土培法、沙培法和液培法3種形式.本研究將5種叢枝菌根真菌在宿主植物三葉草上進(jìn)行單孢接種和多孢接種.比較不同培養(yǎng)條件下,其侵染能力的差異;探索菌根真菌的培養(yǎng)方法和接種方法的最佳結(jié)合.從而,發(fā)展叢枝菌根真菌的傳統(tǒng)增殖技術(shù).1材料與方法1.
4、1試驗容器及裝置三種方法均采用容積為200mL的培養(yǎng)管,使用前用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.003的高錳酸鉀溶液消毒3h,然后經(jīng)流水沖洗.土培法和沙培法在培養(yǎng)架上進(jìn)行,液培法在專用的靜止液培槽進(jìn)行.1.2增殖宿主植物及AMF供試菌種增殖宿主選用牧草植物紅三葉草(TrifoliumpratenseL).供試菌種分別是摩西球囊霉(G.mosseaeGerdemann&Trappe)、地表球囊霉(G.versiformeBerch)、地球囊霉(G.geosporumWalker)、縮球囊霉(G.constrictumTrappe)、網(wǎng)狀球囊霉(G.reticulatumBhattacharjee&Muke
5、rji)1.3孢子和種子的表面消毒-1將孢子浸泡在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.02的氯胺T和200mg·L鏈霉素溶液中15min,用無菌水沖洗數(shù)次.將三葉草種子用體積分?jǐn)?shù)0.75的酒精進(jìn)行表面消毒,然后用無菌水反復(fù)沖洗,置于催芽箱中催芽.1.4供試基質(zhì)及營養(yǎng)液收稿日期2004201212作者簡介王曉琴(19772),女,助教,碩士,主要從事叢枝菌根真菌的生態(tài)生理及增殖技術(shù)的研究.E2mail:wangxiaoqin77@sohu.com302華僑大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)2004年土壤采自西北農(nóng)林科技大學(xué)林學(xué)院苗圃地的壚土,經(jīng)2mm篩過篩,濕熱滅菌3h并放置2d后備用.取建筑用河砂經(jīng)3mm篩過篩后,流水
6、沖洗直到洗液不再渾濁為止,干熱滅菌2h,備用.營養(yǎng)液采用〔2〕修改的Hoagland營養(yǎng)液,配方如表1所示.表中C1為母液濃度,C2為營養(yǎng)液濃度11.5培養(yǎng)方法表1Hoagland營養(yǎng)液配方-1-1本研究采用土培法、沙培法、液培法3種培成分C1/g·LC2/mL·L養(yǎng)方法.土培法以土壤為基質(zhì),沙培法和液培法KH2PO4136.001.0大量KNO3101.005.0以河砂為基質(zhì).以三葉草為宿主培養(yǎng)上述5種叢元Ca(NO3)2236.005.0枝菌根真菌,每個培養(yǎng)處理下采用單孢接種、多素MgSO4246.502.0孢接種兩種接種方法(對照除外).共設(shè)30個處H3BO32.861.0理,每
7、個處理均重復(fù)10次.MnCl2·4H2O1.811.0微1.6管理方法ZnSO4·7H2O0.221.0量土培法和沙培法的培養(yǎng)管放置在生長室內(nèi)CuSO4·5H2O0.081.0元H2MnO4·H2O0.021.0的培養(yǎng)架上,土培法用手動噴霧器噴水,沙培法素EDTA7.451.0每14d用半強(qiáng)度的營養(yǎng)液澆灌1次.培養(yǎng)過程FeEDTAFeSO4·7H2O5.471.0中,注意調(diào)換培養(yǎng)管的位置.液培法的培養(yǎng)管放在靜止培養(yǎng)臺上,向培養(yǎng)槽內(nèi)加入大量元素減
