叢枝菌根真菌擴(kuò)繁實驗設(shè)計

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1、叢枝菌根真菌擴(kuò)繁實驗設(shè)計材料與方法1試驗容器采用10cm*15cm的塑料花盆，將花盆用0.1%高錳酸鉀溶液侵泡消毒，并用流水清洗干凈。2擴(kuò)繁宿主及供試菌種擴(kuò)繁宿主選用紅三葉；供試菌種：摩西球囊菌（G.mosseae）、縮球囊菌（G.Uersiforme）。3孢子和種子的表面消毒將孢子浸泡在2%的氯胺T和200mgL-1鏈霉素溶液中15min用無菌水沖洗數(shù)次。將三葉草種子用75%酒精進(jìn)行表面消毒然后用無菌水反復(fù)沖洗，置于催芽箱中催芽（或?qū)⒎N子用10%H2O2浸泡10min進(jìn)行表面消毒，用蒸餾水沖洗干凈，浸種24h備用/置于濕潤的濾紙上放置24h使之發(fā)芽）。4供試基質(zhì)及營養(yǎng)液土壤采自石河子

2、農(nóng)學(xué)院試驗站牧草試驗地，過2mm篩，121℃滅濕熱滅菌30min并放置2d后備用；取建筑用河砂過3mm篩，流水沖洗直至洗液不再渾濁為止，干熱滅菌（1750C）2h備用。營養(yǎng)液采用修改的Hoagland營養(yǎng)液，配方見下表：25培養(yǎng)方法以紅三葉草為宿主分別接種G.m、G.v，單孢接種。將洗凈滅菌的河沙土裝入花盆，約占花盆的2/3，把菌種撒播在沙土基質(zhì)上，將準(zhǔn)備好的三葉草種子20粒均勻播種在菌種上，再覆蓋一層河沙，噴水濕潤。6管理每2d用營養(yǎng)液澆灌一次，培養(yǎng)溫度為20-250C，光照時間為15h/d.每天8-23點用日光燈補充光照。7d后定苗，每盆擇優(yōu)留苗10株，將其余植株的地上部分剪去。7

3、收獲及測定培養(yǎng)10周后，停止?jié)矤I養(yǎng)液和水，將花盆放在日光下暴曬3-7d，使沙基干燥。去除地上部分植株體，分別收獲植株根系和沙土培養(yǎng)基（基質(zhì)留待篩取孢子）。2