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《多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯優(yōu)良降解菌的分離鑒定及降解特性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、山東大’學(xué)博十學(xué)伉論文中文摘要作為持久性有機(jī)污染物(Persistentorganicpollutants，POPs)的典型代表，多環(huán)芳烴(polycyclicaromatichydrocarbons，PAHs)和多氯聯(lián)苯(polychlorinatedbiphenyls，PCBs)的分析方法、環(huán)境影響及其污染修復(fù)技術(shù)是目前國內(nèi)外熱點研究領(lǐng)域，生物降解特別是微生物降解被認(rèn)為是去除環(huán)境中PAHs、PCBs的主要途徑。本文在全面綜述國內(nèi)外相關(guān)研究的基礎(chǔ)上，通過調(diào)查和監(jiān)測選擇并確定了PAHs、PCBs污
2、染的土壤樣品，篩選得到的一株可以高效降解PAHs、PCBs的菌株，基于形態(tài)學(xué)特征、生理生化試驗、細(xì)胞化學(xué)成分鑒定及16SrDNA序列比對分析等手段，鑒定該菌株屬于兩面神菌屬(Janibactersp．)，命名為JYll。以此為基礎(chǔ)，系統(tǒng)研究了JYll對PAHs、PCBs的降解效果和影響因素以及與Phanerochaete．chrysosporiumJYl6聯(lián)合降解效率，并借助氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對降解中間產(chǎn)物的定性分析，初步探討了該菌株對菲、芘、苯并(口)芘和PCBl8、PCB77的代謝途徑。論
3、文主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：1．污染土壤中PAHs和變壓器油中PCBs的提取及分析．(1)采用索氏提取、超聲提取及超臨界C02提取三種樣品前處理技術(shù)，結(jié)合GC．FID分析技術(shù)，研究獲得了濟(jì)南煉油廠及勝利油田土壤中PAHs的污染特征。濟(jì)南煉油廠土壤中檢出全部16種PAHs，濃度范圍為5．0～593．2btg／kg；勝利油田采油廠土壤中檢出12種PAHs，濃度范圍為227．7-1107．3p,g／kg，兩處土壤均在一定程度上受到了PAHs的污染。三種提取技術(shù)均有很好的提取效率和重現(xiàn)性，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RS
4、D％)小于5％(n=3)，PAHs加標(biāo)回收率為88．7％102．6％，符合美國EPA標(biāo)準(zhǔn)中環(huán)境樣品回收率(70％．140％)及RSD％(乜O％)的要求。(2)采用液液萃取、超聲萃取及固相萃取等三種樣品前處理技術(shù)，結(jié)合本實驗室前期建立的PCBs分析方法，研究建立了簡便快速的PCBs提取及GC．ECD分析技術(shù)。研究測定了廢棄國產(chǎn)變壓器油中類二嗯英類及阻轉(zhuǎn)類PCBs的成分與含量，檢出10種類二嗯英類PCBs(PCB77，81，105，114，118，123，126，156，167，189)和4種阻轉(zhuǎn)類P
5、CBs(PCB45，95，132，149)。實驗還結(jié)合Arcolor1242標(biāo)準(zhǔn)品對變壓器油中PCBs組分進(jìn)行了分析，得至IJPCBs的分布特征：二氯聯(lián)苯含量為14．2％；三氯聯(lián)苯含量為51．2％；四氯聯(lián)苯含量為29．8％；五氯和六氯聯(lián)苯含量為山東大學(xué)博}學(xué)位論文4．8％。由此可見，國產(chǎn)變壓器油以三氯聯(lián)苯為主，高氯代PCBs所占比例很少。三種提取方法的RSD％均小于5％(n=3)，內(nèi)標(biāo)PCB209的回收率為82．3％～91．6％，符合美國EPA標(biāo)準(zhǔn)中回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的要求。2．PAHs、PCB
6、s降解菌的分離與鑒定(1)PAHs、PCBs優(yōu)勢降解菌的分離。采集濟(jì)南市煉油廠、勝利油田采油廠及原濟(jì)南市變壓器廠的土樣，以菲、蒽、芘的混合樣品為唯一碳源，采用定時定量轉(zhuǎn)接、逐步提高碳源濃度的方法，共獲得125個單菌落，經(jīng)降解效率初步測定，選取降解能力較強(qiáng)的兩株細(xì)菌JYll和JY3A進(jìn)行鑒定研究。(2)JYll和JY3A的鑒定。通過形態(tài)特征描述，綜合運(yùn)用生理生化檢測、脂肪酸分析、甲基萘醌分型及GC摩爾百分含量測定等方法，結(jié)合16SrDNA序列分析、構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，JY3A被認(rèn)為屬于Bacillus菌
7、屬的丑subtilis類群，由于Bacillus菌屬目前定名的復(fù)雜性和不確定性，尚需進(jìn)一步PFGE和DNA．DNA雜交實驗數(shù)據(jù)支持鑒定到種。(3)JYl1被鑒定為Janibacter菌屬。該屬1997年方予以命名，確定模式種為Janibacterlimosus，至今僅有5個種的報道。但JYll與該屬模式種有較大差異，與其遺傳距離最近的為Janibacteranophelis。細(xì)胞脂肪酸組成及含量分析結(jié)果表明，JYll在脂肪酸化學(xué)分類特征上表現(xiàn)出獨特的菌株特異性，不同于Janibacterlimos
8、us和Janibacteranophelis的已有報道。初步實驗表明JYll在表現(xiàn)出良好的PAHs降解能力的同時，對PCBs亦有較好的降解能力，因此選擇JYll菌作為后續(xù)研究的出發(fā)菌株。3．Janibactersp．JYll對PAHs、PCBs的降解效果及影響因素研究(1)Janibactersp．JYll對PAHs的降解效果研究了液體培養(yǎng)條件下，Janibactersp．JYll對初始濃度為100mglPAHs的降解效果。結(jié)果表明，Janibactersp．JYll不僅對低分子量
