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《侵染勝紅薊和假馬鞭的雙生病毒的分子鑒定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文侵染勝紅薊和假馬鞭的雙生病毒的分子鑒定姓名：范三微申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：周雪平2003.5.1致謝本論文是在導(dǎo)師周雪平教授的悉心指導(dǎo)下完成的，從論文立題、構(gòu)思、實(shí)驗(yàn)到撰寫的過程中，無不傾注了導(dǎo)師的心血和智慧。導(dǎo)師嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度、執(zhí)著的敬業(yè)精神以及在學(xué)術(shù)方面的造詣。使我在病毒室學(xué)習(xí)的三年中受益匪淺；導(dǎo)師給予的兄長般的點(diǎn)滴關(guān)懷使我倍感溫暖。借此機(jī)會(huì)，我要向一直給予我鼓勵(lì)和教誨的導(dǎo)師表示誠摯的敬意和深深的感謝!病毒室的李桂新老師在實(shí)驗(yàn)室的管理方面盡心盡力，創(chuàng)造了一個(gè)良好的學(xué)習(xí)環(huán)境，同時(shí)李老師在生活上給予我很多幫助，提出過很多良好的建議，其獨(dú)特的人格
2、魅力值得我尊敬。吳建祥老師也曾給過我悉心的指導(dǎo)，在此向你們表示衷心的感謝!還有病毒室的兄弟姐妹們，無論在學(xué)習(xí)還是在生活中你們都是我的良師益朋友，在實(shí)驗(yàn)方面你們都曾給過我熱心的指導(dǎo)和幫助，在此向你們說聲感謝!能與你們在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)我深感榮幸。我也要向所有關(guān)心我支持我給過我?guī)椭呐笥驯硎靖兄x!最后，我要感謝我的親人，他們是我能夠安心學(xué)習(xí)的堅(jiān)強(qiáng)后盾，他們給予我的愛是我人生中最寶貴的財(cái)富!范三微2003年5月18日杭州塑望奎堂堡圭蘭垡鯊j∑—————————————一摘要本研究對侵銎勝窒[塑(Agerat“，'lconyzoides)和!!!燮(Stachytarphetajamaicensis)
3、的雙生病毒進(jìn)行了分子鑒定，并獲得如下結(jié)果：+--I●___-_‘a(chǎn)。一利用三抗體夾心ELISA(TAS—ELISA)及PCR檢測的方法對采白海南的勝紅薊(Ageratu腳conyzoides)和假馬鞭(StachytarpheCajamaicensis)的5個(gè)病樣進(jìn)行了檢測，表明均為粉虱傳雙生病毒。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物克隆后進(jìn)行序列測定，結(jié)果表明存在兩類雙生病毒，其中樣品Hn2存在兩類病毒的復(fù)合侵染。這是在海南首次報(bào)道存在有粉虱傳雙生病毒。在此基礎(chǔ)上我們對勝紅薊和假馬鞭上WTGs基因組進(jìn)行了研究。，／從勝紅薊樣本Hn2中克隆并測定了兩個(gè)ONA—A全序列(Hn2一l和Hn2—19)，經(jīng)NCBI檢索和序
4、列比較分析發(fā)現(xiàn)，Hn2-t除與勝紅薊黃脈病毒(AYVV，基因登錄號(hào)X74516)有85．6％的同源性外，其余均在85．0％以下。根據(jù)雙生病毒全基因組核營酸序列同源性小于89％為不同病毒的原則，我們將這些病毒分離物命名為中國勝紅薊黃脈病毒，英文名為AgeratumyellowveinChinavirus(AYVCNV)。Hn2—19和Hn2—1為Hn2樣品中擴(kuò)增到的不同分子，其基因組序列同源性高達(dá)97．7％，這表明Hn2中存在同種雙生病毒的不同分離物的復(fù)合侵染。從假馬鞭樣本Hn5和Hn6中克隆并測定了三個(gè)DNA—A全序列(Hn5．4、Hn5．1和Hn6-1)，經(jīng)NCBI檢索和序列比較分析發(fā)現(xiàn)，H
5、n5．1、Hn5．4和Hn6．1基因組均與亞洲報(bào)道的粉虱傳雙生病毒的基因組同源性最高。Hn5．4、Hn5．1和Hn6．13個(gè)序列闖同源性>95％，與印度尼西亞報(bào)道的番茄曲葉病毒(ToLCV，基因登錄號(hào)ABl00305)的同源性最高，為81．5％。根據(jù)雙生病毒分類命名原則，Hn5．1、Ha5．4和Hn6．1為同種病毒的不同分離物，我們將這些病毒分離物命名為假馬鞭曲葉病毒(Stachytarphetaleat"curlvirus，StaLCV)。Hn5一l和Hn5—4為從Hn5樣品中擴(kuò)增到的2個(gè)不同的分了，說明Hn5中存在同種病毒不同分離物的復(fù)合侵染。^產(chǎn)’一一塑婆查蘭堡主蘭堡笙壅————————
6、—————————p———————————_————————————————————————一。AbstractGeminivirusesinfectingAgeratumconyzoidesandStac砂tarphetajamaicensiswereidentifiedwithmoleculardatainthispaper．5virussamplescollectedfromAgeratumconyzoidesandStachytarphetajamaicensisinHainanweredetectedwithtripleantibodysandwichELISA(TAS—ELISA)
7、andPCR，resultsshowedallthevirussampleswereinfectedbywhitefly-transmittedgeminiviruses．Sequenceanalysesshowedtwotypesofvirusesexistedamongthosesamples，andsampleHn2wasmix—infectedbytWOtypesofviruses．Ont
