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《衰老1型星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬與凋亡活性變化的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、衰老1型星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬與凋亡活性變化的研究中文摘要星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(centralnervoussystem，CNS)中數(shù)目最多，分布最廣的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。根據(jù)星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生分化的“雙譜系學(xué)說(shuō)"，可以分為1型星形膠質(zhì)細(xì)胞(type1astrocyte，TIA)和2型星形膠質(zhì)細(xì)胞(type2astrocyte，T2A)兩型，體內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞以T1A居多，它行使著星形膠質(zhì)細(xì)胞的大部分功能。隨著星形膠質(zhì)細(xì)胞獨(dú)特生理作用的不斷闡明，人們發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞不僅對(duì)神經(jīng)元起支持作用，還積極參與其功能調(diào)控。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變過(guò)程中，星形膠質(zhì)細(xì)胞起至關(guān)重要的作用。因此，
2、探討T1A生物學(xué)特性的改變情況有助于闡明其在神經(jīng)退行性病變過(guò)程中的作用機(jī)制，為神經(jīng)退行性病變的治療提供新的思路。目的通過(guò)體外建立T1A衰老模型，檢測(cè)衰老TlA部分生物學(xué)特性的改變情況，從而探討衰老T1A在年齡相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變阿爾茨海默病(Alzheimer，sdisease，AD)中的可能作用。方法取新生SD(Sprague-Dawley)大鼠大腦皮質(zhì)進(jìn)行混合膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)，根據(jù)各種膠質(zhì)細(xì)胞黏附能力的差異，運(yùn)用機(jī)械振蕩及差速貼壁法分離純化TlA，繼續(xù)培養(yǎng)90天即可獲得衰老的T1A；以體外培養(yǎng)21天(21DIV)的T1A作為對(duì)照組，體外培養(yǎng)90天(90D
3、IV)的T1A作為實(shí)驗(yàn)組，免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組T1A中p-淀粉樣蛋白1-40(amyloid—p—protein1-40，A131—40)的表達(dá)情況；westernblotting法檢測(cè)兩組細(xì)胞內(nèi)自噬／溶酶體途徑相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白1A／1B輕鏈3(microtubule—associatedprotein1A／1B—lightchain3，LC3)及凋亡相關(guān)蛋白caspase一3和Bcl．2的表達(dá)水平。結(jié)果采用振蕩培養(yǎng)與差速貼壁法培養(yǎng)出了純化的T1A，并成功建立T1A衰老模型。免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記檢測(cè)發(fā)現(xiàn)90DIVT1A表達(dá)ADl．40蛋白，而21DIVT
4、1A中Apl．40蛋白標(biāo)記陰性。westernblotting結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中LC3II蛋白表達(dá)水平顯著增加，而對(duì)照組細(xì)胞中未見(jiàn)明顯表達(dá)，提示了衰老的T1A胞內(nèi)自噬／溶酶體途徑被激活。westernblotting同時(shí)還顯示，與對(duì)照組細(xì)胞相比，‘實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中活化形式的caspase．3蛋白表達(dá)明顯上調(diào)，抗凋亡基因Bcl．2蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，提示了衰老的衰老1型星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬與凋亡活性變化的研究中文摘要T1A胞內(nèi)凋亡被啟動(dòng)。結(jié)論本研究證實(shí)衰老的T1A表達(dá)ABl．40，T1A很可能是AD主要病變老年斑中Ap的重要來(lái)源。衰老T1A內(nèi)自噬／溶酶體途徑被大量激活，很可能
5、與Ap的表達(dá)及降解有關(guān)，而此途徑的激活在AD過(guò)程中的確切作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究。此外，和AD過(guò)程中神經(jīng)元的改變相似，衰老T1A亦發(fā)生凋亡，由此推測(cè)，在AD過(guò)程中星形膠質(zhì)細(xì)胞不僅表現(xiàn)為反應(yīng)性增生還存在凋亡的現(xiàn)象，衰老T1A所表達(dá)的Ap很可能是其凋亡的始動(dòng)因素之一。這些發(fā)現(xiàn)或許能為星形膠質(zhì)細(xì)胞在年齡相關(guān)神經(jīng)退行性病變過(guò)程中的作用研究提供新思路，為此類疾病的臨床治療提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)。關(guān)鍵詞星形膠質(zhì)細(xì)胞；細(xì)胞譜系；衰老；神經(jīng)退行性病變；13-淀粉樣蛋白；凋亡；自噬Il作者：朱云霞指導(dǎo)教師：夏春林教授Changesintheactivityofautophagyandapo
6、ptosisinagedtype1astrocytesAbstractintheactivityofautophagyandapoptosisinagedtype1astrocytesAbstractAstrocytesareglialcells，whicharethelargestinnumbersandwidelydistributiedincentralnervoussystem(CNS)．Accordingtothetheoryofastrocyteslineages，astrocytescailbedividedintotwotypes：type1astro
7、cytes(T1A)andtype2astrocytes(T2A)．T1Aplaymostfunctionsofastrocytesinvivo．Inthepastfewyears，anunprecedentedattentionfocusedonastrocytesasaresultoftheirunusualphysiologicalfunctionthathavebeenfound．Itisknownthat，ratherthanbeingflmeresupporterofneurons，astrocytesareactivelyinvolve
