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《基于雙發(fā)射熒光金納米顆粒的新型生物傳感方法研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、學(xué)校代號(hào)10532學(xué)號(hào)S151101015分類號(hào)密級(jí)碩士學(xué)位論文基于雙發(fā)射熒光金納米顆粒的新型生物傳感方法研究學(xué)位申請人姓名:馬歡培養(yǎng)單位:化學(xué)化工學(xué)院導(dǎo)師姓名及職稱:李旺助理研究員學(xué)科專業(yè):分析化學(xué)研究方向:生命科學(xué)中的新分析方法論文提交日期:2018年5月學(xué)校代號(hào):10532學(xué)號(hào):S151101015密級(jí):湖南大學(xué)碩士學(xué)位論文基于雙發(fā)射熒光金納米顆粒的新型生物傳感方法研究學(xué)位申請人姓名:馬歡導(dǎo)師姓名及職稱:李旺助理研究員培養(yǎng)單位:化學(xué)化工學(xué)院專業(yè)名稱:分析化學(xué)論文提交日期:2018年5月論文答辯日期:2018年5月答辯委員會(huì)主席:
2、蔡青云教授Anovelratio-fluorometricmethodforbiosensingstudybasedondual-emissiveultra-smallgoldnanoparticlesbyMAHuanB.E.(HunanNormalUniversity)2015AthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScienceinAnalyticalChemistryintheGraduateSchoolofHunan
3、UniversitySupervisorResearchassistantLiWangMay,2018湖南大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名:日期:年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論
4、文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)湖南大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于1、保密?,在年解密后適用本授權(quán)書。2、不保密?。(請?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方框內(nèi)打“?”)作者簽名:日期:年月日導(dǎo)師簽名:日期:年月日I碩士學(xué)位論文摘要隨著納米技術(shù)和納米材料不斷進(jìn)步和發(fā)展,從零維到三維,出現(xiàn)了越來越多的新型納米材料。谷胱甘肽包裹修飾的AuNPs(GS-AuNPs)是一種超小的熒光發(fā)光貴族金屬納米顆粒,其粒徑大約為2.5nm,與以往的AuNPs的區(qū)
5、別在于,GS-AuNPs存在著兩個(gè)熒光發(fā)射中心,其熒光波長和強(qiáng)度可調(diào),擁有較大的斯托克斯位移,同時(shí)抗光漂白能力非常強(qiáng),納米顆粒尺寸超小,無毒,生物相容性好,這些優(yōu)點(diǎn)促使AuNPs在生物小分子、重金屬離子、酶、核酸等生物傳感和生物成像方面得到廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。本論文以靈敏度高、選擇性好、響應(yīng)速度快、性價(jià)比高、操作簡單方便的熒光檢測方法為基礎(chǔ),以GS-AuNPs作為熒光探針,在生物傳感領(lǐng)域開展了以下幾個(gè)方面的研究工作:1.基于雙發(fā)射熒光超小金納米顆粒自身的電子轉(zhuǎn)移性質(zhì),構(gòu)建了一種新型的比率型生物傳感分析方法用于農(nóng)藥殘留檢測。本論文中所使用
6、的超小金納米顆粒在800nm處擁有相對(duì)較高的熒光強(qiáng)度,而同時(shí)在600nm處擁有相對(duì)較低的熒光強(qiáng)度,而這種具有不同熒光強(qiáng)度的雙發(fā)射熒光金納米顆粒也是第一次被成功合成。此外值得一提的是,巰基化合物導(dǎo)致金納米顆粒的熒光雙發(fā)射峰發(fā)生完全相反的變化,導(dǎo)致800nm處熒光減弱,600nm處熒光增強(qiáng)。因此,在加入乙酰膽堿酯酶(AChE)水解硫代乙酰膽堿以后,所產(chǎn)生的巰基水解產(chǎn)物能夠與金納米顆粒共價(jià)結(jié)合,從而導(dǎo)致雙發(fā)射峰熒光強(qiáng)度向兩個(gè)相反的方向變化;然而,當(dāng)加入農(nóng)藥作為AChE抑制劑以后,AChE活性被抑制,幾乎不能產(chǎn)生硫代膽堿產(chǎn)物,從而導(dǎo)致金納米顆
7、粒的熒光強(qiáng)度無法發(fā)生明顯的變化。該生物傳感體系對(duì)于農(nóng)藥的檢測具有高的靈敏度,其對(duì)于涕滅威和毒死蜱兩種農(nóng)藥的最低檢測限分別為0.2nM和0.07nM,因此,這一簡單方便的方法非常適用于AChE的活性研究和農(nóng)藥殘留檢測,甚至能夠用于復(fù)雜樣品中的農(nóng)藥殘留的檢測。2.基于胰蛋白酶的穩(wěn)定性及價(jià)格優(yōu)勢,進(jìn)一步發(fā)展了雙發(fā)射熒光金納米顆粒用于蛋白酶活性檢測和農(nóng)藥檢測的生物傳感體系。本文中所用金納米顆粒擁有更高的F800/F615熒光比值,加入胰蛋白酶和帶負(fù)電荷的底物多肽以后,金納米顆粒的熒光強(qiáng)度往兩個(gè)完全相反的方向變化;然而,加入農(nóng)藥作為胰蛋白酶的抑
8、制劑以后,酶活性被抑制,無法產(chǎn)生帶巰基的短肽,導(dǎo)致金納米顆粒熒光變化不明顯,因此,該生物傳感體系能夠用于農(nóng)藥殘留的檢測。3.大部分的熒光分子信標(biāo)一般都使用有機(jī)分子或者納米材料作為其熒光的猝滅劑,但是許多的過渡金屬離子也有