XIP木聚糖酶抑制蛋白對(duì)不同家族木聚糖酶的抑制作用

XIP木聚糖酶抑制蛋白對(duì)不同家族木聚糖酶的抑制作用

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1、2015年第36卷第8期總第485期SILIAOGONGYEXIP木聚糖酶抑制蛋白對(duì)不同家族木聚糖酶的抑制作用■劉新育王夢(mèng)迪焦雪苗郜艷敏陳紅歌(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)微生物酶工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河南鄭州450002)摘要:研究利用畢赤酵母GS115表達(dá)的小麥木聚糖酶抑制蛋白,探索了該XIP抑制蛋白對(duì)GH10和GH11家族木聚糖酶的抑制作用。結(jié)果顯示,該抑制蛋白分子量約為37kDa,高于氨基酸序列計(jì)算所得分子量30.2kDa,可能是由于該蛋白發(fā)生了糖基化作用。該蛋白分別作用于黑曲霉GH10木聚糖酶和哈茨木霉GH11木聚糖酶,得到最適抑制比例分別為1.2?1和8?1,最適抑制時(shí)間

2、分別是50min和30min,最適抑制pH值均為6.0,最適作用溫度均是40℃。關(guān)鍵詞:XIP木聚糖酶抑制蛋白;木聚糖酶;抑制性質(zhì)doi:10.13302/j.cnki.fi.2015.08.010中圖分類號(hào):S816.32文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1001-991X(2015)08-0043-03InhibitionofXIPxylanaseinhibitorondifferentxylanasefamilyLiuXinyu,WangMengdi,JiaoXuemiao,GaoYanmin,ChenHonggeAbstract:Inthisexperiment,xylan

3、aseinhibitorproteinXIPgenefromwheatwasexpressedinPichiaPastorisGS115,thentheinhibitionoftherecombinantXIPproteinonGH10andGH11xylanasewasinvestigated.TheresultsshowedthattherecombinantXIPhadamolecularweightofabout37kDaon?SDS-PAGE,morethanthecalculatedvaluebasedonaminoacidsequence,probablyb

4、ecauseofpro?teinglycosylation.TherecombinantXIPcaninhibitGH10xylanasefromAspergillusnigerandGH11xylanasefromTrichodermaharzianumatainhibitortoxylanasemolarratioof1.2?1and8?1,re?spectively.TheoptimuminhibitiontimeofXIPandGH10orGH11xylanasewas50minand30min,respectively.However,XIPandthetwod

5、ifferentxylanasehavethesimilaroptimuminhibitionpH6.0andthesimilaroptimuminhibitiontemperature40℃.Keywords:XIPxylanaseinhibitorprotein;xylanase;inhibitionproperties[4]木聚糖是小麥等谷物飼料中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子,然而Debyser等發(fā)現(xiàn)小麥中存在對(duì)木聚糖酶活它可以通過增加動(dòng)物消化道食糜黏度,阻斷細(xì)胞中養(yǎng)性具有抑制作用的蛋白成分,近幾年研究發(fā)現(xiàn)木聚糖分的釋放,降低飼料利用率,最終導(dǎo)致動(dòng)物生產(chǎn)性能酶抑制蛋白在小麥、玉

6、米、水稻、大麥、黑麥、燕麥和高[1][5][6]下降。因此,如何消除木聚糖的抗?fàn)I養(yǎng)作用是影響粱中廣泛存在。根據(jù)Gebruers等的估算,小麥中抑開發(fā)谷物、糠麩類飼料資源的一個(gè)關(guān)鍵因素。木聚糖制蛋白的含量遠(yuǎn)大于飼料中木聚糖酶的添加量,因酶可以切割主鏈內(nèi)部的糖苷鍵而將木聚糖水解,降解此,理論上推測(cè)這些抑制蛋白會(huì)對(duì)外加酶造成負(fù)面影[2]產(chǎn)物分別為低聚木糖或木糖,對(duì)解除木聚糖引起的響。由英國ADAS咨詢公司和Danisco動(dòng)物營養(yǎng)分公[3][7]抗?fàn)I養(yǎng)作用較為關(guān)鍵。根據(jù)木聚糖酶催化結(jié)構(gòu)域氨司聯(lián)合發(fā)布的英國國家糧食局項(xiàng)目的調(diào)查報(bào)告中,基酸的同源性,將其歸為糖苷水解酶GH10家族和建

7、議對(duì)歐洲地區(qū)木聚糖酶抑制蛋白含量較高的小麥GH11家族(http://www.cazy.org/)。品種用作飼料時(shí),應(yīng)該施加更高用量的木聚糖酶。因此,研究木聚糖酶抑制蛋白對(duì)不同種類木聚糖酶的抑制性質(zhì),可用來確定GH10和GH11木聚糖酶中哪一作者簡(jiǎn)介:劉新育,副教授,研究方向?yàn)槲⑸锩笇W(xué)。類酶更適合用于飼料添加,以便最大程度地發(fā)揮其酶通訊作者:陳紅歌,博士,教授。活性。收稿日期:2015-03-021材料和方法基金項(xiàng)目:NSFC-河南人才培養(yǎng)聯(lián)合基金[U1404324]1.1試驗(yàn)材料43試驗(yàn)研究2015年第36卷第8期總第48

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