多殺菌素補料發(fā)酵工藝的研究

多殺菌素補料發(fā)酵工藝的研究

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1、生物工程糧油食品科技第22卷2014年第3期多殺菌素補料發(fā)酵工藝的研究鄒球龍,郭偉群,王超,胡翔,韓偉,張曉琳(國家糧食局科學研究院,北京100037)摘要:利用30L及50L發(fā)酵罐,通過控制pH和補料優(yōu)化多殺菌素發(fā)酵工藝,提高多殺菌素的產(chǎn)量。采用優(yōu)化后的補料發(fā)酵工藝,多殺菌素的發(fā)酵產(chǎn)量可達1050μg/mL,較對照575μg/mL提高82%。為多殺菌素的工業(yè)化生產(chǎn)提供了依據(jù)。關(guān)鍵詞:刺糖多孢菌;多殺菌素;補料發(fā)酵工藝中圖分類號:TQ920.6文獻標識碼:A文章編號:1007-7561(2014)03-0

2、086-03Studyonthefed-batchfermentationprocessofspinosadZOUQiu-long,GUOWei-qun,WANGChao,HUXiang,HANWei,ZHANGXiao-lin(AcademyofStateAdministrationofGrain,Beijing100037)Abstract:ThefermentationprocesswasoptimizedbycontrollingpHandfed-batchwiththe30Land50Lferm

3、entationtanksinordertoincreasetheproductionofspinosad.Theyieldofspinosadreachedto1050μg/mLbytheoptimizedmethod,whichincreased82%comparedwiththecontrolgroupof575μg/mL.Thisresearchprovidesthebasisfortheindustrialproductionofspinosad.Keywords:saccharopolyspo

4、raspinosa;spinosad;fed-batchfermentationprocess多殺菌素,又名刺糖菌素,是土壤放線菌刺糖多數(shù)分析儀,美國Nova公司;Waters515/2487型高效孢菌經(jīng)有氧發(fā)酵產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物,屬大環(huán)內(nèi)酯液相色譜儀,美國Waters公司。類化合物。可有效防治鱗翅目、雙翅目、纓翅目、鞘1.2菌種與培養(yǎng)基[1-2]翅目及膜翅目等多種害蟲。多殺菌素及其衍生1.2.1菌種物兼有生物農(nóng)藥的安全性和化學合成農(nóng)藥的速效刺糖多孢菌ASAGF73,本實驗室保存。[7-8]性,因其具有低

5、毒、低殘留、對人安全、對非靶標動物1.2.2培養(yǎng)基和環(huán)境安全、自然分解快等優(yōu)點,曾先后于1999年、斜面及平板培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖5.0,牛肉膏2008年、2010年三次獲得美國“總統(tǒng)綠色化學品挑3.0,酪蛋白胨0.25,瓊脂18.0。pH7.2。戰(zhàn)獎(PresidentialGreenChemistryChallengeA-種子培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖15.0,可溶性淀粉ward)”[3-4]。10.0,豆餅粉3.0,棉籽蛋白3.0,大豆蛋白胨25.0,我國對多殺菌素的研究還處于試驗階段,尚無MgS

6、O42.0。pH7.2。工業(yè)化生產(chǎn)的相關(guān)報道?,F(xiàn)階段多殺菌素的研究熱發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖70.0,棉籽粉20.0,點主要集中在全合成和分子改造上[5-6]。國內(nèi)多殺NaCl3.0,K2HPO4·3H2O0.2,F(xiàn)eSO4·7H2O0.05,菌素發(fā)酵水平較低,需進一步選育高產(chǎn)菌株,提高發(fā)CaCO31.0。大豆油3mL/L,pH7.0。酵工藝水平。本研究利用30L及50L發(fā)酵罐對經(jīng)上述培養(yǎng)基12l℃滅菌30min,葡萄糖單獨115℃滅菌25min。過多次誘變選育獲得的多殺菌素高產(chǎn)菌株進行培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)

7、基同搖瓶,培養(yǎng)基121~124℃在位基配方改良和發(fā)酵工藝優(yōu)化,研究補料發(fā)酵工藝,為滅菌30min。滅菌后pH在6.5~7.0之間。多殺菌素的工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。1材料與方法培養(yǎng)條件:接種量10%,培養(yǎng)溫度29℃,搖瓶轉(zhuǎn)速為240r/min,發(fā)酵罐通過攪拌將溶氧控制在1.1儀器設(shè)備40%以上。15L發(fā)酵罐,德國satorius集團;30L及50L發(fā)1.3實驗方法酵罐,鎮(zhèn)江東方生物工程設(shè)備有限公司;SBM/SS-1.3.1基礎(chǔ)培養(yǎng)基優(yōu)化本實驗利用搖瓶在原發(fā)X搖床,瑞士Kuhner公司;NovaBioProfi

8、le300多參酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加0.3%~0.7%的酵母提取物收稿日期:2013-11-18基金項目:“十二五”國家科技支撐計劃課題(2011BAD03B02-2);及0.4%~1.6%玉米漿干粉進行氮源優(yōu)化。2013年“農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目”(2013GB24490638)1.3.2補料發(fā)酵工藝優(yōu)化作者簡介:鄒球龍,1984年出生,男,科研助理.通訊作者:張曉琳,1975年出生,女,研究員.1.3.2.1pH的優(yōu)化流加

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