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《核盤菌致病機(jī)制的關(guān)鍵因子分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文核盤菌致病機(jī)制的關(guān)鍵因子分析姓名：黃娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：李國慶20060601華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學(xué)位論文荔如需保密，解密時(shí)間年月日是否保密獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果．盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定．與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明，
2、并表示了謝意．研究生簽名：螢婿時(shí)間：》。z年，月乃日學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解“華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存，使用學(xué)位論文的規(guī)定”，即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務(wù)，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文．本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳㈣舴?誦撇予擬簽名日期：函‘年占月加日簽名日期：卅年矽月矽茸注：請(qǐng)將本表直接裝訂在學(xué)位論文的扉頁和目錄之問核盤菌致病機(jī)制的關(guān)鍵因子分析摘要由核盤菌[Sclerotiniasclerotioru
3、ma啪．)debaxy]弓l起的菌核病是油菜上的一種重要病害，嚴(yán)重影響油菜的產(chǎn)量和品質(zhì)。核盤菌EP．1PN受真菌病毒侵染后，其表型發(fā)生了顯著的改變，包括致病力衰退、生長緩慢和菌落形態(tài)異常等現(xiàn)象。這些變化可能是核盤菌致病因子發(fā)生變化引起的，對(duì)這些因子的研究，有助于深入理解核盤菌的致病機(jī)理。本研究以感染真菌病毒的弱致病型菌株和正常的強(qiáng)致病型菌株為材料進(jìn)行了以下研究：首先，對(duì)來源于茄子上的18個(gè)核盤菌進(jìn)行了致病力測(cè)定、培養(yǎng)特性觀察以及dsRNA的檢測(cè)。結(jié)果表明：來源于同一塊茄子田的核盤菌菌株在致病性方面出現(xiàn)分化。18個(gè)菌株中，Ep一1PNA5等是
4、強(qiáng)致病型、Ep—IPA等為中等致病型、Ep．1PN等為弱致病型。將這些菌株的致病性與其培養(yǎng)特性和dsRNA帶型進(jìn)行比較分析，可以看出致病性強(qiáng)的菌株菌絲生長快，菌落擴(kuò)展均勻，不含dsRNA分子或僅含有7．4kb的dsRNA分子。中等致病性菌株菌絲生長較慢，菌落擴(kuò)展均勻，不含dsRNA分子或僅含有7．4kb的dsRNA：5-j。子。弱致病性菌株菌絲生長緩慢，菌落呈扇形擴(kuò)展，不均勻，除菌株Ep一1PD之外，其它弱致病性菌株的氣生菌絲均發(fā)達(dá)，至少含有6．4kb的dsRNA分子。其次，比較了核盤菌菌株Ep-IPN(弱致病型)和Ep-1PNA5(強(qiáng)致病
5、型)在產(chǎn)生草酸、果膠酶、蛋白酶、漆酶和淀粉酶等因子方面的差異。結(jié)果表明：致病力弱的菌株Ep-1PN在產(chǎn)生草酸、果膠酶、蛋白酶和漆酶等方面并未受到明顯抑制。因此，菌株Ep—IPN致病力減弱的原因可能為菌絲生長活力受到抑制，從而抑制了它們?cè)谥参锝M織中的侵襲能力．由此提出了。核盤菌菌絲生長活力在核盤菌致病過程中起重要作用”的推定。采用原生質(zhì)體再生和單菌絲片段分離的方法，分別獲得了具有不同致病力的Ep—IPN衍生菌株。將這些菌株的菌絲生長速度與病斑直徑結(jié)合起來分析，發(fā)現(xiàn)它們之間呈顯著正相關(guān)，這為上述推定提供了直接證據(jù)。顯微觀察表明：Ep．1PN的菌
6、絲原生質(zhì)分布不均勻，部分細(xì)胞的原生質(zhì)出現(xiàn)顆粒狀和稀薄化現(xiàn)象，而菌株Ep-IPNA5的菌絲原生質(zhì)分布均勻、濃密．再次證明Ep．IPN菌絲中弱致病因子存在于細(xì)胞質(zhì)中。另外，在試驗(yàn)中出現(xiàn)了2個(gè)異常的核盤菌菌株Ep．IPB和Ep．1PK。對(duì)其核糖體華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文基因轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(Internaltranscribedspacer,ITS)序列進(jìn)行同源比較。證明這兩個(gè)菌株仍然是核盤菌。Ep-IPB和Ep．IPK在PDA培養(yǎng)基上菌絲生長正常，但不能產(chǎn)生菌核結(jié)構(gòu)，Ep．1PB完全喪失了對(duì)油菜葉片的致病能力，Ep—IPK對(duì)油菜葉片的致病能力受到明顯
7、抑制。這說明菌株Ep．IPB和Ep．1PK在致病性和產(chǎn)生菌核能力上均發(fā)生了變異。對(duì)菌株Ep．1PNA5、Ep．IPB和Ep．1PK產(chǎn)生草酸毒素的定性分析結(jié)果表明：菌株Ep．IPB產(chǎn)生草酸的能力受到明顯抑制，但它能正常分泌果膠酶和蛋白酶?？梢姡闑p．IPB致病力喪失與其草酸合成受到抑制是有關(guān)的。菌株Ep．1PK能夠產(chǎn)生草酸毒素，但其產(chǎn)生存在滯后現(xiàn)象，即菌絲頂端區(qū)域沒有產(chǎn)生草酸的能力。菌株Ep．IPNA5不僅分泌大量草酸，而且草酸的分泌與菌絲生長同步，即能夠?qū)崟r(shí)分泌草酸。這一結(jié)果說明：核盤菌菌絲頂端能否迅速合成草酸毒素對(duì)其致病性的發(fā)揮也是至
8、關(guān)重要的。綜合對(duì)3個(gè)核盤菌菌株菌絲生長、草酸分泌和致病性的比較研究可以看出：草酸在核盤菌致病過程中扮演著重要的角色。旺盛生長的核盤菌菌絲(即菌絲活力高)與分泌草酸毒素有機(jī)結(jié)合才可
