安溪烏龍茶灌木型無性系品種親緣關(guān)系的RAPD分析

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1、福建農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文安溪烏龍茶灌木型無性系品種親緣關(guān)系的RAPD分析姓名:黃慧申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):茶學(xué)指導(dǎo)教師:詹梓金2003.4.1摘要以安溪13個烏龍茶品種為材料,利用RAPD法研究了它們的親緣關(guān)系。結(jié)果表明:1.茶葉RAPD—PCR最佳擴(kuò)增條件:在25ul反應(yīng)體系中加入50ngDNA模板,1.0uTaqDNA聚合酶,2.5mmol幾Mg”,0.2mmol/LdNTPs和0.2umol/L引物。94℃預(yù)變性40s,94℃變性30s,37℃退火lmin,72℃延伸lmin,經(jīng)45個循環(huán),72℃延伸10mil3.2.RAPD結(jié)果:篩選出的20個有效

2、隨機(jī)引物擴(kuò)增出125條帶,擴(kuò)增片段的大小在0.3—3Kb之間。多態(tài)性條帶為63條,占總量的50.4%。因此,13個安溪烏龍茶灌木型無性系品種的多態(tài)性程度并不是很高,表明當(dāng)?shù)夭铇淦贩N基因型具有較大的相似性,其品種之間遺傳差異性較小。3.聚類分析結(jié)果:聚類結(jié)果可將13個品種分為三組,第一組有“墨香”、“本山”、“軟枝烏龍”、“綠芽觀音”;第二組有“紅芽佛手”、“大葉烏龍”;第三組有“圓葉觀音”、“長葉觀音”。而“杏仁”、“鐵觀音1”、“綠芽佛手”、“紅骨烏龍”、“鐵觀音2”品種則獨(dú)立于上述品種。13個品種相似系數(shù)介于74—91%之間,平均相似系數(shù)為85.16%

3、,遺傳距離介于0.0943—0.3011之間,平均遺傳距離為0.1607。鐵觀音1與其它品種平均相似系數(shù)為84.33%,最大值為89%,平均遺傳距離為0.1702,最小值為0.1165;與綠芽佛手相似系數(shù)最小,為78%,低于總的平均相似系數(shù)85.16%,其遺傳距離為0.2357,高于平均遺傳距離0.1607。這表明了鐵觀音1和綠芽佛手的親緣關(guān)系要遠(yuǎn)于鐵觀音1和其它品種的親緣關(guān)系.由遠(yuǎn)及近依次為綠芽佛手、鐵觀音2、紅骨烏龍、杏仁、墨香、長葉觀音、軟枝鳥龍、大葉烏龍、綠芽觀音、圓葉觀音、紅芽佛手、本山.關(guān)鍵詞:烏龍茶;品種;R.APD;聚類分析;親緣關(guān)系;遺傳

4、距離AnassessmentofgeneticrelationshipsbyRAPDinOolongteacultivars(CamelliaSinensis(L)0.Kuntze)fromAnxiAbstract:Inthispaper,13teaplantcultivarswereevaluatedusingRAPDmarkers.Theresultshowed:1.PCRoptimumamplificationofgenomicDNAasfollows:94。Cfor40s:45cyclesof94。Cfor30S,37。Cfor60S,72。Cfo

5、rlrain;72。Cfor10min.111ePeRreactionwasperformedinafinalof25ulcontaining1×Taqpolymerasebuffer.1unitofTaqpolymerase,200uMofeachdNTPs,0.2uMofrandomprimer,2.5mMMgCl2and50ngoftomlgenomicDNA.2.RAPD—PeRusing20randomprimersproducted125readableandreproduciblebinarypaUems(62constant,63varia

6、ble),andthesizeofamplificationproductsrangedfrom0.3kbtO3.0kb.whichwereusedtocalculatethegeneticdiatancesandtoconstructthedendrogram.Outofthe125bands,63bands(about50.4%)werefoundtobepolymorhphic.Itsuggestedthediversitydetectedamongtheteacultivarswasrelativelylow.3.Theresultsofclust

7、eranalysisrevealedthatthreemajorgroupscouldberecognized.Group1included“Moxiang”,“Benshan'’,“Ruanzhiwulong”and“l(fā)vyaguanyin”.Group2comprisedof“Hongyafushou”,“Dayewulong”;Group3included‘'Yuanyeguanyin”,“Changyeguanyin”,However,‘'Xingren”,“Tieguanyin1”,“l(fā)vyafushou”.‘‘Hongguwulong’’and

8、“Tieguanyin2’’weredifferentfromab

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