微生物學病毒與亞病毒

微生物學病毒與亞病毒

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1、第三章病毒和亞病毒第三章病毒與亞病毒第一節(jié)病毒第二節(jié)亞病毒第三節(jié)病毒與實踐第一節(jié)病毒概述病毒的形態(tài)和結構病毒的復制病毒的溶原性病毒對理化因素抵抗力一、病毒的特點和定義第一節(jié)概述1、特點1)不具有細胞結構,具有一般化學大分子的特征。2)一種病毒的毒粒內只含有一種核酸,DNA或者RNA。3)大部分病毒沒有酶或酶系極不完全,不含催化能量代謝的酶,不能進行獨立的代謝作用。4)嚴格的活細胞內寄生,沒有自身的核糖體,沒有個體生長,也不進行二均分裂,必須依賴宿主細胞進行自身的核酸復制,形成子代。5)個體微小,在電子顯微鏡下才能看見。6)對大多數(shù)

2、抗生素不敏感,對干擾素敏感。例如一些簡單的病毒僅由核酸和蛋白質外殼(coat)構成,故可把它們視為核蛋白分子。朊病毒甚至僅由蛋白質構成病毒感染敏感宿主細胞后,病毒核酸進入細胞,通過其復制與表達產生子代病毒基因組和新的蛋白質,然后由這些新合成的病毒組分裝配(assembly)成子代毒粒,并以一定方式釋放到細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復制(replication)。第一節(jié)概述1、特點一、病毒的特點和定義病毒是一類既具有化學大分子屬性,又具有生物體基本特征;既具有細胞外的感染性顆粒形式,又具有細胞內的繁殖性基因形式的獨特生物類群。

3、超顯微的、沒有細胞結構的、專性活細胞內寄生的實體第一節(jié)概述1、特點一、病毒的特點和定義單細胞微生物與病毒性質的比較aDNA病毒和RNA病毒中的一部分;b利福平可抑制痘病毒復制第一節(jié)概述2、定義一、病毒的特點和定義迄今仍無一個科學而嚴謹?shù)亩x病毒為具有獨立于其宿主的進化史的絕對細胞內寄生物,它的DNA或RNA基因組被其所編碼的蛋白質殼體化(encapsidation)。-------------(Fields等,1990年)非細胞生物(真)病毒:至少含核酸和蛋白質二種組分亞病毒(subvirus)類病毒(viroid):只含具侵染

4、性的RNA組分擬病毒(virusoid):只含有不具侵染性的RNA組分朊病毒(prion):只含蛋白質二病毒的宿主范圍第一節(jié)概述病毒幾乎可以感染所有的細胞生物,并具有宿主特異性噬菌體(phage)、植物病毒(plantviruses)動物病毒(animalviruses)三、病毒的培養(yǎng)和純化第一節(jié)概述同微生物學其他學科分支一樣,病毒學的進步完全得益于研究方法和技術手段的發(fā)展。通過病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學研究和實踐的基本技術。1、病毒的培養(yǎng)病毒的培養(yǎng):二元培養(yǎng)物法四、病毒的培養(yǎng)和純化1、病毒的培養(yǎng)噬

5、菌體細菌培養(yǎng)物培養(yǎng)液營養(yǎng)瓊脂平板細菌培養(yǎng)液變清亮細菌平板成為殘跡平板若是噬菌體標本經過適當稀釋再接種細菌平板,經過一定時間培養(yǎng),在細菌菌苔上可形成圓形局部透明區(qū)域,即噬斑(plague)。Microbiology雙層平板法優(yōu)點:①彌補玻璃皿底面不平的缺陷②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上③形成的噬菌斑較大,更有利于計數(shù)Microbiology噬菌斑四、病毒的培養(yǎng)和純化1、病毒的培養(yǎng)動物病毒實驗動物雞胚多種細胞培養(yǎng)四、病毒的培養(yǎng)和純化1、病毒的培養(yǎng)植物病毒敏感植物葉片產生壞死斑,或稱枯斑蛋白質提純方法(鹽析、等電點沉淀、有

6、機溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等)四、病毒的培養(yǎng)和純化2、病毒純化標準純化的病毒制備物應保持其感染性病毒是有感染性的生物體病毒具有化學大分子的屬性純化的病毒制備物的理化性質應具有均一性方法主要化學組成為蛋白質具有一定的大小、形狀和密度差速離心梯度離心(超速離心)第二節(jié)毒粒的性質病毒是一類既具有化學大分子屬性,又具有生物體基本特征;既具有細胞外的感染性顆粒形式,又具有細胞內的繁殖性基因形式的獨特生物類群。毒粒(病毒顆粒):病毒的細胞外顆粒形式,也是病毒的感染性形式。一團能夠自主復制的遺傳物質保護遺傳物質免遭環(huán)境破壞,并作為將遺傳物

7、質從一個宿主細胞傳遞給另一個宿主細胞的載體。蛋白質外殼包膜第二節(jié)毒粒的性質一、毒粒的形態(tài)結構1、病毒的大小和形狀個體小,必需在電鏡下觀察;不同病毒的毒粒大小差別很大;毒粒的形狀:動物病毒有球狀、卵圓狀、磚形植物病毒有桿狀、絲狀、球狀噬菌體有蝌蚪狀和絲狀采用各種電鏡技術觀察毒粒的形態(tài)結構Orfvirus:口瘡病毒(接觸性膿皰皮炎病毒)(負染技術)Ebolavirus:埃博拉病毒(正染技術)Vacciniavirus痘苗病毒(投影技術)甲型H1N1型流感病毒SARS病毒第二節(jié)毒粒的性質毒粒的化學組成毒粒(化學組成)核酸;蛋白質;脂類;

8、碳水化合物;基本化學組成病毒顆粒在化學上表現(xiàn)為核蛋白二、毒粒的化學組成1、病毒的核酸核酸是病毒的遺傳物質;一種病毒的毒粒只含有一種核酸:DNA或是RNA;病毒核酸單鏈DNA(ssDNA,single-strandedDNA);雙鏈DNA(dsDNA

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