病毒和亞病毒-微生物學(xué)(周德慶主編)

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1、第三章病毒和亞病毒了解病毒的特點(diǎn)和定義;病毒的結(jié)構(gòu)、病毒大小、化學(xué)組成、病毒的寄主和種類以及病毒的群體形態(tài)特征。掌握病毒的一般增殖過程。掌握噬菌體、烈性噬菌體、溫和噬菌體、溶源噬菌體的概念,認(rèn)識(shí)和掌握噬菌體的結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)和功能;烈性噬菌體的增殖與溶菌;溫和噬菌體與溶源性細(xì)菌的特點(diǎn);噬菌體的效價(jià)和一步生長(zhǎng)曲線;噬菌體的危害與防治措施。了解什么是亞病毒?亞病毒包括的類病毒、擬病毒、朊病毒等的特性。非細(xì)胞生物(真)病毒:至少含有核酸和蛋白質(zhì)兩種組分亞病毒類病毒:只含具單獨(dú)侵染性的RNA組分?jǐn)M病毒:只含不具侵染

2、性的RNA組分朊病毒:只含蛋白質(zhì)一種組分一、概述(一)什么是病毒?病毒是超顯微的,無細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生,在活細(xì)胞外具一般化學(xué)大分子特征,一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征。(二)特點(diǎn):1、形體十分微小,能通過細(xì)菌濾器,電鏡可見;2、無細(xì)胞結(jié)構(gòu),分子生物,由核酸和蛋白組成,且一種病毒僅含一種類型核酸;3、專性活細(xì)胞內(nèi)寄生,有宿主專一性,無獨(dú)立代謝酶系,依賴宿主自身復(fù)制;4、對(duì)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏感。(三)種類1、微生物病毒:侵染細(xì)菌、放線菌等原核微生物的病毒,通常稱為噬菌體。2、植物病毒:3、脊

3、椎動(dòng)物病毒:4、昆蟲病毒:二、形態(tài)大小(一)大小個(gè)體極小,能通過細(xì)菌濾器,必須通過電鏡觀察,測(cè)量單位為nm,多在100nm左右。(二)形態(tài)1、個(gè)體形態(tài)——病毒粒子的形態(tài)病毒粒子是指成熟的、結(jié)構(gòu)完整的和有感染性的單個(gè)病毒。一般為球狀、棒桿狀、蝌蚪狀和線狀等多種形態(tài)。人、動(dòng)物和真菌的病毒大多呈球狀,少數(shù)為彈狀或磚狀。植物病毒和昆蟲病毒則多數(shù)為線狀和桿狀,少數(shù)為球狀。噬菌體,部分呈蝌蚪狀,部分線狀或球狀。2、群體形態(tài)(1)包涵體包涵體是病毒感染細(xì)胞后,宿主細(xì)胞內(nèi)形成的一種在光學(xué)顯微鏡下可見的蛋白質(zhì)小體。多為

4、圓形、卵圓形或不定形,在細(xì)胞中呈現(xiàn)的大小數(shù)量不一,多數(shù)位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)(質(zhì)型多角體),少數(shù)位于細(xì)胞核內(nèi)(核型多角體),也有的在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)都存在。應(yīng)用:a.用于病毒病的輔助診斷;b.用于生物防治。(2)噬菌斑1)什么是噬菌斑?當(dāng)一個(gè)噬菌體感染一個(gè)敏感細(xì)胞后,隔不久即釋放出一群子代噬菌體,在固體培養(yǎng)基中,它們通過瓊脂層的擴(kuò)散又侵染周圍的宿主細(xì)胞,并引起它們的裂解,如此經(jīng)過多次重復(fù),就出現(xiàn)了一個(gè)由無數(shù)噬菌體粒子構(gòu)成的群體—噬菌斑,它是透亮不長(zhǎng)菌的小圓斑,每一個(gè)噬菌斑是由一個(gè)噬菌體粒子形成的。2)噬菌斑的應(yīng)

5、用:a.作為噬菌體的鑒定指標(biāo)。b.用于純種分離。c.計(jì)數(shù)——噬菌體效價(jià)的測(cè)定效價(jià)表示每毫升試樣中所含有的侵染性的噬菌體粒子數(shù),也即噬菌斑形成單位(pfu)。噬菌斑×稀釋倍數(shù)噬菌體效價(jià)=裂解液毫升數(shù)雙層平板法的優(yōu)點(diǎn):①彌補(bǔ)了原來底面不平的玻璃皿的缺陷;②每一噬菌班的大小接近、邊緣清晰,且不致發(fā)生上下噬菌斑的重疊現(xiàn)象;③有利于計(jì)數(shù)。雙層平板法(3)空斑和病斑在覆蓋一薄層瓊脂的一片單層細(xì)胞上,如某一細(xì)胞感染有病毒,則增殖后的病毒粒子只能擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞,最終形成與噬菌斑相似的空斑。利用病毒空斑可對(duì)有活性的動(dòng)物

6、病毒粒子進(jìn)行計(jì)數(shù)。而病斑則是單層細(xì)胞受腫瘤病毒感染后,導(dǎo)致細(xì)胞劇增,形成類似與菌落的病灶。(4)枯斑指植物葉片上的植物病毒群體。三、病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成(一)病毒粒子的構(gòu)造與化學(xué)組成1、化學(xué)組成多數(shù)病毒只含蛋白質(zhì)和核酸兩種成分。少數(shù)大型病毒還含有脂類和糖類。(1)核酸功能:遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)。1)核酸種類:病毒只含一類核酸——DNA或RNA。含DNA的病毒稱為DNA病毒,含RNA的病毒稱為RNA病毒。2)單鏈(ss)和雙鏈(ds):RNA病毒多數(shù)是單鏈,極少數(shù)為雙鏈,DNA病毒多數(shù)為雙鏈,少數(shù)為單鏈。3)線

7、狀和環(huán)狀:4)正鏈和負(fù)鏈凡堿基排列順序與mRNA相同的單鏈DNA或RNA,稱(+)DNA鏈或(+)RNA鏈,凡堿基排列順序與mRNA互補(bǔ)的單鏈DNA和RNA,稱(-)DNA鏈或(-)RNA鏈。正鏈(+)核酸具有侵染性,負(fù)鏈(-)沒有侵染性。5)核酸分段現(xiàn)象:每個(gè)節(jié)段都有自己獨(dú)特的核苷酸序列,分別轉(zhuǎn)錄一種蛋白質(zhì)。6)核酸含量:隨病毒種類而異,通常在1%~50%之間。(2)蛋白質(zhì)病毒的主要組成部分,其作用是構(gòu)成病毒粒子外殼,保護(hù)病毒核酸免受核酸酶及其它因子破壞;決定病毒感染的特異性;決定抗原性。(3)其它

8、:類脂或脂蛋白,大多數(shù)存在于包膜中。2、病毒粒子的構(gòu)造核心:由DNA或RNA構(gòu)成核衣殼(基本構(gòu)造)病毒粒子衣殼:由蛋白質(zhì)構(gòu)成包膜(非基本構(gòu)造):由類脂或脂蛋白構(gòu)成(二)病毒粒子的基本結(jié)構(gòu)類型1、螺旋對(duì)稱型—TMV呈直桿狀,中空,核酸為ssRNA,其蛋白質(zhì)衣殼由呈皮鞋狀的衣殼粒一個(gè)緊挨一個(gè)一逆時(shí)針方向螺旋排列而成,而病毒RNA則位于衣殼粒內(nèi)側(cè)螺旋狀溝中,以距軸中心4nm處以相等的螺距盤繞于蛋白質(zhì)外殼中,每三個(gè)核苷酸與一個(gè)蛋白質(zhì)亞基(衣殼粒)相結(jié)合,結(jié)構(gòu)極其

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