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《腫瘤細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、腫瘤細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系劉清華bjqinghual@vip.sina.com1WhatKindofDiseaseIsCancer?2SomeCases病例1：男性76歲，2003年9月3日因干咳、少痰、消瘦就診。CT檢查確診肺癌3病例3：女性43歲，因上腹部時(shí)有疼痛伴返酸2年、加重1個(gè)月入院。胃鏡活檢報(bào)告：胃幽門部黏膜內(nèi)低分化癌。4病例8：患者男性，34歲。因發(fā)現(xiàn)右鎖骨腫塊3月入院。檢查右鎖骨外段稍隆起，局部膨大，表面皮膚無紅腫或靜脈怒張，無疼痛；肩關(guān)節(jié)活動(dòng)稍受限。X光示右鎖骨外段明顯骨質(zhì)破壞及增生。病理報(bào)告為右鎖骨惡性淋巴細(xì)胞瘤。5病例
2、11：女性68歲，陰道不規(guī)則流血4-5個(gè)月。婦科檢查：子宮前位，如妊娠2月大小，可觸及數(shù)個(gè)結(jié)節(jié)，質(zhì)地中等。超聲檢查提示子宮混合性占位性病變。CT診斷：宮體癌，右側(cè)卵巢囊腫。病理診斷：子宮惡性混合性苗勒氏瘤，累及輸尿管。6腫瘤學(xué)癌發(fā)生癌演進(jìn)臨床表現(xiàn)癌治療癌診斷7CELLCelljunctionProliferationExtracellularmatrixTelomereSignaltransductionDifferentiationApoptosis82.WhatWeHaveKnownabouttheCellCycleControl?9Onc
3、ogeneAntioncogeneCheckpointsCellDivisionCycleGene,cdcgenes;CyclinsCyclinDependentKinases,CDKsCyclinDependentKinasesInhibitors,CDKIsSphasePromotingFactor,SPFMaturationPromotingFactor,MPF蛋白質(zhì)水平基因水平103.HowtoControlinaNormalCell?11ControlofG1phaseControlofSphaseControlofG2phaseCo
4、ntrolofMphase12ControlofG1phaseProliferationfactorsCheckpoint（G0／G1entrance、RPointG1／S）Cyclin-CDK（cyclinD-CDK4／6、cyclinE-CDK2）P105RBCDKI1314ControlofSphaseCheckpoint(DNAsynthesison、off)Cyclin－CDKPCNA15SPF(cyclinA-CDK1)CyclinE-CDK2作為啟動(dòng)蛋白，識(shí)別autonomouslyreplicatingsequence，ARS，
5、激活復(fù)制起點(diǎn)可能是originrecognitioncomplex，ORC的組成部分Cyclin－CDK1617PCNA細(xì)胞增殖核抗原DNA聚合酶δ的亞基直接參與DNA復(fù)制和修復(fù)18ControlofMphaseCheckpointMPF（cyclinB-CDK1)19CheckpointG2／M：DNA復(fù)制沒有完成，激活wee1-mik1蛋白激酶，細(xì)胞阻滯于G2期。M中／晚期：檢查微管蛋白的量、微管組織中心功能、紡錘體極性、微管與動(dòng)粒附著、或附著在動(dòng)粒上產(chǎn)生的張力。20MPF的活性調(diào)節(jié)214.What’sWronginaTumorCell?2
6、2oncogene的過表達(dá)antioncogene的失活cyclin基因和表達(dá)蛋白的異常cdki基因和表達(dá)蛋白的異常235.HowtoEvaluateCellProliferation?24CellProliferationKinetics研究生物體內(nèi)各種細(xì)胞群體在新生、增殖、消亡過程中處于各種狀態(tài)的細(xì)胞數(shù)量、時(shí)間參數(shù)和分布位置的技術(shù)手段。25檢測(cè)方法1.細(xì)胞計(jì)數(shù)2.生長(zhǎng)曲線3.倍增時(shí)間4.生長(zhǎng)分?jǐn)?shù)265.丟失系數(shù)6.標(biāo)記指數(shù)7.分裂指數(shù)8.細(xì)胞周期參數(shù)271.CellCounting直接計(jì)數(shù)－－臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)法比色半定量－－四唑鹽法28四唑鹽法[
7、3-4,4-二甲基噻唑－2]，5－二苯基四氮唑溴鹽，簡(jiǎn)稱MTT;線粒體的琥珀酸脫氫酶將MTT還原為難溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶物;比色測(cè)定間接反映活細(xì)胞數(shù)量。29細(xì)胞培養(yǎng)顯色:加入MTT溶液(5mg/ml)，繼續(xù)培養(yǎng)4h，加DMSO，振蕩10min比色：490nm波長(zhǎng)測(cè)定光吸收值30BreastCancerResearchandTreatmeat2004;84:251-2606.TheirResearchStrategy?7.TheTechnologyTheyUsed?312.GrowthCurveCellculture;Cellcounting：每次至
8、少3瓶，每瓶至少3次，取平均數(shù)；共做7天；作圖：培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，細(xì)胞數(shù)為縱坐標(biāo)，在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上作圖。320.10246810Time/dayCanc
