心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制

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1、www.CRTER.org侯波，等.心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制侯波1，朱先云2，王學(xué)坤3(青島市膠州中心醫(yī)院，1心內(nèi)科，2內(nèi)分泌科，山東省青島市266300；3青島市中心醫(yī)院心內(nèi)科，山東省青島市266042)引用本文：侯波，朱先云，王學(xué)坤.心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制[J].中國組織工程研究，2016，20(41):6190-6196.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.41.017ORCID:0000-0002-7743-0450(侯波)

2、文章快速閱讀：心臟干細胞的分離培養(yǎng)及檢測侯波，男，漢族，1969年生，山東省膠州市人，1992年濰坊醫(yī)學(xué)院畢業(yè)，副主任醫(yī)師。中圖分類號:R394.2文獻標識碼:B文章編號:2095-4344(2016)41-06190-07稿件接受：2016-09-07蘇木精-伊紅染色、Masson染色、免疫熒光染色大鼠心臟干細胞分離、培養(yǎng)免疫熒光檢測相關(guān)分子標志物6191P.O.Box1200,Shenyang110004kf23385083@sina.comwww.CRTER.org侯波，等.心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制文題釋義：干

3、細胞niche：在心臟干細胞的自我更新、生長增殖、多向分化和持續(xù)存活等方面需要依賴特定的微環(huán)境，即干細胞niche。干細胞niche對干細胞的作用是通過多種因素起作用的，例如干細胞間的相互作用、干細胞與鄰近分化細胞的相互作用、干細胞與細胞因子、生長因子及黏附因子的相互作用等，干細胞niche調(diào)控干細胞自我更新、多向分化是一個復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)。心肌重構(gòu)：是由一系列復(fù)雜的分子和細胞機制導(dǎo)致心肌結(jié)構(gòu)、功能和表型的變化，這些變化包括心肌細胞肥大、細胞凋亡、胚胎基因和蛋白質(zhì)的再表達、心肌細胞外基質(zhì)量和組成的變化。摘要背景：體外環(huán)境下進行心臟干細胞

4、培養(yǎng)的過程中，生長微環(huán)境可能會對細胞的的增殖等產(chǎn)生一定的影響。目的：在體外環(huán)境下培養(yǎng)大鼠心臟干細胞，探討心臟干細胞增殖、遷移的可能機制。方法：納入SD大鼠10只，獲得心肌組織塊進行原代和傳代培養(yǎng)。收集第3代心臟干細胞進行免疫熒光染色，進行干細胞鑒定，檢測干細胞生長因子受體(c-kit)和CD45、CD90的表達。收集培養(yǎng)后的組織塊，隨機分為2份，一份用多聚甲醛進行固定，常規(guī)石蠟包埋后切片，進行蘇木精-伊紅染色、Masson染色以及細胞凋亡檢測；另一份在培養(yǎng)基中添加EdU標記增殖細胞，采用免疫熒光染色檢測c-kit陽性細胞以及基質(zhì)金

5、屬蛋白酶2，9及轉(zhuǎn)化生長因子β1等表達。結(jié)果與結(jié)論：①細胞鑒定結(jié)果：心肌組織培養(yǎng)7-10d后有明亮的圓形細胞長出，細胞貼壁后呈梭狀，生長、增殖能力旺盛。免疫熒光染色可觀察到大量細胞呈c-kit、CD45陽性表達，CD90陰性表達；②細胞凋亡情況：培養(yǎng)的組織塊切片后染色見大量新生細胞生長的同時伴隨心肌細胞的凋亡；③免疫熒光染色結(jié)果：經(jīng)EdU標記后陽性細胞分布于心肌間隙，基質(zhì)金屬蛋白酶2，9及轉(zhuǎn)化生長因子β1少量表達，但周圍心肌組織上述3因子表達明顯增多。④結(jié)果表明，心肌組織體外培養(yǎng)可獲取心臟干細胞，伴隨細胞增殖和遷移，其機制與基質(zhì)金

6、屬蛋白酶2，9及轉(zhuǎn)化生長因子β1的表達有關(guān)。關(guān)鍵詞：干細胞；培養(yǎng)；心臟干細胞；心臟；細胞穩(wěn)態(tài)；微環(huán)境；作用機制主題詞：組織工程；干細胞；細胞增殖6191P.O.Box1200,Shenyang110004kf23385083@sina.comwww.CRTER.org侯波，等.心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制Cardiacstemcells:isolation,culture,proliferationandmigrationHouBo1,ZhuXian-yun2,WangXue-kun3(1DepartmentofCard

7、iology,2DepartmentofEndocrinology,JiaozhouCentralHospitalofQingdao,Qingdao266300,ShandongProvince,China;3DepartmentofCardiology,QingdaoCentralHospital,Qingdao266042,ShandongProvince,China)AbstractBACKGROUND:Intheprocessofcardiacstemcellcultureinvitro,thegrowthmicroenv

8、ironmentmayhavesomeeffectsonthecellproliferation.OBJECTIVE:Toinvestigatethepossiblemechanismofproliferationandmigrationofrat