不同抗原修復(fù)法對(duì)視網(wǎng)膜石蠟切片相關(guān)功能蛋白表達(dá)檢測(cè)的影響

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1、眼科研究2010年1月第28卷第1期15實(shí)驗(yàn)研究不同抗原修復(fù)法對(duì)視網(wǎng)膜石蠟切片相關(guān)功能蛋白表達(dá)檢測(cè)的影響李穎胡運(yùn)韜馬汀馬志中TheeffectsofvariedantigenretrievalmethodsonimmunohistochemistryoffunctionalproteinsinretinalparaffinsectionLiYing,HuYuntao,MaTing,MaZhizhong.PekingUniversityThirdHospital,PekingU

2、niversityEyeCenter,Beijing100191,ChinaAbstractBackgroundAntigenretrievalmethodisthekeyofimprovingthesuccessfulrateofimmunohistochemicalassayinparaffinsections.Tostudyanavailablemethodofantigenretrievalisagoaltoachievebothgoodimmunochemistryresult

3、andpreservingretinalproteins.ObjectiveTheaimofpresentstudyistoinvestigatetyrosindigestion,hightemperatureheatpressure,waterbathheatingandmicrowaverepairinantigenretrievalforretinaltissues.MethodsRetinaltissuewasisolatedandobtainedfromcleanChinch

4、illarabbits.Fourhundredsretinalparaffinsectionswereprepared.Fourkindsofantigenretrievalmethodsforretinaltissueincludingtyrosindigestion,hightemperatureheatpressure,waterbathheatingandmicrowaverepairwereusedrespectively.Thedepigmentatedretinalparaffi

5、nsectionwithoutantigenretrievalwasusedascontro.lThepositiveratesofexpressionofCRALBP,Rhodopsinandopsinproteinswereevaluatedandcomparedamongfourkindsofantigenretrievalmethodsbyimmunochemistry.ResultsCRALBP,Rhodopsinandopsinproteinwaspositivelyexpres

6、sedincytoplasmofretinalpigmentepithelialcellsandtheoutersegmentofphotoreceptorrespectively.Nosignificantdifferencewasfoundinthepositiveexpressionratesofthesethreeproteinsamongfourkindsofantigenretrievalmethods(P>005),butthedifferencesintissueintegri

7、tyandbackgroundstainingwerestatisticallysignificant(P<001).Thestructuraldamageofretinaincludedlossandpuckerofscalera,crackofnucleusandabnormalbackgroundstaininhightemperatureheatpressuremethod,waterbathheatingmethodandmicrowaveretrievalmethod.Howev

8、er,stableCRALBP,Rhodopsinandopsinproteinexpressionandstraineffectiveness,clearbackgroundwithoutunspecificstainingandintegratedtissuewereseenintyrosindigestionmethod.ConclusionDuringtheclinicalpathologyanalysisofretinaltissue,theapplicationoftyrosin

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