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1、·236·中國實驗血液學(xué)雜志JournalofExperimentalHematology2002;10(3):236-239人臍血清代替胎牛血清培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞1王立茹,史 斌,崔建英,韓淑霞,王申五,陳金莉1(首都醫(yī)科大學(xué)附屬復(fù)興醫(yī)院血液科,北京100038;北京大學(xué)人民醫(yī)院血液病研究所,北京100044)摘要 為探討臍血清(umbilicalcordserum,UCS)取代胎牛血清(fetalcalfserum,FCS)對體外培養(yǎng)體系中樹突狀細(xì)胞分化和功能的影響,用臍血清代替FCS培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)
2、胞表型和MTT法檢測混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的能力。結(jié)果表明,臍血清培養(yǎng)的DC(UCS2DC)表面CD83,CD86和HLA2DR的表達(dá)率明顯高于FCS組DC;而CD1a表達(dá)率低于FCS2DC;對混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的刺激能力UCS2DC與FCS2DC均較對照組明顯增強(qiáng),但UCS2DC與FCS2DC間無明顯差別。結(jié)論:臍血清代替FCS可以產(chǎn)生完全不含異種蛋白、表型比含F(xiàn)CS體系培養(yǎng)的DC更成熟,且有較強(qiáng)的刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖能力的DC。關(guān)鍵詞 樹突狀細(xì)胞;臍血;臍血清;胎牛血清中圖分類號 R33111DendriticCel
3、lsCulturedwithHumanUmbilicalCordSeruminSteadofFetalCalfSerum1WANGLi2Ru,SHIBin,CUIJian2Ying,HANShu2Xia,WANGShen2Wu,CHENJin2Li(DepartmentofHematology,FuXingHospital,CapitalUniversityofMedicalSciences,Beijing100038;1InstituteofHematology,People′sHospital,PekingUniver
4、sity,Beijing100044)AbstractToinvestigatewhetherthedendriticcells(DC)couldgrowupinculturalsystemwithumbilicalcordserum(UCS),theUCSwasusedinthecultureinsteadoffetalcalfserum.ThephenotypeofdendriticcellswasdetectedbyflowcytometryandtheantigenpresentingabilityofDCinal
5、lo2MLRwasmeasuredbyMTTassay.TheresultsshowedthatDCgrowninUCS(UCS2DC)hadhigherexpressionrateofCD86,CD83andHLA2DRthanthatingrowninFCS(FCS2DC).(P<0.05),andtheirexpressionofCD1awaslowerthanthatofFCS2DC.TheabilitytoinduceTcellproliferationhadnodifferencebetweenUCS2DCan
6、dFCS2DC.ItissuggestedthatdendriticcellswithmorematurephenotypehadbeenproducedinthemediumcontainingUCSthanthoseinthemediumcontainingFCS,andUCS2DCpossessedpotentabilitytostimulateproliferationofallogeneicTcells.Keywordsdendriticcell;umbilicalcordblood;umbilicalcords
7、erum;fetalcalfserum 樹突狀細(xì)胞(dendriticcell,DC)是功能最強(qiáng)的材料與方法[1]抗原呈遞細(xì)胞。它通過表面豐富的免疫分子,不僅可以聚集免疫細(xì)胞,更有利于免疫細(xì)胞間信息傳研究對象遞;它還分泌多種細(xì)胞因子,誘導(dǎo)高效的特異性免疫正常人外周血3份,由北京市血站提供。[2]反應(yīng)。而腫瘤患者免疫功能低下的原因之一是實驗材料抗原呈遞細(xì)胞數(shù)量不足或功能低下,腫瘤的清除依細(xì)胞因子:rhGM2CSF購自邦定生物醫(yī)學(xué)公司?？砍渥愕乃拗骺乖蔬f細(xì)胞功能,因此DC可能在rhIL24和rhTNF2α購自美國Pepro
8、2Tech公司。單治療腫瘤、預(yù)防腫瘤發(fā)生、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作克隆抗體均購自美國PharMingen公司,包括:PE標(biāo)[3]用。目前人們嘗試用各種方法培養(yǎng)DC,以制備記的鼠抗人CD86,HLA2DR和CD4;FITC標(biāo)記的治療腫瘤的DC疫苗。傳統(tǒng)的DC培養(yǎng)體系多采用鼠抗人CD1a,CD83和CD8;F
