肝癌患者血清和癌組織中鋅指蛋白216表達(dá)增加

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1、2008年6月第28卷第6期基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床Basic&ClinicalMedicineJune2008V01.28No.6文章編號:1001-6325(2008)06—0610.04肝癌患者血清和癌組織中鋅指蛋白216表達(dá)增加研究孛g-文顧香芳1,余德才2(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院1.醫(yī)學(xué)檢驗中心科研部;2.普外科,江蘇南京210008)摘要:目的尋找肝癌相關(guān)抗原。方法應(yīng)用SEREX技術(shù)對肝癌組織cDNA文庫進(jìn)行血清學(xué)篩選,獲得人類鋅指蛋白ZNF216。利用原核表達(dá)和親和層析技術(shù)獲得ZNF216的6·His

2、融合蛋白,建立間接ELISA方法,檢測血清中產(chǎn)生的ZNF216抗體水平;利用RT.PCR技術(shù)檢測肝癌患者肝癌組織及癌旁組織內(nèi)ZNF216mRNA的水平。結(jié)果肝癌患者血清中產(chǎn)生的抗ZNF216抗體水平高于正常個體,ZNF216mRNA在肝癌組織內(nèi)的表達(dá)明顯高于癌旁組織。結(jié)論ZNF216在肝癌病人血清及癌組織內(nèi)的過表達(dá)可能參與肝癌的發(fā)生,但還需要進(jìn)一步研究證明。關(guān)鍵詞:肝癌;SEREX;腫瘤抗原;鋅指蛋白216中圖分類號:R730.3文獻(xiàn)標(biāo)志碼:AZincfingerprotein216up—expressedi

3、nhepatocellularcarcinomatissueandseraGUXiang—fan91,YUDe—cai2(1.Dept.ofScienceandResearchofLaboratoryMedicine;2.Dept.ofGeneralSurgery,theAffiliatedDrumTowerHospitalofNanjiIlgMedicalSchool。Nanjing210008,Chim)Abstract:ObjectiveTofindantigensrelatedwithhepatoce

4、llularcarcinoma(HCC).MethodsHumanZincFin—gerProtein216(ZNF216)WasidentifiedbySEREX(serologicalanalysisofrecombinantcDNAexpressionlibrar-ies,SEREX).rIk6宰HisfusionproteinofZNF216wasexpressedbybacteriaandpurifiedwithanickelaffinitychromatographycoluinn.Theleve

5、lofanti.ZNF216antibodyintheseraWasdetectedbyEHSA.a(chǎn)ndZ^f眩J6mRNAlevelinHCCtissueanditsperipheralnormaltissueWasdetectedbyRT.PCR.ResultsThelevelofanti.ZNF216antibodyintheseraofHCCpatientswashigherthanthatofhealthyindividuals.ZⅣF2J6mRNAlevelinHCCtissueiSevident

6、lyhigherthanperipheralnormaltissue.ConclusionTheover—expressionofZNF216intheHCCseraandtissueindicatesthatZNF216perhapsplaysaroleinHCC.Keywords:HCC;SEREX;tumorantigen;ZNF216肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是全球最常見的惡性腫瘤之一。目前,臨床中用于診斷肝癌的標(biāo)志物僅有AFP,并且還有30%的漏診率。因此,迫切需

7、要鑒定一些能特異性在早期肝癌組織中表達(dá)而在正常組織中不表達(dá)或極少量表達(dá)的分子和細(xì)胞標(biāo)志物,這對于肝癌早期診斷和治療將具有重要的指導(dǎo)意義。SEREX(semlogicalidentificationof收稿日期:2007—07—31修回日期:2007—12—28antigensbyrecombinanteDNAexpressioncloning,SEREX)技術(shù),即應(yīng)用重組cDNA表達(dá)克隆對腫瘤抗原進(jìn)行血清學(xué)鑒定的一種手段¨。2]。我們應(yīng)用SER-EX方法對肝癌組織cDNA文庫進(jìn)行血清學(xué)篩選,獲得N36這一克隆

8、,N36即為人類鋅指蛋白ZNF216(ZincFingerProtein216,ZNF216)。本研究初步研究了ZNF216在肝癌中的可能作用,這將豐富腫瘤抗原2008.28(6)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床Basic&ClinicalMedicine611庫,并對肝癌的臨床診斷和治療提供重要依據(jù)。1實驗1.1肝癌患者血清篩選cDNA文庫肝組織eDNA文庫購于NOVAGEN,是由7個肝癌病人的肝組織構(gòu)建成的,其連

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