高速逆流色譜法分離純化丹參并嘗試制訂中藥指紋圖譜

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1、!"卷#期生物工程學報’()*!"+(*#$%%&年!!月!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12+(,-./-0$%%&!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!高速逆流色譜法分離純化丹參并嘗試制訂中藥指紋圖譜顧銘"歐陽藩蘇志國(中國科學院過程工程研究所生化工程國家重點實驗室,北京!%%%5%)摘要用國產(chǎn)高速逆流色譜(BCDDD)分離純化中草藥———丹參,選用正己烷1乙醇1水體系,固定相保留率達到35E5F。采用分步

2、洗脫,&個產(chǎn)地丹參各分離得到!$個洗脫組分,經(jīng)高效液相色譜儀和紫外光譜儀檢測證明&張BCDDD洗脫圖譜中對應洗脫峰為同一組分。BCDDD洗脫圖譜不包含非共有峰,并且對應洗脫峰保留時間的相對標準偏差GCHI&F,符合國家標準關(guān)于制訂指紋圖譜方法學考察資料的技術(shù)參數(shù)。因此,BCDDD作為制訂指紋圖譜的方法之一具有可行性。關(guān)鍵詞高速逆流色譜(BCDDD),中藥指紋圖譜,丹參中圖分類號G"!3文獻標識碼J文章編號!%%%1&%#(!$%%&)%#1%32%1%9[9]高速逆流色譜(B;>K1CL--MD(N

3、07LKP,BCDDD)是一種基于液1液多級逆流萃取離純化丹參最多得到5種組分。本文一方面摸建立的色譜體系,沒有固相載體,避免了待分離樣品索分離丹參適宜的溶劑體系和儀器參數(shù),分離得到與固相載體表面產(chǎn)生化學反應而變化和不可逆吸盡可能多的組分,使洗脫圖譜中包含充分的化學信[!]附;高速逆流色譜可以直接純化粗制樣品;尤其適息,為制訂指紋圖譜打下基礎(chǔ);另一方面探索使用高[$]于分離極性較大的組分;BCDDD的儀器及試劑成速逆流色譜制訂中藥指紋圖譜的

4、可行性。本明顯低于高效液相色譜(B;>KQ-0R(0.707LKP,BQSD),適用于制備高純度、高附加值的化合物。!"!儀器中藥材的主要活性成分是次生代謝物,對后天!"!"!4U:1&%%半制備型高速逆流色譜儀(深圳同的生長環(huán)境依賴性很強,使得活性成分的種類和含田生化技術(shù)有限公司,中國)。聚四氟乙烯管纏繞在量因地域、氣候和采收期有較大的差異,迫切要求建&個水平軸上形成螺旋管(管直徑$E#..,分離體積立中藥材的質(zhì)量標準。中藥指紋圖譜是近年來被廣&%%.S),進樣圈$%.

5、S。高速逆流色譜配備了柱塞式泛采用的質(zhì)控方法,最常用的分析手段是色譜和光泵(C系列,北京圣益通技術(shù)開發(fā)有限責任公司,中(波)譜。光譜和波譜指紋圖譜由于選擇性的限制,國),紫外檢測儀(55$&J,北京新技術(shù)應用研究所,中不能表達中藥這樣的混合體系中各種不同化學成分國),記錄儀(&%93型,四川記錄儀器廠,中國)。濃度分布的整體狀況,因此色譜指紋圖譜成為首選!"!"#高效液相色譜(!%J,L系列,島津,日本):雙[2]泵系統(tǒng)(SD1!%J4,L),紫外檢測儀(CQH1!%J,L),柱溫方法。4SD操作簡便、成本低廉,但精密

6、度較差;BQSD精密度高,重現(xiàn)性好,適用范圍較廣,但需要箱(D4V1!%JC,L),系統(tǒng)控制器(CDS1!%J,L),控制軟有嚴格的樣品預處理,很難分析,易造成固定相吸附件(D)7@@1,L),$%!S進樣圈;色譜柱:反向D!5柱的樣品和高粘度的樣品。因此本文提出使用高速逆(!9%..W2E#..X*H*,9)。!.流色譜(BCDDD)作為制訂中藥指紋圖譜的方法之!"#試劑一。!"#"!高速逆流色譜試劑采用分析純(天津化學試選用丹參作為模式物。丹參具有活血通經(jīng)、去劑一廠)。水是通過反滲透Y;);1Z(!5Y",Y;))

7、;L(0-,瘀止痛、清心除煩等功效,近來也被用于糖尿病的輔[CJ)制備。收稿日期:$%%&1%21!%,修回日期:$%%&1%31$2。"通訊作者。4-):5#1!%15$#$3%#!;678:5#1!%1#$995!32;:1.7;):07;.?@;<7*A(.N期顧銘等:高速逆流色譜法分離純化丹參并嘗試制訂中藥指紋圖譜G;3!"#"#高效液相色譜試劑采用一級色譜純(!"#$%&助于提高固定相保留,使系統(tǒng)的分辨率得到保證,同’("%)*"+"(,-./0.,12)。將反滲透處理過的水時兼顧運行時間,確定M’

8、,,,轉(zhuǎn)速為L99&?="),流動(345!,5"66"7-&%,1’8)通過9:;<濾膜減壓過濾相流速為A=/?="),固定相保留率達到G4:4E;從進"=后使用。標準對照品用高速逆流色譜的流動相配制樣閥進樣N=/,399=>;洗脫過程中紫外檢測儀在成3=>?=/,經(jīng)9:;<"=濾膜過濾使用。A49)=連續(xù)監(jiān)測;根據(jù)記錄儀顯示的

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