細胞內(nèi)游離鈣離子測定方法

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《細胞內(nèi)游離鈣離子測定方法》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫

1、食品與藥品FoodandDrug2006年第8卷第12A期25細胞內(nèi)游離鈣離子的測定方法郭瓊杰1,*孫淑娟2*(1.山東大學(xué)藥學(xué)院,山東濟南250012;2.山東省千佛山醫(yī)院,山東濟南250014)摘要:細胞內(nèi)游離鈣離子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及細胞的各種生理病理現(xiàn)象密切相關(guān),因此檢測細胞內(nèi)游離鈣離子具有非常重要的意義。其測定方法隨著近年來儀器與技術(shù)的進步而有了長足的發(fā)展,包括電極法、同位素示蹤法、核磁共振法、高流通量測定法、離子指示劑法等,本文主要介紹這些方法的特點和應(yīng)用情況。關(guān)鍵詞:細胞內(nèi)鈣離子;測定方法;綜述中圖分類號:Q582文獻標(biāo)識碼:A文章編號:1672-979

2、X(2006)12-0025-03DevelopmentofAssayMethodforIntracellularFreeCalciumGUOQiong-jie1,SUNShu-juan2*(1.SchoolofPharmaceuticalSciences,ShandongUniversity,Jinan250012,China;2.QianfoshanHospitalofShandongProvince,Jinan250014,China)Abstract:Thecalciumionisoneofthemostimportantuniversalsignali

3、ngmolecules,regulatingalmostallknowncellularfunctionsandprocesses.Thechangeofintracellularfreecalciumconcentrationiscloselycorrelatedwithsignaltransductionandkindsofcellularpathophysiologicalphenomena.Therefore,themeasurementofintracellu-larfreecalciumisverymeaningful.Inthisarticle,w

4、ereviewthemethodsandtechniquesforintracellularfreecalciumdetermination,includingelectrodemethod,isotopetracermethod,NMRmethod,high-throughoutmethod,ionindicatormethodandsoon.Thefeatureandapplicationsofeachmethodarealsodiscussed.Keywords:intracellularcalciumion;assaymethod;review鈣離子(C

5、a2+)是已知最通用的細胞內(nèi)信使之電勢差(V)符合V=28log(C/Cr)的Nernst方一,幾乎可以調(diào)控所有細胞功能。細胞內(nèi)Ca2+濃度程。Ca2+選擇性電極的動態(tài)范圍比熒光指示劑寬,的改變,通過不同的信號通路、細胞器以及跨細胞但對游離Ca2+改變的反應(yīng)時間(約0.5~1s)比熒Ca2+依賴過程的幅度和周期來調(diào)節(jié)細胞過程[1]。實際光指示劑慢[4]。該方法能直接測定細胞內(nèi)Ca2+濃上,Ca2+幾乎在所有生物的細胞過程中都起著主要度,連續(xù)提供活細胞內(nèi)Ca2+的動態(tài)變化信息,但是的協(xié)調(diào)作用[2]。只有游離鈣才能在細胞內(nèi)發(fā)揮其生物電極穿刺不適合太小的細胞。離子選擇

6、性微電極作活性,要準確分析鈣在生命活動中的作用,就必須為一種快速、方便和相對便宜的方法,目前多用于準確地測量細胞內(nèi)鈣濃度的瞬時動態(tài)變化[3]。近年植物組織及細胞內(nèi)Ca2+測定[5]。來,細胞內(nèi)Ca2+的測定技術(shù)在國內(nèi)外發(fā)展迅速,本2同位素示蹤法文就這一方面加以總結(jié)。對Ca2+利用放射性核素45Ca2+進行示蹤,可測1電極法量出通過細胞膜轉(zhuǎn)運到細胞內(nèi)Ca2+增加的速度及濃度Ca2+選擇性電極是通過電勢來測定Ca2+的濃度,大小,揭示鈣離子通道和鈣離子泵的作用,目前主將離子絡(luò)合劑摻入液態(tài)的親脂膜,使膜自身可選擇要用于測定跨膜Ca2+流動[6],靜息狀態(tài)的測定效果不性

7、的從水溶液中提取離子,并加以轉(zhuǎn)移,產(chǎn)生與濃理想。放射性同位素作為示蹤劑可以檢測1.0×l0-18~度差成比例的膜電勢。在沒有其它離子干擾的情況1.0×10-19的放射性核素,比普通化學(xué)分析法的靈敏下,未知離子濃度(C)和參比濃度(Cr)間的度10-12g要高得多,確定放射性示蹤劑在組織器官收稿日期:2006-10-09作者簡介:郭瓊杰(1982-),女,河北秦皇島人,碩士研究生,藥學(xué)專業(yè)*通訊作者:孫淑娟,女,碩士生導(dǎo)師,Tel:0531-82968900-2366,E-mail:sunshujuan888@163.com26食品與藥品FoodandDrug20

8、06年第8卷第12A期中

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