香菇多糖對鯉魚(cyprinus carpio)離體培養(yǎng)免疫細(xì)胞的活性調(diào)節(jié)作用

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1、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)JournalofAgriculturalBiotechnology2008,16(4):616~621·研究論文·香菇多糖對鯉魚()離體培養(yǎng)免疫細(xì)胞的活性調(diào)節(jié)作用*1,?丁煒東1,?張柳2,GalinaJeney?3,?徐跑1,?殷國俊1**曹麗萍(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心,農(nóng)業(yè)部水生動(dòng)物遺傳育種和養(yǎng)殖生物學(xué)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,無錫214081;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué),武漢430070;3.ResearchInstituteforFisheries,AquacultureandIrrigation,?Annalight8,SzarvasH4440,H

2、ungary)摘要:采用Percoll密度離心等技術(shù),對鯉魚()的頭腎巨噬細(xì)胞和外周血白細(xì)胞進(jìn)行分離純化,并離體培養(yǎng)。體外暴露不同濃度的香菇多糖后,分別采用MTT(3(4,5dimethylthiazol2yl)2,5diphenyltetrazoliumbromide)法測定它們對鯉魚外周血白細(xì)胞增殖的影響;NBT(nitrobluetetrazolium)還原法和Griess試劑顯色法測定對頭腎巨噬細(xì)胞的呼吸爆發(fā)的影響;實(shí)時(shí)定量PCR法測定頭腎巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子IL1茁誘導(dǎo)表達(dá)的影響。結(jié)果顯示,香菇多糖1、10和100滋g/mL作用頭腎巨噬細(xì)胞24h后能顯著地誘導(dǎo)巨噬細(xì)

3、胞的氧爆發(fā)活性;作用頭腎巨噬細(xì)胞96h后,其低濃度對巨噬細(xì)胞生成NO無顯著影響,當(dāng)作用濃度為1000滋g/mL表現(xiàn)出顯著的抑制作用;濃度為100和1000滋g/mL的香菇多糖作用外周血白細(xì)胞24h后顯著地促進(jìn)鯉魚外周血白細(xì)胞的增殖,且在作用巨噬細(xì)胞24h后100滋g/mL能顯著增強(qiáng)IL1茁的體外誘導(dǎo)表達(dá)。香菇多糖對離體培養(yǎng)鯉魚免疫細(xì)胞有明顯活性作用,對鯉魚非特異性免疫和特異性免疫具有促進(jìn)作用,是一種有潛力的魚用免疫增強(qiáng)劑。關(guān)鍵詞:香菇多糖;鯉魚;巨噬細(xì)胞;中圖分類號:S185,S188文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A?文章編號:10061304(2008)04061606EffectofL

4、entinanontheActivationofImmunological?CellsCulturedinCAOLiping?1,DINGWeidong?1,ZHANGLiu?2,GalinaJeney?3,XuPao?1,YINGuojun?1**?Theheadkidney(HK)macrophagesandtheperipheralbloodleukocyteswereisolatedfromtheheadkidneyandbloodofrespectivelybypercollgradientdensitycentrifugation,culturedandexp

5、osedtodifferentconcentrationsoflentinan.Toevaluatetheimmunostimulatingeffectsoflentinan,proliferationoftheperipheralbloodleukocytes,respiratoryburstofmacrophageandmRNAexpressionofmacrophageswereinvestigatedbyMTT(3(4,5dimethylthiazol2yl)2,5diphenyl?tetrazoliumbromide),NBT(nitrobluetetrazol

6、ium)reduction,GriessreactionandrealtimePCR,respectively.Resultsshowedthat?proliferationofperipheralbloodleukocytesafter24hincubationbytheinductionoflentinanat100and1000滋g/mLwasmarkedly?stimulated.Lentinanat1,100and1000滋g/mLcouldinducesuperoxideanioninmacrophagesmarkedly.Reductionofnitrico

7、xideofHKmacrophagesafter96hincubationlentinanshowedithadnoconspicuouseffectonnitrogenburstactivityofmacrophages??moreoveritinhibitedthenitrogenburstactivityathigherdoses.TheexpressionofintheHKmacrophagesafter24hstimulationbythepolysaccharideshowedlentinanstimulatede

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