微生物的生長(zhǎng)繁殖與生存因子

微生物的生長(zhǎng)繁殖與生存因子

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1、原生質(zhì)總量的增加生長(zhǎng):生物個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段,通過(guò)特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過(guò)程繁殖:第五章微生物的生長(zhǎng)繁殖與 生存因子群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)、繁殖群體生長(zhǎng)第一節(jié)測(cè)定微生物生長(zhǎng)繁殖的方法第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)規(guī)律第三節(jié)影響微生物生長(zhǎng)的主要因素第四節(jié)微生物培養(yǎng)法概論第五節(jié)有害微生物的控制第六節(jié)微生物之間的關(guān)系第七節(jié)菌種的退化、復(fù)壯與包藏第一節(jié)微生物的生長(zhǎng)繁殖二、計(jì)繁殖數(shù)一、測(cè)生長(zhǎng)量第一節(jié)測(cè)定微生物生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)生長(zhǎng)量(一)直接法(二)間接法比濁法生理指標(biāo)法(一)直接法以體積、干重或濕重直接衡量微生物群體的生物量測(cè)定多細(xì)胞及絲

2、狀真菌生長(zhǎng)情況的有效方法一、測(cè)生長(zhǎng)量1、比濁法在一定波長(zhǎng)下,用紫外分光光度計(jì)測(cè)定菌懸液的光密度,以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌量。2、生理指標(biāo)法微生物的生理指標(biāo),如呼吸強(qiáng)度,耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。樣品中微生物數(shù)量多或生長(zhǎng)旺盛,這些指標(biāo)愈明顯因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計(jì)等來(lái)測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)常用于對(duì)微生物的快速鑒定與檢測(cè)二、計(jì)繁殖數(shù)通常用來(lái)測(cè)定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生物的生長(zhǎng)情況或樣品中所含微生物個(gè)體的數(shù)量(細(xì)菌、孢子、酵母菌)二間接法采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練、準(zhǔn)確,否則難以得到正

3、確的結(jié)果樣品充分混勻每支移液管及涂布棒只能接觸一個(gè)稀釋度的菌液同一稀釋度三個(gè)以上重復(fù),取平均值每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合適,便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)注意事項(xiàng)?膜過(guò)濾培養(yǎng)法當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí),可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器,然后將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),對(duì)形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)規(guī)律一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng)二、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線三、微生物的連續(xù)培養(yǎng)第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的特點(diǎn):個(gè)體微小肉眼看到或接觸到的微生物是成千上萬(wàn)個(gè)單個(gè)的微生物組成的群體。微生物接種是群體接種,接種后的生長(zhǎng)是微生物群體繁殖生長(zhǎng)對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)

4、律的了解是對(duì)其進(jìn)行研究與利用的基礎(chǔ)一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng)同步培養(yǎng)(Synchronousculture):使某一群體中的所有細(xì)胞盡可能處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期中,通過(guò)分析群體在各階段生物化學(xué)特性的變化,間接了解單個(gè)細(xì)胞的相應(yīng)變化規(guī)律。一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng)通過(guò)同步培養(yǎng)方法使細(xì)胞群體中各個(gè)體處于分裂步調(diào)一致的生長(zhǎng)狀態(tài)同步生長(zhǎng)通過(guò)同步培養(yǎng)方法獲得的細(xì)胞被稱為同步細(xì)胞或同步培養(yǎng)物一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng)a.同步培養(yǎng)物常被用來(lái)研究在單個(gè)細(xì)胞上難以研究的生理與遺傳特性b.作為工業(yè)發(fā)酵的種子機(jī)械篩選法密度梯度離心法過(guò)濾法膜洗脫法環(huán)境條件誘導(dǎo)法

5、溫度培養(yǎng)基成份控制其他如光照和黑暗交替培養(yǎng)一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步培養(yǎng)由于細(xì)胞的個(gè)體差異,同步生長(zhǎng)往往只能維持2-3個(gè)世代,隨后又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機(jī)生長(zhǎng)。同步生長(zhǎng)獲得后可以持續(xù)存在嗎?(1)單批培養(yǎng)的概念采用完全封閉的容器,一次接種,靜置培養(yǎng)特點(diǎn):固定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)結(jié)果:細(xì)菌在一個(gè)容積有限的環(huán)境中不可能無(wú)限制地高速生長(zhǎng)。分批培養(yǎng)中細(xì)菌的生長(zhǎng)在短期內(nèi)表現(xiàn)明顯的規(guī)律性-------細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線二、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線二、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中,定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量,以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),以菌數(shù)的對(duì)數(shù)值為縱座標(biāo)作圖,得到一條反映

6、細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開始一段時(shí)間內(nèi)菌數(shù)不立即增加,或增加很少,生長(zhǎng)速度接近于零。遲緩期的特點(diǎn):分裂遲緩、代謝活躍細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng),一般來(lái)說(shuō)處于遲緩期的細(xì)菌細(xì)胞體積最大細(xì)胞內(nèi)RNA,尤其是rRNA含量增高,合成代謝活躍,核糖體酶類和ATP的合成加快,易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。對(duì)外界不良條件反應(yīng)敏感。(一)延滯期影響延滯期長(zhǎng)短的因素(一)延滯期菌種接種齡接種量培養(yǎng)基成分為什么會(huì)出現(xiàn)延滯期?微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境,暫時(shí)缺乏分解和催化有關(guān)底物的酶,或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物,就需要一段適應(yīng)期如

7、何在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短延滯期?(1)通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性(2)利用對(duì)數(shù)期的細(xì)胞作種子(4)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大(3)適當(dāng)擴(kuò)大接種量(二)對(duì)數(shù)期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌個(gè)體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致,是研究微生物代謝、生理的良好材料。在生產(chǎn)上常用作種子,縮短微生物發(fā)酵的延滯期,提高經(jīng)濟(jì)效益生長(zhǎng)速率常數(shù)R最大,代時(shí)最短平衡生長(zhǎng)、酶系活躍、代謝旺盛二、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線繁殖代數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)代時(shí)影響微生物代時(shí)的因素:1)菌種,不同的微生物及微生物的不同菌株代時(shí)不同2)營(yíng)養(yǎng)成分,在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中代時(shí)短3)營(yíng)養(yǎng)物濃度生長(zhǎng)限制

8、因子:凡是處于較低濃度范圍內(nèi),可影響生長(zhǎng)速率和菌體產(chǎn)量的營(yíng)養(yǎng)物4)溫度(三)穩(wěn)定

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