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1、第五章微生物的生長繁殖與生存因子15.1微生物的生長繁殖5.1.1微生物生長繁殖的概念生長——微生物細胞吸收營養(yǎng)物質(zhì),進行新陳代謝,當同化作用>異化作用時,生命個體的重量和體積不斷增大的過程。繁殖——生命個體生長到一定階段,通過特定方式產(chǎn)生新的生命個體,即引起生命個體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。發(fā)育——從生長到繁殖,是生物的構(gòu)造和機能從簡單到復(fù)雜、從量變到質(zhì)變的發(fā)展變化過程,這一過程稱為發(fā)育。個體生長——微生物細胞個體吸收營養(yǎng)物質(zhì),進行新陳代謝,原生質(zhì)與細胞組分的增加為個體生長。群體生長——群體中個體數(shù)目的增加??梢杂弥亓俊Ⅲw積、密度或濃度來衡量。21.單細胞
2、微生物的生長繁殖生長:同化作用大于異化作用,細胞不斷增長。繁殖:單細胞個體生長到一定程度時,一個親代細胞分裂為兩個大小、性狀與親代細胞相似的子代細胞,使得個體數(shù)目增加。世代時間:細菌的兩次細胞分裂之間的時間。2.多細胞微生物的生長繁殖生長:細胞數(shù)目增加,個體數(shù)目不增加。繁殖:細胞數(shù)目增加,個體數(shù)目也增加。35.1.2研究微生物生長的方法(一)分批培養(yǎng)(batchculture)1.概念:分批培養(yǎng)是將一定量的微生物接種在一個封閉的、盛有一定量液體培養(yǎng)基的容器內(nèi),保持一定的溫度、pH和DO,微生物在其中生長繁殖。培養(yǎng)基一次性加入,不更換。2.細菌生長曲線以培
3、養(yǎng)時間為橫坐標,以計數(shù)獲得的細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標,可得到一條定量描述液體培養(yǎng)基中微生物生長規(guī)律的實驗曲線,該曲線則稱為生長曲線。(growthcurve)。4生長曲線的制作將少量單細胞的純培養(yǎng),接種到一恒定容積的新鮮液體培養(yǎng)基中,在適宜條件下培養(yǎng),每隔一定時間取樣,測細菌細胞數(shù)目。以培養(yǎng)時間為橫坐標,以細菌增長數(shù)目的對數(shù)為縱坐標,繪制所得的曲線。56其它名稱:遲滯期、調(diào)整期、適應(yīng)期1.現(xiàn)象:活菌數(shù)幾乎沒增加,曲線平行于橫軸。2.特點:初始階段:細菌要適應(yīng)新的環(huán)境,細菌總數(shù)有所減少末期:生長繁殖速度加快,細菌總數(shù)有所增加細胞內(nèi)RNA特別是rRNA含量增高
4、,原生質(zhì)嗜堿性增強合成代謝活躍(核糖體、酶類、ATP合成加快),開始細胞分裂對外界不良條件敏感,(如氯化鈉濃度、溫度、抗生素等化學(xué)藥物)3.原因:適應(yīng)新的環(huán)境條件,合成新的酶,積累必要的中間產(chǎn)物①.停滯期(lagphase)7◆接種群體菌齡:用對數(shù)生長期的菌種接種時,其停滯期較短,甚至檢查不到停滯期◆接種量:一般來說,接種量增大可縮短甚至消除停滯期◆培養(yǎng)基成分:在營養(yǎng)成分豐富的天然培養(yǎng)基上生長的延滯期比在合成培養(yǎng)基上生長時短;◇接種后培養(yǎng)基成分有較大變化時,會使延滯期加長,所以發(fā)酵工業(yè)上盡量使發(fā)酵培養(yǎng)基的成分與種子培養(yǎng)基接近?!羰来鷷r間:世代時間短,即繁
5、殖速度較快的菌種的停滯期一般較短★影響停滯期長短的因素8應(yīng)用◆在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短延遲期;采取的縮短lagphase的措施有:①增加接種量;(群體優(yōu)勢----適應(yīng)性增強)②采用對數(shù)生長期的健壯菌種;③調(diào)整培養(yǎng)基的成分,在種子培養(yǎng)基中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些成分。④選用繁殖快的菌種◆在食品工業(yè)上,盡量在此期進行消毒或滅菌9②.對數(shù)期(logphase)其他名稱:指數(shù)期現(xiàn)象:細胞數(shù)目以幾何級數(shù)增加,其對數(shù)與時間呈直線關(guān)系。特點:生長速率常數(shù)最大,世代時間最短,細胞數(shù)目以幾何級數(shù)增加菌體大小形態(tài)、生理特征等比較一致代謝最旺盛對不良環(huán)境因素的抵抗力強影響因素:
6、菌種、營養(yǎng)成分、營養(yǎng)物濃度培養(yǎng)溫度、DO、抑制劑世代時間G=(t2-t1)/[3.3(lgX2-lgX1)]10應(yīng)用意義:①由于此時期的菌種比較健壯,生產(chǎn)上用作接種的最佳菌齡;②發(fā)酵工業(yè)上盡量延長該期,以達到較高的菌體密度③食品工業(yè)上盡量使有害微生物不能進入此期④是生理代謝及遺傳研究或進行染色、形態(tài)觀察等的良好材料。11③.靜止期(stationaryphase)又稱:穩(wěn)定期、恒定期或最高生長期特點:①新增殖的細胞數(shù)與老細胞的死亡數(shù)幾乎相等,微生物的生長速率處于動態(tài)平衡,培養(yǎng)基中的細胞數(shù)目達到最高值。②細胞分裂速度下降,開始積累內(nèi)含物,芽孢桿菌開始產(chǎn)芽孢
7、?!顚τ诎l(fā)酵生產(chǎn)來說,一般在穩(wěn)定期的后期產(chǎn)物積累達到高峰,是最佳的收獲時期。原因:對數(shù)期消耗了營養(yǎng)物質(zhì),使其濃度降低;有害代謝廢物的大量積累(酸、醇、毒素等);營養(yǎng)物的比例失調(diào),如碳氮比不合適;理化條件(pH、DO、氧化還原勢等)有所改變。12④.衰亡期(declinephase)特點:①細菌利用貯存物進行內(nèi)源呼吸(自身溶解)。②細胞死亡數(shù)增加,死亡數(shù)大大超過新增殖的細胞數(shù),群體中的活菌數(shù)目急劇下降,出現(xiàn)“負生長”。③細胞內(nèi)顆粒更明顯,細胞出現(xiàn)多形態(tài)、畸形或衰退形。衰亡期比其他各時期時間長,它的長短也與菌種和環(huán)境條件有關(guān)。產(chǎn)生原因:生長條件的進一步惡化,
8、使細胞內(nèi)的分解代謝大大超過合成代謝,繼而導(dǎo)致菌體的死亡13分批培養(yǎng)的應(yīng)用:序批式