中藥含藥血清藥理研究方法

中藥含藥血清藥理研究方法

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1、中藥含藥血清藥理研究方法Pharmacologicalmethodofthedrug-containedserumforChineseMateriaMedicainvitro概述中藥血清藥理研究方法:是指動(dòng)物灌胃給予中藥及制劑,經(jīng)吸收進(jìn)入機(jī)體血液循環(huán),在一定時(shí)間內(nèi)采取血液,分離所得血清,必定含有一定量的該藥物成分,此時(shí)的血藥濃度反映了機(jī)體的真實(shí)血藥濃度,以此血清加入到體外細(xì)胞培養(yǎng)體系,觀察其藥理作用的體外實(shí)驗(yàn)方法。中藥血清藥理學(xué)研究方法的意義:1、采取的含藥物血清與機(jī)體內(nèi)環(huán)境相一致且排除了中藥制劑的各種影響因素(如pH,滲透

2、壓等),將其加入到體外細(xì)胞培養(yǎng)體系,觀察其藥理作用,具有更好的科學(xué)性,可行性;同時(shí),使中藥的研究易于深入到細(xì)胞分子水平,對(duì)于創(chuàng)建中藥細(xì)胞分子藥理學(xué)研究具有重要的促進(jìn)作用。2、于灌胃給藥后不同時(shí)間采取的血清,其體外藥理實(shí)驗(yàn)的效應(yīng)及其變化,可以反映機(jī)體真實(shí)的血藥濃度及其變化,無(wú)疑開創(chuàng)了對(duì)于許多成分不明或復(fù)方中藥制劑藥動(dòng)學(xué)研究的一種新方法。3、如采用中藥血清藥理學(xué)方法進(jìn)行中藥藥效學(xué)研究時(shí),同時(shí)分析測(cè)定血清中藥物成分的含量,具有極強(qiáng)的針對(duì)性,可避免盲目地篩選藥物有效成分的繁重工作,使中藥藥效與中藥成分的研究更能協(xié)調(diào)一致。從1988年

3、日本學(xué)者田代真一正式提出了“血清藥理學(xué)”這一新概念,至今已有十余年時(shí)間。其研究主要經(jīng)歷了三個(gè)階段:1、可行性探索研究2、方法學(xué)研究3、應(yīng)用研究階段??尚行蕴剿餮芯恳院幯暹M(jìn)行體外的藥效學(xué)試驗(yàn),早在上世紀(jì)五十年代國(guó)內(nèi)即有所探索,自田代真一提出“血清藥理學(xué)”的概念以后,重新引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了廣泛的可行性探索研究。一.抗菌、抗病毒的實(shí)驗(yàn)研究楊奎等應(yīng)用中藥血清藥理方法進(jìn)行了中藥體外抗菌實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)黃芩、藿香正氣水、藿香正氣液的血清分別具有明顯的抑菌作用,抑制率高達(dá)70%以上。該研究發(fā)現(xiàn)一些含中藥血清相對(duì)于正常

4、血清表現(xiàn)為促進(jìn)細(xì)菌繁殖作用,表明一些中藥可以降低機(jī)體抗御外邪的能力。同時(shí),該研究還發(fā)現(xiàn),不論是中藥復(fù)方,還是單味中藥,均可出現(xiàn)多個(gè)抑菌高峰,表明中藥抗菌有效成分復(fù)雜,其吸收高峰不相一致,可以對(duì)細(xì)菌給予多次打擊,有利于抑制其繁殖。崔曉蘭等應(yīng)用口飼桂枝湯的含藥血清進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)每日1次連續(xù)3天,末次給藥后2小時(shí)的血清有明顯抑制副流感病毒致細(xì)胞病變的作用,該研究還發(fā)現(xiàn),桂枝湯煎劑本身并無(wú)直接抗副流感病毒作用,而口飼桂枝湯后的中藥血清則有明顯作用。因此,血清藥理研究可以防止假陰性實(shí)驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn)。二.對(duì)單核細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)生致熱原的研究楊奎

5、等觀察了口飼黃芩、香薷、羌活勝濕湯、九味羌活丸的含藥血清對(duì)家兔單核細(xì)胞內(nèi)生致熱原產(chǎn)生過(guò)程中單核細(xì)胞內(nèi)DNA、蛋白質(zhì)合成速度及Ca2+內(nèi)流的影響。結(jié)果顯示,口飼黃芩的含藥血清能明顯抑制單核細(xì)胞內(nèi)DNA合成,抑制Ca2+內(nèi)流,并推測(cè)出黃芩解熱機(jī)理之一是通過(guò)抑制單核細(xì)胞內(nèi)DNA合成,抑制Ca2+內(nèi)流而阻斷內(nèi)生致熱原的合成。含香薷血清、含羌活勝濕湯血清、含九味羌活丸血清三者對(duì)單核細(xì)胞內(nèi)DNA合成均有明顯抑制作用;對(duì)單核細(xì)胞Ca2+內(nèi)流的影響,香薷和九味羌活丸均呈量效遞增性抑制作用;時(shí)效關(guān)系表明,九味羌活丸對(duì)Ca2+內(nèi)流的抑制作用在給

6、藥后90min達(dá)高峰,對(duì)DNA合成的抑制作用在給藥后30min和90min作用較明顯。三.抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究王力倩等采用中藥血清藥理研究方法進(jìn)行離體試驗(yàn),觀察了含苦參、仙鶴草的血清及其煎劑對(duì)腫瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)苦參、仙鶴草煎劑及含苦參血清均有明顯的抗腫瘤活性,而含仙鶴草血清則無(wú)效。初步證明苦參對(duì)腫瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)確實(shí)有一定的細(xì)胞毒性作用,而含仙鶴草血清及其煎劑出現(xiàn)了不同實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因,可能與中藥粗制劑因素有關(guān),也可能受藥物在體內(nèi)代謝過(guò)程及血清等因素的影響。該研究提示,含藥血清藥理研究對(duì)中藥抗腫瘤作用的評(píng)價(jià)有一定的

7、意義。四.對(duì)造血系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究張英華等用血清藥理方法研究了當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)造血祖細(xì)胞的影響,發(fā)現(xiàn)含當(dāng)歸補(bǔ)血湯的血清對(duì)小鼠粒系一巨系造血祖細(xì)胞(CFU-GM)、紅系造血祖細(xì)胞(CFU-E)的增殖有明顯的促進(jìn)作用,隨著含藥血清量的增加,CFU-GM、CFU-E的增殖數(shù)越高。提示當(dāng)歸補(bǔ)血湯能刺激骨髓造血祖細(xì)胞,從而有可能增強(qiáng)粒系一巨系、紅系細(xì)胞的生長(zhǎng)、成熟而達(dá)生血補(bǔ)血的作用。拆方研究表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯刺激粒系、巨系造血祖細(xì)胞增殖的作用主要源于當(dāng)歸,而對(duì)紅系造血祖細(xì)胞的作用以黃芪為主。表明當(dāng)歸、黃芪對(duì)不同的造血祖細(xì)胞的作用各有側(cè)重,又互相合

8、作,共同調(diào)節(jié)機(jī)體的造血補(bǔ)血機(jī)能。而當(dāng)歸補(bǔ)血湯煎液對(duì)CFU-GM的生長(zhǎng)有抑制作用,劑量越大,抑制作用越強(qiáng);同時(shí),當(dāng)歸補(bǔ)血湯水煎液不能刺激CFU-E的增殖。這與當(dāng)歸補(bǔ)氣補(bǔ)血的作用不相符。由此可見,血清藥理體外實(shí)驗(yàn)方法克服了中藥粗提物進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的弊端,是一種更為科學(xué)有效的中藥復(fù)方體外實(shí)驗(yàn)方法。

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