產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌檢驗

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1、第十節(jié)產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofClostridiumperfringens魏氏梭菌目錄1、概述2、生物學(xué)特性（菌體形態(tài)學(xué)特征、培養(yǎng)特性和抵抗力）3、毒素與分型4、培養(yǎng)基和試劑5、檢驗程序6、說明www.amozeshonline.com/.../09/uuoeoeoeuoeuuu.html1、概述產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌又稱魏/衛(wèi)氏梭菌分布：自然界廣泛存在(創(chuàng)傷感染）。易污染食品：動物性食品原料食品加熱后未及時冷卻，所含耐高溫而殘余

2、的產(chǎn)氣莢膜梭菌芽孢會迅速發(fā)芽，大量繁殖，菌數(shù)可達數(shù)10萬/g，食用前又未加熱，則有可能引起產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒。食品中產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗的主要目標(biāo)是檢驗食品被該菌污染的程度，其重點項目是活菌數(shù)測定及證實試驗。2、生物學(xué)特性1)形態(tài)與染色G+(陳舊培養(yǎng)物陰性菌）無鞭毛可形成莢膜和芽胞的大桿菌大?。簽?1－2)μmX(2－10)μm。芽孢：卵圓形位于菌體中央或近端，直徑大于菌體的直徑，有的菌株難形成芽胞。莢膜：在人和動物活體組織內(nèi)，或在含血清的培養(yǎng)基內(nèi)生長時可形成莢膜。Clostridiumperfringenswww.biol.vt.edu/research/m

3、icimm/index.phphttp://oregonstate.edu/research/Images/SarkerSlide.jpghttp://course.tjac.edu.cn/shouyiweishengwu/圖片資料/產(chǎn)氣莢膜梭菌.jpgwww.uni-ulm.de/.../Diagnostik/Erreger/c_keim.htm2)培養(yǎng)特性*不嚴(yán)格的厭氧*普通營養(yǎng)瓊脂上可生長，若加入葡萄糖、血液則生長更好。*適宜生長溫度為37—47℃。*生長和繁殖速度極快，在適宜條件下8min/代。*在45℃高溫下可進行快速分離純培養(yǎng)，每培養(yǎng)3—4h傳種

4、1次，較易分離純化。ClostridiumPerfringensToxindtirp.dtra.mil/.../agents/AgentsBW_toxins.asp肝片肉湯培養(yǎng)：－－大量產(chǎn)氣，培養(yǎng)5h-6h變渾濁；牛奶培養(yǎng)基中生長：－－能夠分解乳糖產(chǎn)酸，將酪蛋白凝固產(chǎn)生大量氣體，沖散酪蛋白，使其成海綿狀。庖肉培養(yǎng)基中培養(yǎng)：－－產(chǎn)生大量氣體，肉渣或肉塊略帶粉紅，但不消化。普通瓊脂平板上培養(yǎng)：－－15h－24h形成S型菌落，在營養(yǎng)不足或瓊脂濃度高的平板上可形成鋸齒狀帶放射條紋的R型菌落。www.msu.edu/course/fsc/441/resulex10.h

5、tmlat45C，ClostridiumperfringensisvirtuallytheonlyorganismthatwillproducetheStormyFermentation。鮮血瓊脂平板生長：－－菌落周圍出現(xiàn)雙層溶血環(huán)，內(nèi)層溶血完全，外層溶血不完全，好似靶狀，菌落本身略帶灰黃色至淺灰褐色，與空氣接觸30min后，有時可能逐漸變?yōu)榛揖G色、甚至鮮綠色，這是本菌的特征之一。ClostridiumperfringensbacteriaonabloodagarplateCourtesyGlennSonger,TheUniversity.ofArizona

6、CollegeofAgricultureandLifeSciences.：www.genomenewsnetwork.org/articles/01_02/Clos...Clostridiumperfringensshowsdouble-zonehemolysisonbloodagar.Notethesmallareaofbetahemolysis(completelysisofredbloodcells)surroundedbyalargerzoneofalphahemolysis(partialhemolysis).Theplateissittingon

7、ablacklabbenchwww.cat.cc.md.us/.../labmanua/lab16/bloodcp.htmlClostridiumperfringensGrowingonBloodAgarwww.genomenewsnetwork.org/articles/01_02/Clos...www.cat.cc.md.us/.../labmanua/lab16/bloodcp.html菌落周圍出現(xiàn)乳光渾濁帶，此反應(yīng)能被本菌的α抗毒素抑制。*由于發(fā)酵乳糖，菌落周圍的培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化*本菌不消化牛奶，不分解游離脂肪，菌落周圍不出現(xiàn)透明環(huán)及虹彩層（肉毒梭

8、菌可形成）。www.sat.affrc.go.jp/