產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗(yàn)

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1、GB4789.13－2012食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗(yàn)內(nèi)容提要★產(chǎn)氣莢膜梭菌與人類健康★方法修訂★檢驗(yàn)方法第一部分：產(chǎn)氣莢膜梭菌與人類健康一、流行病學(xué)產(chǎn)氣莢膜梭菌是人類氣性壞疽的主要病原菌。1892年，美國病理學(xué)家W.H.韋爾奇等自尸體分出本菌，故又稱魏氏梭菌。本菌廣泛存在于土壤、人和動(dòng)物的腸道以及動(dòng)物和人類的糞便中，會(huì)散發(fā)臭味。常因深部創(chuàng)傷而感染。有些菌株產(chǎn)生腸毒素，可引起食物中毒。一、流行病學(xué)產(chǎn)氣莢膜梭菌為厭氧芽胞桿菌，是引起食源性胃腸炎最常見的病原之一?？梢鸬湫偷氖澄镏卸颈l(fā)。臨床特征是患者劇

2、烈腹絞痛和腹瀉。攝食被本菌污染的食品后8～22h開始發(fā)病。一、流行病學(xué)在食品中該菌數(shù)量必須達(dá)到很高時(shí)（1.0×10７或更多），才能在腸道中生產(chǎn)毒素，病程通常在24小時(shí)內(nèi)，但某些個(gè)體的不顯著癥狀可能會(huì)持續(xù)1～2周，已報(bào)導(dǎo)有少數(shù)病人因脫水和其它混合感染而導(dǎo)致死亡。一、流行病學(xué)據(jù)報(bào)道魏氏梭菌食物中毒在美國占細(xì)菌性食物中毒的30%左右。美國疾病控制中心最新統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表明，每年美國由產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的食物中毒人數(shù)在250,000左右，其中大約只報(bào)告1200例，暴發(fā)約20起，其中約有十人死亡，每年造成的經(jīng)濟(jì)損失在1.2億美元左右。一、流

3、行病學(xué)大量的暴發(fā)和少量的發(fā)病都與公共飲食有關(guān)。例如：學(xué)校的自助食堂和護(hù)理病房，產(chǎn)氣莢膜梭菌中毒最常發(fā)生于兒童和老人。一、流行病學(xué)產(chǎn)氣莢膜梭菌廣泛分布于環(huán)境中，經(jīng)常在人和許多家養(yǎng)及野生動(dòng)物的腸道中發(fā)現(xiàn)。該菌的芽胞長期存在于土壤和沉淀物中，從牛肉、豬肉、羔羊、雞、火雞、燜肉、紅燒蔬菜，燉肉和肉汁中，可以分離產(chǎn)氣莢膜梭菌。一、流行病學(xué)引起食物中毒的食品大多是畜禽肉類和魚類食物，牛奶也可因污染而引起中毒，原因是因?yàn)槭称芳訜岵粡氐?，芽胞在食品中大量繁殖所致。一、流行病學(xué)此外，不少熟食品，由于加溫不夠或后污染而在緩慢的冷卻過程中，細(xì)菌

4、大量繁殖并產(chǎn)生腸毒素，其食品并不一定在色味上發(fā)現(xiàn)明顯的變化，人們在誤食了這樣的熟肉或湯菜，就有可能發(fā)病。一、流行病學(xué)產(chǎn)氣莢膜梭菌有時(shí)很不容易形成芽胞。芽胞的熱抵抗力很強(qiáng)，由患者糞便中分離的芽胞能耐受100℃1～5小時(shí)的加熱。產(chǎn)氣莢膜梭菌－－臨床意義?致病物質(zhì)：莢膜、多種毒素和侵襲性酶?所致疾?。簹庑詨木沂澄镏卸緣乃佬阅c炎細(xì)致病所致致病機(jī)理菌物質(zhì)疾病外毒?發(fā)酵肌肉組織糖類→氣體→氣氣性素腫壞疽產(chǎn)胞外?血管通透性↑→水分滲出→水氣酶腫，組織壞死；水氣夾雜→捻發(fā)莢莢膜感；膜?毒素入血→毒血癥，休克食物梭腸毒腸毒素→嵌入腸細(xì)胞膜，

5、破壞膜離中毒菌素子功能，改變膜的通透性→腹瀉一、流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)氣莢膜梭菌至少可以產(chǎn)生15種以上的毒素，但目前僅有5～6種毒素，即α、β、ε、ι毒素及腸毒素（CPE）、β2毒素等被認(rèn)為是主要致病性毒素。其中CPE和β2毒素是人食物中毒及胃腸疾病的重要致病因子。一、流行病學(xué)根據(jù)產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)生四種致死性外毒素（α、β、ε、ι毒素）的能力，將其分為五種類型，即A、B、C、D、E型。5型中對人致病的主要是A型和C型，A型最常見，引起氣性壞疽和食物中毒；C型能引起壞死性腸炎。一、流行病學(xué)當(dāng)產(chǎn)品達(dá)到合適溫度時(shí)，那些未被殺死的芽胞

6、，由于蒸煮而使其可能萌發(fā)。所以，蒸煮后需要快速冷卻。適當(dāng)?shù)臒崽幚恚?0℃以上）、充分再加熱，冷卻食品（最低中心溫度為24℃），也是必要的控制措施，培訓(xùn)食品加工人員，仍是控制措施的一個(gè)關(guān)鍵方面。產(chǎn)氣莢膜梭菌的衛(wèi)生學(xué)意義?對消毒過程和其它不良環(huán)境條件有強(qiáng)抵抗力，作為糞便陳舊污染的指標(biāo)?比原蟲的包囊（卵囊）小，可用作過濾效果評價(jià)的指標(biāo)?產(chǎn)氣莢膜梭菌芽胞的生存時(shí)間過長，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了包括病毒和原蟲在內(nèi)的腸道致病微生物的生存時(shí)間。二、生物學(xué)特性1、形態(tài)：革蘭氏陽性直桿狀，菌體兩端鈍圓，1～2×2～10?m，卵圓形芽胞位于菌體中央或近端，

7、不比菌體明顯膨大，一般培養(yǎng)條件下很難形成芽胞（無糖容易），無鞭毛，有時(shí)可能形成莢膜。二、生物學(xué)特性2、培養(yǎng)：本菌生長和繁殖速度極快，在適宜條件下增代時(shí)間僅8min，在普通瓊脂平板上培養(yǎng)15h左右可見到菌落，培養(yǎng)24h菌落直徑2～4mm，呈凸面狀，表面光滑半透明，正圓形，在營養(yǎng)成分不足或瓊脂濃度高的平板上，有時(shí)尤其經(jīng)過傳種的菌株，可能形成鋸齒狀邊緣或帶放射狀條紋的R型菌落。二、生物學(xué)特性2、培養(yǎng)：在含人血、兔血或綿羊血的瓊脂平板上培養(yǎng)的菌落周圍有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)溶血完全，外環(huán)溶血不完全。二、生物學(xué)特性2、培養(yǎng)：在庖肉培養(yǎng)基中

8、培養(yǎng)數(shù)小時(shí)即可見到生長，產(chǎn)生大量氣體，肉渣或肉塊變?yōu)槁詭Х凵?，但不被消化。二、生物學(xué)特性3、生化特性：所有菌株均發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖及蔗糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，液化明膠，不產(chǎn)生靛基質(zhì)，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，但也有例外。二、生物學(xué)特性3、生化特性：發(fā)酵牛奶中的乳糖、牛奶酸凝固，同時(shí)由于大量產(chǎn)氣凝塊碎裂，所謂暴烈