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《產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)基.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、產(chǎn)氣莢膜梭菌病分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基%1硫乙醇酸鈉增菌培養(yǎng)基。胰消化酪蛋白15g,L-胱氨酸0.5g,酵母浸膏5g,氯化鈉2.5g,硫乙醇酸鈉0.5g,刃天青0.001g,瑚旨0.75g蒸憾水1000mlo加熱融化后，調(diào)pH7?2?7.4,分裝于帶螺帽試管成半固體高層，121°C高壓滅菌ISmino貯于4?C冰箱備用。檢樣接種后，置46、C水浴屮培養(yǎng)4?6h。%1BCP培養(yǎng)基。2號血瓊脂基礎(chǔ)(0xoidCM271)40明顯渾濁及產(chǎn)氣者為陽性?？衫^續(xù)進(jìn)行平板分離。肌醇10g,甘露醇10g,內(nèi)酮酸鈉lg,1%浪甲酚紫乙醇溶液4ml,蒸憾水1000mlo加熱融化，調(diào)pH7?2-7?4,121
2、°C高壓滅菌15mino冷至50、C吋加入50%的無菌卵黃鹽水10ml,傾注平板，置4、C冰箱可保存一個月以上。檢樣接種后，先于37'C預(yù)培養(yǎng)2?4h,繼之在43?45°C培養(yǎng)過夜。產(chǎn)生卵磷脂酶及對肌醇發(fā)酵，可定為產(chǎn)氣莢膜梭菌。培養(yǎng)基屮若加入新霉素lOOFg/ml,環(huán)絲氨酸400big/ml,多黏菌素101U/ml,可增加其選擇性。%1結(jié)晶紫-血瓊脂。明膠基礎(chǔ)瓊脂500ml,加熱融化，冷至50~C時,加1%結(jié)晶紫水溶液0.2ml,無菌脫纖牛血25ml,搖勻，傾注平板，貯于4~C冰箱備用。%1改良m-CP培養(yǎng)基。胰豚3g,酵母浸膏2g,蔗糖0.5g,鹽酸胱氨酸0.lg,硫酸鎂0.0
3、1g,溟甲酚紫0.004g,瓊脂1.5g,蒸惚水90mlo121°C高壓滅菌15min,冷卻至5(fCn寸，加入濾過滅菌的2%二磷酸酚釀2nd,4.5%氯化鐵溶液o.2ml,以及抗菌混合液8ml(內(nèi)含環(huán)絲氨酸40mg,多黏菌素2.5mg,夕-D-糖60mg)o檢樣接種后，在45°C培養(yǎng)18h,產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落為不透明，乳黃色，如將平板覆于氨氣上，則變?yōu)榧t色或暗紅色菌落。%1鐵-亞硫酸鹽瓊脂。胰月東10g,亞硫酸鈉lg,瓊脂20g,硫乙醇酸鈉5g,蒸錨水1000mlo12VC高壓滅菌后，加入10ml5%的檸檬酸鐵，搖勻，傾注平板。不必調(diào)pHo%1TSC培養(yǎng)基。為胰豚-亞硫酸鹽環(huán)絲氨
4、酸培養(yǎng)基。胰腺15g,大豆蛋白W5g,酵母浸膏5g,偏亞硫酸鈉lg,檸檬酸鐵鞍鹿，瓊脂20g,蒸館水1000mlo加熱溶解，調(diào)P【I7.2?7.4,121°C高壓滅菌lOmino加入濾過滅菌的4%D-環(huán)絲氨酸10mi（終濃度為400Fg/ml）o待其冷卻至50~C時,加無菌50%蛋黃鹽水乳劑80ml,搖勻，傾注平板。供涂皿培養(yǎng)用的須烘干表而水濕；供層疊用的TSC瓊脂可不加蛋黃液。%1SPS瓊脂。為亞硫酸鹽-多黏菌索-磺胺卩密喘瓊脂。胰蛋白月東15引檸檬酸鐵0.5g,瓊脂20g,蒸憾水1000mlo加熱煮沸1?加in溶解,121°C高壓滅菌15min,最終pII7.2o每升滅菌培養(yǎng)
5、基加入下面的過濾除菌的溶液：100g/ml亞硫酸鈉溶液（NaSOa-7H：0）5ml；1.2g/L多黏菌素B硫酸鹽溶液10ml；12rng/ml^t胺『斛定鈉溶液10mlo產(chǎn)氣莢膜梭菌在此培養(yǎng)基上生長成黑色菌落。%1PY培養(yǎng)基液。多B20g,酵母浸膏5g,NaCl5g；蒸餡水1000ml,pH6.6-7.0。以9ml量分裝試管。121°C高壓滅菌15raino用前在水浴中加熱,加入濾過滅菌的10%蔗糖ImL%1促芽砲培養(yǎng)基。酵母浸膏3g,蛋白豚10g,可溶性淀粉3g,Na2HP04?7H：07g,KH2P0,（無水）1.5g,MgSO,0.lg,硫乙醇酸鈉lg,蒸館水1000ml
6、opH7.6,121°C高壓滅菌15raino
