《交叉配血知識》PPT課件

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1、12021/8/6交叉配血知識講座檢驗科馬燕22021/8/6RBC表面有豐富唾液酸,在中性環(huán)境中帶負電荷,互相分離??赏ㄟ^縮短細胞間距,以及在致敏細胞上的抗體之間搭橋使RBC凝集。凝集一般為二個步驟抗體吸附于RBC抗原上成為致敏狀態(tài)致敏RBC凝集形成塊狀?????????????????????????32021/8/6標本的采集及要求一血型二不規(guī)則抗體的篩選三交叉配血四一二三四42021/8/6標本的采集與要求52021/8/61.標本要新鮮:前三個月內(nèi)輸血或妊娠:配血試驗標本抽取<48h,避免因回

2、憶反應(yīng)產(chǎn)生的抗體漏檢。新近的輸血或妊娠:可引起意外抗體迅速出現(xiàn),如果對病人的輸血史或人身史不明,使用的標本必須是輸血前48h內(nèi)抽取的。血量約為5ml。2.使用右旋糖酐、pvp等:治療前抽取標本備用,防止RBC緡錢狀凝集的干擾標本要具有代表性,能代表患者目前狀況62021/8/63.24小時內(nèi)輸了12u血后:可輸注未經(jīng)交叉配血的ABO、RH同型的血液,因為原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情況。4.防止血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生:溶血標本一般不使用,因為血清中游離血紅蛋白可掩蓋在輸血前實驗中抗體反映引起

3、的溶血5.標本標識:唯一性標識無誤、與輸血申請單一致6.使用血漿標本:應(yīng)排除纖維蛋白原的干擾7.輸血后標本保存:2-8℃,至少一周。72021/8/6血型1.紅細胞懸液的配制2.離心力的標準3.離心后結(jié)果觀察4.鹽水試驗5.正反定型結(jié)果不一致原因及處理82021/8/61.紅細胞懸液的配制洗滌洗滌目的:去除RBC表面物質(zhì)少量的血漿蛋白已溶解紅細胞的基質(zhì)(有競爭抗體的作用)抗凝劑(有抗補體的作用)至少要用大量生理鹽水洗一次濃度2%:一般用于抗體效價的測定5%:一般用于血型鑒定、配血試驗、抗球蛋白試驗等大多

4、數(shù)血型血清學(xué)試驗10%:一般用于測定抗體的親和力試驗92021/8/62.離心力的標準不同規(guī)格離心機,力矩不同,統(tǒng)一離心轉(zhuǎn)速,但沒有統(tǒng)一離心力。離心轉(zhuǎn)速換算公式:RCF=1.118×10-5×(rpm)2×R(cm)3.離心后結(jié)果觀察注意事項將試管成30-45℃角拿在手上,細胞扣朝上,手腕輕輕用力,用液體去沖細胞扣。切不可用力使勁搖試管,那樣凝集顆粒會被搖散,弱凝集則會誤判為陰性。-細胞成細沙狀沿試管壁流下+細胞成塊狀或成齒狀沿試管壁流下102021/8/6常用的記錄符號及所示的凝集強度4+一個大的凝集

5、塊,背景透明,無游離細胞3+數(shù)個大凝集塊,背景透明,無游離細胞2+許多小凝集塊,肉眼可見,大小均勻,背景基本透明,有游離細胞1+很小的凝集塊,肉眼可見,背景不透明,游離細胞較多,需要用顯微鏡觀察W+微小凝集塊,肉眼很難看清,背景混濁,要用顯微鏡觀察O無凝集,無溶血,全部是游離細胞,要用顯微鏡觀察PH部分溶血H完全溶血WF混合外觀112021/8/64.鹽水試驗多采用立即離心法正確的操作是:RBC懸液加到血清后立即離心并觀察結(jié)果反應(yīng)時間過長而延誤離心對ABO血型系統(tǒng)的抗體檢出影響室溫2分鐘后離心可能使3+

6、~4+的凝集減弱為0+~1+,并有溶血室溫5分鐘后離心原有凝集可能消失,并有溶血有的標本延遲離心原有凝集會變?yōu)榧炔荒膊蝗苎?難以發(fā)現(xiàn)ABO血型的不配合。(多發(fā)生在O型人的血清抗體與A型、B型或AB型紅細胞反應(yīng)的試驗中,發(fā)生率為2%-3%.發(fā)生機制是反應(yīng)強的抗A、抗B和抗原強度強的A、B抗原作用,補體C1在有Ca2+存在的條件下,固定到紅細胞膜上,妨礙了紅細胞的凝集,進一步可能引起溶血)解決的方法:A:血清與紅細胞混合后立即離心。B:用血漿或滅活的血清做試驗C:用EDTA鹽水配制紅細胞懸液,D:稀釋血清

7、122021/8/6加樣時先加血清再加紅細胞,以避免漏加;抗體和抗原的比例一般為2:1。必須要做正反定型實驗才能確定血型。正定型試驗有條件可加做抗AB(檢測弱A、弱B)反定型一定要加做O細胞,(發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體)132021/8/65.正反定型結(jié)果不一致原因:技術(shù)、受檢紅細胞或血清本身(1)技術(shù)和管理錯誤器材不潔——假陽試劑污染或不足——假陽標本和試劑搞錯——假陽、假陰離心過度或不足——假陽、假陰結(jié)果記錄或判斷錯誤——假陽、假陰漏加試劑——假陰陽性反應(yīng)產(chǎn)生溶血現(xiàn)象未能識別——假陰142021/8/6(2)

8、標準血清效價太低、親和力不強。如抗A血清效價不高,可將A亞型誤定為O型,AB型誤定為B型。(3)紅細胞懸液過濃或過淡,抗原抗體比例不適當(dāng),使反應(yīng)不明顯,誤判為陰性反應(yīng)。(4)血清異常華通膠或血清蛋白異常引起串錢狀形成,影響反定性結(jié)果(5)紅細胞致敏在含高蛋白介質(zhì)試劑中可發(fā)生凝集,產(chǎn)生假陽性(6)近期曾異型輸血,病人血液標本成為不同型別的紅細胞混合物,定型時顯示“混合外觀凝集”現(xiàn)象。(7)疾病因素導(dǎo)致抗原減弱某些白血病病人ABO血型抗原可受到

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