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《基因克隆及克隆基因的表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在教育資源-天天文庫。
1、吉林大學白求恩醫(yī)學院分子生物學教研室講師孫巍Tel:0431-856193692012-10基因克隆、克隆基因的表達熒光蛋白基因克隆貓科學家復活冰凍死老鼠修正基因蚊子防控疾病基因轉換讓蝌蚪長出三顆眼睛基因克隆胚芽造就健康嬰兒基因克隆趣聞www.themegallery.com熒光蛋白基因克隆貓具有熒光蛋白基因的克隆貓在紫外線照射下會變色由韓國科學技術部公布的對比照片顯示出3只具有熒光蛋白基因的克隆貓（上圖為普通光線照射下，下圖為紫外線照射下）www.themegallery.com科學家復活冰凍死老鼠一只老鼠死亡后被冷凍了16年之久,日本科學家從其體內提
2、取基因克隆了一只新老鼠,這是人類首次成功克隆冷凍動物。www.themegallery.com修正基因蚊子防控疾病科學家把一種可防瘧疾的基因植入蚊子基因之中,對蚊子基因進行修正。在實驗中,科學家們不僅僅在蚊子體內植入了防瘧疾基因,還植入了另一種可以使蚊子眼睛發(fā)出熒光的基因。這樣,科學家就可以很容易識別它們。www.themegallery.com基因轉換讓蝌蚪長出三顆眼睛2007年,英國科學家在實驗室中利用基因轉換技術成功地在蝌蚪頭部培育出第三顆眼球。這個消息對盲人來說是一個天大的喜訊。利用這種技術,干細胞科學家們真的有可能實現(xiàn)他們再造眼球的夢想。www
3、.themegallery.com基因克隆胚芽造就健康嬰兒基因的秘密隨著科技的日益發(fā)達而被逐漸揭開。血友病、色盲、白化病……這些遺傳病困擾著一個又一個家庭，也激勵著一代又一代科學家為之奮斗。www.themegallery.com分子生物學關鍵的技術突破：DNA重組技術1972年，世界上第一個重組DNA分子誕生PaulBergabiochemistryatStanford猿猴病毒DNA?噬菌體DNA限制性內切酶限制性內切酶DNA連接酶重組DNA分子1980年，獲諾貝爾化學獎?www.themegallery.com克?。和ㄟ^無性繁殖過程所產生的與親代完全
4、相同的子代群體。moleculeCellcolonyorganismDNAclone基因克隆:是指來自不同生物的基因同有自主復制能力的載體DNA在體外人工連接，構建成新的重組DNA，然后送入受體生物中去表達，從而產生遺傳物質轉移和重新組合。www.themegallery.com一、目的DNA的分離獲?。ǚ郑欢⑤d體的選擇與準備（擇）；三、目的DNA與載體連接（接）；四、重組DNA轉入受體細胞（轉）；五、重組體的篩選與鑒定（篩）。DNA克隆的過程包括五個基本部分：www.themegallery.com一、目的DNA的分離獲?。ǚ郑┓蛛x獲取目的DNA有
5、多種方法：(一)PCR——待擴增目的基因兩端序列已知（據(jù)此設計引物）(二)基因文庫——先構建，后篩選(三)化學合成法——直接合成目的DNA（序列已知、片段較短）www.themegallery.com隨機打碎：物理方法缺點：難以重復；獲得的DNA量少等。www.themegallery.com?限制性核酸內切酶的發(fā)現(xiàn)1970年，第一個限制性核酸內切酶定點剪切DNA操作DNA1978年，獲諾貝爾生理學或醫(yī)學獎限制性核酸內切酶——用于切割DNAwww.themegallery.com限制性核酸內切酶Restrictionendonuclease可分為Ⅰ、Ⅱ、
6、Ⅲ型，分子生物學中通常使用的是Ⅱ型：能在DNA雙鏈內部的特異位點識別并切割DNA，“分子剪刀”GGATCCCCTAGGGCCTAGGATCCG+BamHⅠ核酸水解酶，裂解磷酸二酯鍵。www.themegallery.comⅡ型限制性內切酶具有一些共性和特性：1.具有特定的識別和切割位點限制性內切酶識別位點限制性內切酶識別位點ApaIGGGCC’CC’CCGGGSmaICCC’GGGGGG’CCCBamHIG’GATCCCCTAG’GSau3AIGATC’’CTAGPstICTGCA’GG’ACGTCNotIGC’GGCCGCCGCCGG’CGEcoRIG
7、’AATTCCTTAA’GSfiIGGCCNNNN’NGGCCCCGGN’NNNNCCGGII型限制性內切酶的識別位點舉例（'示切割位點）識別位點通常為6或4堿基序列www.themegallery.com2.識別的核苷酸序列通常為回文結構（palindrome）兩條核苷酸鏈中，從5’到3’方向的核苷酸序列完全一致Ⅱ型限制性內切酶具有一些共性和特性：www.themegallery.com3.切割雙鏈DNA分子后產生黏端或平端BamHⅠGTCCAGGCCTAGGATCCG+GGATCCCCTAGGHindⅡGTCGACCAGCTGGACCTG+平端切口黏
8、端切口（stickyend）（bluntend）Ⅱ型限制性內切酶具有一些共性和特
