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1、河北漁業(yè)2007年第6期(總第162期)加工制冷海帶硫酸酯多糖的酶法提取工藝條件劉群徐中平(日照職業(yè)技術(shù)學(xué)院,山東日照276826)摘要實(shí)驗(yàn)研究了纖維素酶提取海帶硫酸酯多糖的工藝條件,通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn),確定了最佳提取工藝條件為:粒度80~100目,固液比150,提取時間4h,酶加入量60g/kg,提取率為5641%,是熱水提取工藝的193倍。關(guān)鍵詞纖維素酶硫酸酯多糖提取條件正交實(shí)驗(yàn)硫酸酯多糖又稱多糖硫酸酯,是從水生生行樣的平均值。物、動物組織中提取分離的一系列糖復(fù)合物。褐122海帶硫酸多糖的提取工藝
2、藻多糖硫酸酯是從褐藻中提取的一類硫酸化多酶解提取法:取海帶加水浸泡2h,溶脹后糖,主要有巖藻糖和硫酸基組成,是高度3-支的海帶粉碎成海帶漿(含水量93%,w/w),向鏈化的(1-2)或(1-3)連接的-L-巖藻海帶漿中加水1~2倍體積的水?dāng)噭?加入檸檬[1]糖-4-硫酸酯。對褐藻多糖硫酸酯進(jìn)行的廣酸調(diào)pH為45~50,再加入纖維素酶,于泛研究表明其具有多種生物活性,包括抗凝血、50保溫攪拌4h,不時攪拌,然后加入1倍體降血脂、抗腫瘤、抗病毒以及免疫調(diào)節(jié)作積水升溫至90,冷至室溫過濾。再加一倍體[2-3]用。積的水?dāng)嚢?0min后過濾,合并濾液。取一定海帶是中國最重要的人工養(yǎng)
3、殖經(jīng)濟(jì)藻類,研量濾液測多糖含量。究發(fā)現(xiàn)海帶褐藻多糖硫酸酯具有抗腫瘤、降血脂熱水提取法:取海帶加水浸泡2h,溶脹后和治療慢性腎功能衰竭等作用[4]。的海帶粉碎成海帶漿(含水量93%,w/w),向傳統(tǒng)提取海帶硫酸酯多糖多采用熱水稀酸提海帶漿中加水1~2倍體積的水?dāng)噭?加入鹽酸,[5][6]使pH約為2(或使HCl濃度約為01mol/L),取法、海帶水堿凝沉物。酶解提取法是最近出現(xiàn)的工藝,在海帶浸提時加入纖維素酶,可90保溫4h,不時攪拌,然后再加入1倍體積充分破壞海帶的組織結(jié)構(gòu),從而提高多糖的提取水,冷卻后過濾。取一定量濾液測多糖含量。率。2結(jié)果本文對海帶硫酸酯多糖的酶解提取工藝進(jìn)
4、行研究,并與傳統(tǒng)的熱水提取方法進(jìn)行比較,對海21單因素實(shí)驗(yàn)帶的綜合開發(fā)及提高其經(jīng)濟(jì)價值具有實(shí)際意義。211酶加入量對海帶硫酸多糖提取的影響取80~100目海帶粉、按固液比150(海帶與1材料與方法水的質(zhì)量比)、pH為45~50、提取溫度50、11材料提取時間4h,在不同的加酶量下提取,測定提海帶:產(chǎn)自海帶產(chǎn)自榮成俚島海域六月份采取液中多糖的含量,結(jié)果見表1。表1酶加入量對海帶硫酸多糖回收量的影響收的人工養(yǎng)殖海帶,曬干后陰涼干燥處存儲。-1-1纖維素酶:淄博梅康特酶工程有限公司。其酶加入量/gkg干海帶多糖回收量/gkg干海帶他試劑均為國產(chǎn)分析純。204
5、651167離心機(jī):北京醫(yī)用離心機(jī)廠。40488207412方法605346149121實(shí)驗(yàn)方法多糖含量測定采用苯酚-硫805666074[7]酸法,測定時取三個平行樣,結(jié)果數(shù)據(jù)為平-55-河北漁業(yè)2007年第6期(總第162期)加工制冷由表1可見,隨著酶量的增加,多糖含量逐條件的限制,很難得到這么細(xì)的藻粉,故無法對漸增加,而在加酶量60g/kg干海帶以后,多糖它進(jìn)行進(jìn)一步的研究。而多易得到80~100目藻含量趨勢平緩,可能因?yàn)槊笣舛纫阎饾u被底物所粉。飽和。214固液比對海帶硫酸多糖提取的影響取海
6、帶的細(xì)胞壁中含有大量的纖維素,加入纖80~100目海帶粉、pH為45~50、提取溫度維素酶能破壞其細(xì)胞結(jié)構(gòu),有利于多糖物質(zhì)的溶50、提取時間4h,加酶量為60g/kg,按不同出、分離。但加酶量不宜過多,一方面它會提高的固液比進(jìn)行提取,測定提取液中多糖的含量,成本,不利于提高產(chǎn)品的競爭力;另一方面由于結(jié)果見表4。纖維素酶不是純酶,其中都含有一些雜酶,因此表4固液比對海帶硫酸多糖回收量的影響-1-1在實(shí)驗(yàn)中隨著加入纖維素酶的增多,雜酶量也增固液比/LkgDW)多糖回收量/gkg干海帶多,而雜酶會把溶出物中的可溶性大分子物質(zhì)降1:304302042解成用乙醇很難沉淀下來的
7、小分子物質(zhì),從而使1:404623157多糖回收率下降。1:5056320491:605814103212保溫時間對海帶硫酸多糖提取的影響取80~100目海帶粉、按固液比150(海帶與水的質(zhì)量比)、pH為45~50、提取溫度50、由表4可見,固液比越大越好,但由于在實(shí)加酶量為60g/kg,在不同的時間下提取,測定際生產(chǎn)中,過大的料液比會增加設(shè)備的體積,能提取液中多糖的含量,結(jié)果見表2。量的消耗,延長生產(chǎn)周期。雖然能提高產(chǎn)品
