小動物活體成像操作說明手冊

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1、第七部分操作7.1準(zhǔn)備程序圖7.1麻醉準(zhǔn)備程序在開始麻醉程序之前，做一些準(zhǔn)備程序可以幫助實驗順利進(jìn)行，請參看圖7.11）請把不用的出氣口用特制的黑色橡膠塞塞住。（PN10168）2）把錐形通氣口的位置對準(zhǔn)。3）在麻醉程序開始前對照圖片確保出氣支管位置正確。4）確認(rèn)氣體循環(huán)管沒有打結(jié)阻塞和松動。5）確認(rèn)蒸發(fā)器內(nèi)有足夠的乙氟醚（Isoflurane），如果需要注入請參看下一節(jié)。7.2蒸發(fā)器注入程序警告：不能在正在進(jìn)行氧氣供應(yīng)時向蒸發(fā)器內(nèi)灌注液體乙氟醚（Isoflurane）。注入前，關(guān)閉供應(yīng)打開前面板上兩個閥門開關(guān)

2、監(jiān)視流量計。當(dāng)流量球在指示管中的底部保持不動時說明已無氣體流動，此時可以進(jìn)行注入。警告：只有當(dāng)蒸發(fā)器控制旋鈕處于關(guān)的位置才可以進(jìn)行注入，在注入過程中不能打開任何氧氣供應(yīng)。警告：只能使用乙氟醚（Isoflurane）不要使用其它麻醉氣體，使用其它麻醉劑可能會導(dǎo)致危險。警告：在處理剩余的麻醉劑時實驗室要具備良好的通風(fēng)條件，建議遵照已公布的安全條例進(jìn)行操作，當(dāng)丟棄剩余的乙氟醚（Isoflurane）時使用蒸發(fā)器使用手冊上推薦的合適的化學(xué)容器。警告：使用時XGI－8麻醉系統(tǒng)要保持直立狀態(tài)。蒸發(fā)器注入步驟1）如圖7.2所

3、示，確保氧氣供應(yīng)被切斷，可以在源頭或減壓閥處關(guān)掉它。2）如圖7.3所示，確保蒸發(fā)器開關(guān)處于關(guān)的位置。3）打開兩個前面板的閥門開關(guān)釋放XGI－8的氧氣，如圖7.4所示可以看到閥門處于打開位置，流量計指示氧氣已放完后，關(guān)閉這兩個閥門開關(guān)。4）反時針旋轉(zhuǎn)卸掉蒸發(fā)器的螺絲帽（如圖7.5）。確認(rèn)試劑是乙氟醚（Isoflurane），緩慢的倒進(jìn)灌入口，透過玻璃指示窗隨時觀察乙氟醚（Isoflurane）的水平線，注意不要超過最大允許線。如圖7.6所示。5）注意：如果蒸發(fā)器在灌注前是干的，水平線在開始會輕微下落因為內(nèi)部的棉芯

4、會吸收一部分試劑。6）當(dāng)乙氟醚（Isoflurane）達(dá)到玻璃指示窗上的最大標(biāo)線時，表明蒸發(fā)器已灌注滿。此時應(yīng)停止，不要過分灌注。順時針旋緊螺絲帽。為防止泄漏，請仔細(xì)檢查螺絲帽已旋緊。圖7.2氧氣閥圖7.3蒸發(fā)器置于OFF圖7.4氧氣壓力計，前面板開關(guān)ON圖7.5擰下蒸發(fā)器螺母圖7.6監(jiān)視最大刻度線7.3設(shè)備操作步驟一在開始程序前分別稱量兩個乙氟醚（Isoflurane）活性炭過濾器（如圖7.7），在過濾罐上用不可擦除的標(biāo)記記錄這些信息和日期。圖7.7圖7.8步驟1－稱量過濾器步驟2－打開排氣泵步驟二打開前面板

5、上的排氣泵的電子開關(guān)（如圖7.8）確認(rèn)流速超過每分鐘6公升（LPM）。步驟三打開高壓氧氣罐或其它供應(yīng)源確保氧氣供應(yīng)（如圖7.9）注意：推薦的氧氣壓力是每平方英寸55磅（或每平方英寸35－65磅之間的任意值，請根據(jù)需要選擇）。圖7.9圖7.10步驟3－打開氧氣供應(yīng)打開成像暗箱的氣體開關(guān)步驟四打開IVIS系統(tǒng)成像暗箱的氣體開關(guān)（如圖7.10，在暗箱右側(cè)）步驟五打開XGI-8前面板上的綠色氧氣開關(guān)。（如圖7.11）圖7.11圖7.12步驟5－打開XGI-8氧氣開關(guān)步驟6－把蒸發(fā)器旋鈕設(shè)置到0％步驟六把蒸發(fā)器旋鈕設(shè)置到

6、0％（如圖7.12）步驟七打開前面板上標(biāo)記著“IVISFlowon/off”的開關(guān)（麻醉氣體流向IVIS分支管，如圖7.13）使用流量計設(shè)置流速。注意：使用能使動物處于麻醉狀態(tài)的最低量麻醉即可，最初建議如需麻醉5只成年鼠使用0.25公升每分鐘的流量。圖7.13圖7.14步驟7－打開“IVISFlow”步驟8－打開流向感應(yīng)箱的開關(guān)步驟八打開標(biāo)記著“CHAMBEROn/off”的開關(guān)（麻醉氣體流向感應(yīng)箱），如圖7.14所示。設(shè)置感應(yīng)箱流量計的流速為1.5公升每分鐘。步驟九確認(rèn)“IVISMANIFOLD”的流速，可以

7、根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。步驟十關(guān)上“IVISMANIFOLD”和“INDUCTIONCHAMBER”的開關(guān)。不要再調(diào)整流速計了。步驟十一合理設(shè)置蒸發(fā)器的百分比，典型值是百分之2.5（如圖7.15），可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。圖7.15圖7.16步驟11－設(shè)置蒸發(fā)器的百分比步驟12－把動物放入感應(yīng)箱步驟十二把動物放置在感應(yīng)箱內(nèi)（如圖7.16），關(guān)上并鎖緊箱子。步驟十三打開“INDUCTIONCHAMBER”開關(guān)，注意，第一次運(yùn)行的時間是最長的因為要把感應(yīng)箱和管子充滿試劑。步驟十四打開“IVISMANIFOLD”開關(guān)，等一段

8、時間（通常是二分鐘到五分鐘之間），麻醉氣體到達(dá)分支管的錐形鼻塞處，然后把動物從感應(yīng)箱中拿出來。步驟十五在把動物從感應(yīng)箱拿出之前要關(guān)掉“CHAMBEROn/off”開關(guān)。步驟十六快速的把動物拿出來放在錐形鼻塞處（如圖7.17）。如果先前沒把多余不用的分支管堵住，此時用特制的黑色橡膠塞塞?。ㄐ吞柺荘N10168）。圖7.17圖7.18步驟16－將需要麻醉的動物放置好蒸發(fā)器置于OFF步驟十七