成年大鼠心房肌牽張激活鉀通道的牽張敏感性和門控機(jī)制

成年大鼠心房肌牽張激活鉀通道的牽張敏感性和門控機(jī)制

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1、維普資訊http://www.cqvip.com·4·心臟雜志(ChinHeartJ)2008,20(1)·基礎(chǔ)研究·成年大鼠心房肌牽張激活鉀通道的牽張敏感性和門控機(jī)制劉旭霞,黃海霞,劉萍,鈕偉真(首都醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)教研室,北京100069)摘要:目的探討成年大鼠心房肌細(xì)胞牽張激活鉀通道(stretch.a(chǎn)ctivatedKselectivechannels,SAKCs)的電生理學(xué)特性,確定皮質(zhì)細(xì)胞骨架在通道門控機(jī)制中的作用,對(duì)從通道水平闡明機(jī)械.電反饋具有重要的理論和實(shí)際意義。方法聯(lián)合應(yīng)用單通道膜片鉗技術(shù)和壓力鉗技術(shù),在急性分離的成年大鼠心房肌細(xì)胞上,采用細(xì)胞

2、貼附(cel1.a(chǎn)Ita.ched)方式記錄SAKCs的活動(dòng)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)所記錄的通道為SAKCs,通道閃爍樣開放,無整流特性。當(dāng)細(xì)胞外液為高K液(140mmol/L)時(shí),翻轉(zhuǎn)電位為0mV。鉗制膜電位+60mV時(shí)單通道的電導(dǎo)值為(59±5)ps,一60mV時(shí)為(5l±8)ps。通道約在負(fù)壓刺激開始700~800ms內(nèi)被快速激活,刺激解除后,通道快速在500ms內(nèi)去激活。超過一30mmHg(1mmHg=0.133kPa)的刺激可使多個(gè)通道同時(shí)開放。實(shí)驗(yàn)中未觀察到通道活動(dòng)達(dá)到飽和現(xiàn)象。單通道電流幅度不受負(fù)壓刺激的影響。隨膜片鉗電極內(nèi)負(fù)壓的增加,通道開放概率增大,呈刺激強(qiáng)

3、度依賴性。Cytocha.1asinB不改變SAKCs的電流幅度,但增加SAKCs的開放概率,增強(qiáng)SAKCs的背景活動(dòng)和對(duì)機(jī)械刺激的敏感性。結(jié)論我們推測生理狀態(tài)下細(xì)胞皮質(zhì)肌動(dòng)蛋白內(nèi)襯于細(xì)胞膜,可能作為細(xì)胞膜的并聯(lián)成分承受部分細(xì)胞應(yīng)力,并使脂質(zhì)膜的應(yīng)力減少,從而使SAKCs不易被激活。關(guān)鍵詞:膜片鉗技術(shù);壓力鉗技術(shù);大鼠心房肌細(xì)胞;牽張激活鉀離子通道(SAKCs);細(xì)胞松弛素B中圖分類號(hào):R33l文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1009-7236(2008)Ol-004-06Mechanosensitivityandgatingmechanismofstretch-act

4、ivatedpotassiumchannelsinadultratatrialmyocytesLIUXu-xia,HUANGHai—xia,LIUP,NIUWei-Zhen(DepartmentofPhysiology,CapitalMedicalUniversity,Beijing100069,China)Abstract:AnTodiscusseleetrophysiologiealpropertiesofSAKCsandtodeterminetheefectofcorti-ealskeletoningatingmechanism0fSAKCsandtocl

5、arifyMEFmechanismatchannelleve1.METHoDSSingle··channelpatch·clamptechniqueandpressure··clamptechniqueweresimultaneouslyusedtoiden·tifvandcharacterizeSAKCsofisolatedadultratatrialmyocytesincel1.a(chǎn)ttachedmode.RESULTSThestretch.a(chǎn)ctivatedchannelcurrentobservedwasKselectiveandnotrectifiedw

6、ithfliekerybursts.There-versalpotentialwas0mVwhentheatrialcellwasinahighK(140mmo1/L)bathsolutionandthemeanconductancewas(59±5)pSand(5l±8)pSat+6OmVand一6OmV,respectively.Thelatencyofehannel~responsetopressurestepsWas7oo~8ooms.Afterreleaseofsuction.thechannelsclosedwithin500ms.Stretchbe

7、yond一3OmmHgresultedinmultiplelevelsofchannelopening.TheSAKCsactivitydidnotreachsaturationbeforesealwasdestroyed.Thesingle.channelconductanceofSAKCswasinsensitivetomembranestretch.TheopenprobabilityofSAKCsinereasedinapressure-dependentman-ner.CytoehalasinBdidnotchangecurentamplitudeof

8、singleSAKCs,

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