吖啶酯在免疫分析及DNA測(cè)定中的應(yīng)用

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1、卩丫唳酯在免疫分析及DNA測(cè)定中的應(yīng)用摘要:nr?酯作為一種高效的化學(xué)發(fā)光試劑，在臨床免疫分析，DNA分析，牛物酶活性測(cè)定等方面有著廣泛的應(yīng)用。本文重點(diǎn)介紹卩丫噪酯在免疫分析及DNA測(cè)定屮的應(yīng)用。其屮在免疫分析方面可以用于標(biāo)記，跟蹤蛋口等，在DNA方面，可用于基因測(cè)定或微生物測(cè)定。關(guān)鍵詞:ny?酯，免疫分析，DNA測(cè)定，應(yīng)用前言葉唏酯衍生物是一類(lèi)量子產(chǎn)率較高的化學(xué)發(fā)光試劑，由于它發(fā)光過(guò)程所需的引發(fā)劑少、背景和噪音低、靈敏度高，常用于臨床免疫測(cè)定，作核酸分子探針，測(cè)定生物酶的活性或其它應(yīng)用[84-89],可以標(biāo)記抗體廣泛應(yīng)用于免疫測(cè)定；這類(lèi)化合物只要在過(guò)氧化氫存在下就迅速產(chǎn)牛化

2、學(xué)發(fā)光，具有很高的化學(xué)發(fā)光效率。又由于卩丫碇酯具有與乙酰苯酯相似的結(jié)構(gòu)，具有單一酯鍵，檢測(cè)的靈皺度高，因此可用于酶活性的檢測(cè)。目前，亞科化學(xué)主要推岀了以下卩丫噪酯衍生物：卩丫噪酯（NSP-DMAE-NHS）,黃色粉末，CAS號(hào)：194357-64-7,分子式:C30II26N209S,分子量:590.6,含量:295.0%,儲(chǔ)存條件:2-8°C冷藏,密封、干燥、避光保存。卩丫呢鹽（NSP-SA-NHS）,黃色粉末,CAS號(hào)：199293-83-9,分子式：C32H31N3010S2分子量：681.733,含量：$97%,貯存條件：常溫。卩丫噪鹽（DMAE-NHS），黃色粉末,

3、CAS號(hào)：115853-74-2,分子式:C29I126N2010S,分子量：594.589。卩丫噪酯的應(yīng)用卩丫噪酯在免疫分析中的應(yīng)用lanweekL等人合成了[4-2-琥珀亞胺氧代碳酰乙基）-酚]10-甲基卩丫噪9-甲酸苯酯，用它標(biāo)記在抗體上測(cè)定人胎蛋白，其檢測(cè)靈敏度為1.3kiloIU/L,與放射免疫法分析結(jié)果一致。RichardsonAP報(bào)道的卩丫唏酯10-甲基卩丫唏9-甲酸對(duì)氨基苯酯，標(biāo)記在黃體酮上作半抗原，測(cè)定沖懷孕灰女血漿中的黃體酮含量，其檢測(cè)靈敏度達(dá)0.64mol/L0在國(guó)內(nèi)羅世能等人報(bào)道的10-甲基卩丫噪9-甲酸對(duì)氨乙基苯酯，作者認(rèn)為在保留被示蹤物質(zhì)牛物活性方

4、面具有更大的適用范圍。莊惠生等人制備了葉呢9-竣酸，經(jīng)酰氯化后，與3-（4-輕基苯基）-丙酸-N-耗基琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得4-（-琥珀酰亞胺基氧撥基乙基）-苯基9-卩丫噪竣酸酯，最后與氟磺酸甲酯反應(yīng)即得化學(xué)發(fā)光免疫分析標(biāo)記試劑4-（2-琥珀酰亞胺基氧按基）-苯基-10-甲基叮噪9-竣酸酯氟磺酸鹽（俗稱(chēng)叮噪酯），研究了DNA對(duì)這類(lèi)卩丫噪衍生物的化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)特性，發(fā)現(xiàn)它們可作為DXA化學(xué)發(fā)光探針，并建立了一種測(cè)定DNA含量的化學(xué)發(fā)光分析新體系。促甲狀腺激素(thyroid-stimulatinghormone,TSH)是一種由垂體前葉分泌的糖蛋口激素，血清TSII水平是臨床上作為評(píng)

5、估甲狀腺功能的一項(xiàng)重要指標(biāo)，采用靈敏度高的TSH免疫分析法對(duì)區(qū)別甲亢、甲狀腺癌與甲狀腺功能正常具有重要意義。尹東光等成功地利用卩丫噪酯DMAE-NHSE2,6-二甲基-4-(N-琥珀酰亞胺氧撥基)苯基10-甲基-卩丫唏9-甲酸酯甲氧基硫酸鹽］標(biāo)記TSII單克隆抗體，建立了靈敏度較高的促甲狀腺激素化學(xué)發(fā)光分析方法；除此之外叮噪酯已被用于腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白的檢測(cè)、免疫球蛋白和相關(guān)化合物等的分析。劉農(nóng)樂(lè)等先后用卩丫噪酯作為標(biāo)記物標(biāo)記抗體用于測(cè)定結(jié)核病人的抗體水平、測(cè)定神經(jīng)生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、組織型纖溶酶原激活劑，在這一系列測(cè)定屮發(fā)現(xiàn)此法靈敏度都很高，而叮噪酯標(biāo)記物的穩(wěn)定性因溶液

6、不同會(huì)發(fā)生變化，酸性溶液比堿性環(huán)境下穩(wěn)定。對(duì)于腫瘤檢測(cè)而言，由于腫瘤標(biāo)記物含量非常低，很難進(jìn)行精確地定量,而化學(xué)發(fā)光免疫分析法無(wú)疑成為了最佳檢測(cè)方法，叮唳酯-H202發(fā)光體系已成功被應(yīng)用于許多腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)中。叮噪酯在DNA測(cè)定中的應(yīng)用除了在免疫測(cè)定中的應(yīng)用之外，叮唳酯可以標(biāo)記寡核昔酸片段探針應(yīng)用于基因測(cè)定或微生物測(cè)定。卩丫噪酯化合物很適合于標(biāo)記DNA鏈以制造化學(xué)發(fā)光DNA探針?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果表明，許多疾病如癌癥和遺傳疾病的發(fā)生都與DXA的突變有關(guān)，且許多傳染性疾病是由環(huán)境中的病毒、病菌或寄生蟲(chóng)引起的，對(duì)病毒特定序列DNA的分析有利于疫情的控制。對(duì)DNA序列以及其鏈中堿基

7、突變的檢測(cè)在基因篩選、遺傳疾病早期診斷和治療、病原基因測(cè)定方面具有十分深遠(yuǎn)的意義。在核酸雜交分析中，制備特異性強(qiáng)、靈敏度高的標(biāo)記探針是核酸雜交分析成功的關(guān)鍵，叮唳酯衍生物可以直接標(biāo)記在核酸探針上，不需催化劑且發(fā)光量子產(chǎn)率不受影響；另外，在一定條件下，未雜交的單鏈DNA上標(biāo)記的叮噪酯被水解破壞，只有雜交形成的雙鏈保護(hù)的葉噪酯才能產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，不需分離即可監(jiān)測(cè)整個(gè)雜交過(guò)程。根據(jù)這一原理，GotoS等人建立了雜交保護(hù)檢測(cè)醛脫氫酶和阿爾茨海默病相關(guān)基因ApoE的基因微陣列新方法。該方法設(shè)計(jì)了兩根生物素標(biāo)記的DN