細(xì)胞周期與調(diào)控]

《細(xì)胞周期與調(diào)控]》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、第十一章細(xì)胞增殖及其調(diào)控細(xì)胞增殖的意義細(xì)胞周期與細(xì)胞分裂細(xì)胞周期調(diào)控細(xì)胞增殖的意義細(xì)胞生命活動(dòng)的重要特征之一,是生物繁育的基礎(chǔ)。單細(xì)胞生物：導(dǎo)致生物個(gè)體數(shù)量的增加。多細(xì)胞生物：由一個(gè)單細(xì)胞（受精卵）分裂發(fā)育而來(lái)，多細(xì)胞生物繁殖基礎(chǔ)。成體生物：主要取代衰老死亡的細(xì)胞，維持個(gè)體細(xì)胞數(shù)量的相對(duì)平衡和機(jī)體的正常功能。機(jī)體創(chuàng)傷愈合、組織再生、病理組織修復(fù)等?！?細(xì)胞周期與細(xì)胞分裂細(xì)胞周期(cellcycle)概述有絲分裂(mitosis)胞質(zhì)分裂(cytokinesis)減數(shù)分裂(meiosis)1.1細(xì)胞周期概述

2、細(xì)胞周期細(xì)胞周期中各個(gè)不同時(shí)相及主要事件細(xì)胞周期長(zhǎng)短測(cè)定細(xì)胞周期同步化1.1.1細(xì)胞周期1.概念：細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分完成所經(jīng)歷的一個(gè)有序過(guò)程。其間細(xì)胞遺傳物質(zhì)和其他內(nèi)含物分配給子細(xì)胞。2.細(xì)胞周期時(shí)相組成：間期（interphase）G1phase、Sphase、G2phaseMphase有絲分裂期（mitosis）胞質(zhì)分裂期（cytokinesis）細(xì)胞沿著G1→S→G2→M→G1周期性運(yùn)轉(zhuǎn)，在間期細(xì)胞體積增大（生長(zhǎng)），在M期細(xì)胞先是核分裂，接著胞質(zhì)分裂，完成一個(gè)細(xì)胞周期。3.細(xì)胞周期

3、時(shí)間不同細(xì)胞的細(xì)胞周期時(shí)間差異很大；S+G2+M時(shí)間變化較小，時(shí)間長(zhǎng)短主要差別在G1期；有些分裂增殖的細(xì)胞缺乏G1、G2期。4.細(xì)胞分類(lèi)根據(jù)增殖狀況，細(xì)胞分為三類(lèi)：連續(xù)分裂細(xì)胞（cyclingcell）：如表皮生發(fā)層細(xì)胞、部分骨髓細(xì)胞。休眠細(xì)胞（G0細(xì)胞）：暫不分裂，但在適當(dāng)?shù)拇碳は驴芍匦逻M(jìn)入細(xì)胞周期，如淋巴細(xì)胞、肝、腎細(xì)胞。終末分化細(xì)胞：不可逆地脫離細(xì)胞周期，不再分裂的細(xì)胞，又稱(chēng)終端細(xì)胞，如神經(jīng)、肌肉、多形核細(xì)胞。1.1.2細(xì)胞周期中不同時(shí)相及主要事件G1期S期G2期M期1.G1期：與DNA合成啟動(dòng)相關(guān)

4、，開(kāi)始合成細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的多種蛋白質(zhì)、RNA、碳水化合物、脂等，同時(shí)染色質(zhì)去凝集。2.S期：DNA復(fù)制與組蛋白合成同步，組成核小體串珠結(jié)構(gòu)。ExperimentaldemonstrationofthecoordinatedSynthesisofDNAandhistones.3.G2期：DNA復(fù)制完成，在G2期合成一定數(shù)量的蛋白質(zhì)和RNA分子。4.M期：細(xì)胞分裂期，真核細(xì)胞的細(xì)胞分裂主要包括：有絲分裂和減數(shù)分裂。遺傳物質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)分配給子細(xì)胞。1.1.3細(xì)胞周期長(zhǎng)短測(cè)定脈沖標(biāo)記DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂指數(shù)

5、觀察測(cè)定法流式細(xì)胞儀測(cè)定法縮時(shí)攝像技術(shù)可以得到準(zhǔn)確的細(xì)胞周期時(shí)間及分裂間期和分裂期的準(zhǔn)確時(shí)間。標(biāo)記有絲分裂百分率法原理(PercentageLabeledMitoses,PLM)對(duì)測(cè)定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時(shí)取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞，通過(guò)統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來(lái)測(cè)定細(xì)胞周期。有關(guān)名詞TG1：G1期的持續(xù)時(shí)間；TG2：G2期的持續(xù)時(shí)間；TS：S期的持續(xù)時(shí)間；TM：M期的持續(xù)時(shí)間；TC：一個(gè)細(xì)胞周期的持續(xù)時(shí)間；PLM：被標(biāo)記分裂期細(xì)胞占所有分裂期細(xì)胞的百分比；TDR：胸腺嘧啶核苷，是DNA

6、的特異前體，能被S期細(xì)胞攝入，而摻進(jìn)DNA中。通常使用3H或者14C標(biāo)記的TDR。測(cè)定原理待測(cè)細(xì)胞經(jīng)3H-TDR標(biāo)記后，所有S期細(xì)胞均被標(biāo)記。S期細(xì)胞經(jīng)G2期才進(jìn)入M期，所以起初PLM=0。開(kāi)始出現(xiàn)標(biāo)記M期細(xì)胞時(shí)，表示處于S期最后階段的細(xì)胞，已渡過(guò)G2期，所以從PLM=0到出現(xiàn)PLM的時(shí)間間隔為T(mén)G2。S期細(xì)胞逐漸進(jìn)入M期，PLM上升，到達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)候說(shuō)明來(lái)自處于S最后階段的細(xì)胞，已完成M，進(jìn)入G1期。所以從開(kāi)始出現(xiàn)M到PLM達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)間間隔就是TM。當(dāng)PLM開(kāi)始下降時(shí)，表明處于S期最初階段的細(xì)胞也

7、已進(jìn)入M期，所以出現(xiàn)LM到PLM又開(kāi)始下降的一段時(shí)間等于TS。從LM出現(xiàn)到下一次LM出現(xiàn)的時(shí)間間隔就等于TC，TC=TG1+TS+TG2+TM，即可求出TG1長(zhǎng)度。事實(shí)上由于一個(gè)細(xì)胞群體中TC和各時(shí)相不盡相同，第一個(gè)峰常達(dá)不到100%，以后的峰會(huì)發(fā)生衰減，PLM不一定會(huì)下降到零，所以實(shí)際測(cè)量時(shí)，常以（TG2+1/2TM）-TG2的方式求出TM。1.1.4細(xì)胞同步化自然同步化人工同步化選擇同步化誘導(dǎo)同步化1.自然同步化多核體：如粘菌只進(jìn)行核分裂，而不發(fā)生胞質(zhì)分裂，形成多核體。瘧原蟲(chóng)也具有類(lèi)似的情況。某些水生

8、動(dòng)物的受精卵：如大量海參卵受精后，前9次細(xì)胞分裂都是同步化進(jìn)行的。增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入適宜環(huán)境后，它們一起發(fā)芽，同步分裂。2.選擇同步化有絲分裂選擇法使單層培養(yǎng)的細(xì)胞處于對(duì)數(shù)增殖期，此時(shí)分裂活躍，有絲分裂細(xì)胞變圓隆起，與培養(yǎng)皿附著性低，輕輕振蕩，M期細(xì)胞脫離器壁，懸浮于培養(yǎng)液中，收集培養(yǎng)液，再加入新鮮培養(yǎng)液，依法繼續(xù)收集，可獲得一定數(shù)量的中期細(xì)胞。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，同步化程度高，細(xì)胞不受藥物傷害；缺點(diǎn)：