分子診斷學(xué)復(fù)習(xí)

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1、名詞解釋因是遺傳信息的物理和功能單位,含有產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所必需的全部核苜酸序列,即_段DNA序列2?蛋白質(zhì)組(proteome):源于蛋白質(zhì)(protein)與基因組(genome)兩個詞的雜合，意指"一種基因組所表達(dá)的全套蛋白廣=艮卩包括一種細(xì)胞或一個組織乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。3?蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics):蛋白質(zhì)組學(xué)就是對機體或組織或細(xì)胞的所有蛋白質(zhì)進行鑒定和結(jié)構(gòu)功能分析的一個研究領(lǐng)域。基因:是一段攜帶功能產(chǎn)物信息的DNA片段,是控制某種性狀的遺傳單位。4基因組(genome):是指一個細(xì)胞

2、或生物體的一套完整的單倍體遺傳物質(zhì)。5?基因組學(xué)(Genomics):指對所有基因進行基因組作圖(包括遺傳圖譜.物理圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜,核苜酸序列分析，基因定位和基因功能分析的一門科學(xué)。6?基因擴增:定義：指基因拷貝數(shù)增加的現(xiàn)象，基因擴增是基因表達(dá)增加的一種重要機制。7?聚合酶鏈反應(yīng)(PCR):利用DNA聚合酶催化一對引物間的特定DNA片段在體外進行快速.大量擴增的方法，也稱無細(xì)胞克隆技術(shù)。&增色效應(yīng):DNA變性后，雙螺旋解體，堿基堆積不復(fù)存在，螺旋內(nèi)部的堿基暴露，致變性后的DNA對260nm紫外光的吸光率明顯增加，這種現(xiàn)象稱為

3、增色效應(yīng)。矚解1度：將DNA解鏈達(dá)到50%或OD260達(dá)到最大值的50%時的溫度，稱為解鏈溫度或熔解溫度。10淚化乙筵(ethidiimbromide丄EB)是一種熒光染料，可嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，在紫外線激發(fā)下發(fā)岀紅色熒光。口?引物，與靶基因片段兩側(cè)互補的寡核苜酸，其本質(zhì)是單鏈DNA,它決定擴增產(chǎn)物的特異性和長度。遼短產(chǎn)物片段:的長度嚴(yán)格限定在2個引物鏈的5’端之間，是需要擴增的特定片段，以指數(shù)形式擴增(2n)o13?長產(chǎn)物片段:比兩引物限定區(qū)更長的延伸產(chǎn)物，是以原始模板DNA為模板的擴增反應(yīng)產(chǎn)物r以倍數(shù)形式擴增(2n

4、)o%加端PCR(add?PCR):即讓擴增產(chǎn)物的5/■末端帶上一段特殊的.滿足需要的DNA順序的PCR。多原位匹Rai^tiL匹RJ:在組織細(xì)胞內(nèi)進行PCR擴增，通過摻入標(biāo)記基團直接顯色或結(jié)合原位雜交進行檢測，可檢測出該特異序列在細(xì)胞中的存在量和存在曲位。16?逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT?PCR)原理:先在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRNA為模板合成互補的cDNA;再用后者為模板進行PCR反應(yīng)。17?反向PCR(reverseORinversePCR):是用一對反向的弓I物來擴增兩弓I物以外的(vs—對引物間未知的DNA片段，即對某個

5、已知DNA片段兩側(cè)的未知序列進行擴增。18?不對稱PCR(asymmetricPCR)原理:最初的:L0J5個循環(huán)中的主要產(chǎn)物是雙鏈DNA;但是,當(dāng)?shù)蜐舛鹊囊?限制性引物)被耗盡后，以后的循環(huán)只產(chǎn)生高濃度引物的延伸產(chǎn)物，結(jié)果便產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)19多重PCR(multiplePCR)(檢測_組特定基因序列的存在或缺失)原理和方法：在同一反應(yīng)體系中加入多對引物，擴增同一模板的多個區(qū)域(相同或不同基因的多個部位如果其中某一區(qū)段缺失，則電泳圖譜上該區(qū)帶就會消失。20?巢式PCR(nestedPCR)定義及原理:用

6、兩對PCR引物擴增完整的DNA片段,以提高檢測的靈敏度和特異性。21標(biāo)記弓

7、物的PCR(LabelledprimersPCR,LP-PCR):利用同位素、熒光素等對PCR弓I物進行標(biāo)記,以便直觀檢測目的基因。22?實時熒光定量PCR:在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號監(jiān)測整個PCR過程z獲得在線描述PCR過程的動力學(xué)曲線，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知核酸進行定量分析。23?絕對定量(測定X的分子數(shù)量):即用已知的標(biāo)準(zhǔn)曲線來精確推算待測的起始模板拷貝數(shù),又稱外標(biāo)法。24相對定量(測定不同樣本中X的比率):在一定樣本中,靶分

8、子相對于參照樣本中該分子的量的變化程度,又稱內(nèi)標(biāo)法。25?循環(huán)閾值(Ct):在PCR擴增過程中，熒光信號開始由本底進入指數(shù)增長階段的拐點所對應(yīng)的循環(huán)次數(shù)，是FQ-PCR定量的理論基礎(chǔ)。2&熒光共振能量傳遞(FRET):某熒光標(biāo)記基團在激發(fā)光刺激下生成某波長的發(fā)射光，當(dāng)另一屏蔽基團與其距離合適時，其發(fā)射光將會被屏蔽基團所吸收,并轉(zhuǎn)化為其它波長的發(fā)射光或熱能,稱之為FRET。27?熒光淬滅:任何引起熒光強度降低甚至消滅的現(xiàn)象。能夠引起該現(xiàn)象的物質(zhì)即熒光淬滅劑。2&連接酶鏈反應(yīng)(LCR)原理：以DNA連接酶將某一DNA鏈的亍?P與

9、另一相鄰鏈的歹9H連接為基礎(chǔ)的循環(huán)反應(yīng)。29?核酸雜交:不同來源、具有互補序列的單鏈核酸分子，在一定條件下.按堿基配對原則退火形成雙鏈的過程。30?核酸雜交技術(shù):是一種分子生物學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。它基于核酸雜交的原理，利用帶標(biāo)記的核酸探針分子去檢測具有同源序列的特定DNA或RNA分子(靶序列)，