產(chǎn)淀粉酶海洋放線菌的分離、篩選及初步鑒定【開題報告】

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1、畢業(yè)論文開題報告生物科學(xué)產(chǎn)淀粉酶海洋放線菌的分離、篩選及初步鑒定一、論述具有產(chǎn)淀粉酶能力的海洋放線菌的研究現(xiàn)狀，說明選題的依據(jù)和意義自1929年弗來明發(fā)現(xiàn)青霉素至今，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了超過10000種具有生物活性的微生物天然產(chǎn)物，并廣泛的應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、衛(wèi)生、制造等工業(yè)。迄今為止全球年產(chǎn)抗生素超過10萬噸，產(chǎn)值達50多億美圓，由此可見微生物所產(chǎn)活性物質(zhì)對人類的重要性。隨著傳染性病菌對傳統(tǒng)抗生素的增強，尋找新的活性物質(zhì)成了當務(wù)之急。海洋微生物由于其生存環(huán)境的特殊性（如高滲、高鹽、低溫、高壓、低氧等），發(fā)展出獨特的

2、代謝方式，并使其成為海洋生物活性物質(zhì)的重要來源，也使其成為新抗生素的重要來源[1]。海洋占地球面積的70%以上，具有豐富的生物資源，其中微生物占海洋數(shù)量的90%，而目前有95%以上的海洋微生物未被認識。近年來從海洋微生物中不斷發(fā)現(xiàn)具有生理意義上的新的次級代謝產(chǎn)物，這類物質(zhì)通常具備陸地微生物所沒有的新的獨特結(jié)構(gòu)[2]，如從加勒比海海藻上獲得的海洋細菌產(chǎn)生的含溴高達70%以上的高度溴化的抗生素；從海水細菌中獲得的獨特內(nèi)酯oncorhynodede；從加州深海沉積物中獲得的具有抗菌活性、抗黑色素瘤活性、抑制HI

3、V病毒能力的深海細菌。由此可見，海洋細菌具有很好的開發(fā)潛力，我國海洋資源豐富，具有東海、南海、黃海、渤海四大海域。其中東海海域是中國三大陸緣海之一，海岸線長5745公里，長江、錢塘江、甌江、閩江等交匯入海，帶去豐富的營養(yǎng)成分，因此也形成了豐富的微生物種群。舟山地處位于長江口以南、杭州灣以東的浙江省北部海域，海域面積22000平方公里，共有大、小島嶼1390個，全市島嶼岸線總長2447.866千米，沿岸流、臺灣暖流和黃海冷水團交匯于此，帶來豐富營養(yǎng)，因此具有豐富的動植物和微生物資源，對與開展海洋細菌的資源調(diào)

4、查研究工作具有獨特的地域優(yōu)勢。本論文希望通過對舟山海域附近具有產(chǎn)淀粉酶的海洋微生物調(diào)查研究，為我國東海海域的海洋微生物的開發(fā)應(yīng)用提供參考。二、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢（一）海洋放線菌活性物質(zhì)研究進展由于海洋獨特的環(huán)境，使從海洋微生物中提取的活性物質(zhì)常常具備比較特別的化學(xué)結(jié)構(gòu)和特殊的生理功能，在抗病菌、抗腫瘤、抗病毒等方面具有良好表現(xiàn)。而這類活性物質(zhì)也成為目前研究海洋細菌方面的熱點。1、抗菌活性物質(zhì)許多海洋細菌可產(chǎn)抗生素，其中包括芽孢桿菌屬、交替單胞菌屬、假單胞菌屬、黃桿菌屬、微球菌屬、著色菌屬、欽氏菌屬等

5、許多未定菌，已報道海洋細菌產(chǎn)生的抗生素有溴化吡咯、α-n-pentylquinolind、magnesidins、istamycins、aplasmomycins、altermicidin、macrolactins、diketopiperazines、3-氨基-3-脫氧-D-葡萄糖、oncorhyncolide、maduralide、salinamides、靛紅、對羥苯基乙醇、醌、thiomarindsBC、trisindoline、pyrolnitrim等,其中有些種類在陸生菌中從未見過[3]。王瑩[4

6、]等通過對東海海洋微生物的篩選鑒定發(fā)現(xiàn)具有抑菌活性的γ-變形菌亞門的菌株，這在以前的比較少見。Ivanova等[5]從海洋無脊椎動物體表分離到491株海洋細菌,發(fā)現(xiàn)26%對海洋細菌、陸源細菌和真菌的生長有抑制作用。Jaruchoktaweechai等[6]從泰國Sichang島周圍海泥中分離出具抑菌活性的Bacillussp.細菌Sc026，并從其產(chǎn)生的活性物質(zhì)中分離到2個新的化合物。劉全永等[7]從海洋細菌LUB02中分離得到廣譜抗真菌活性物質(zhì),對人體病原真菌白色念珠菌(Candidaalbicans)

7、有較強的抑菌作用。（二）分子生物學(xué)技術(shù)在海洋細菌分類鑒定中的應(yīng)用1、16SrRNA/rDNA序列分析方法在海洋細菌分類鑒定中的應(yīng)用16SrRNA序列分析技術(shù)的基本原理是從微生物樣本中的16SrRNA的基因片段,通過克隆、測序或酶切、探針雜交獲得16SrRNA序列信息,再與16SrRNA數(shù)據(jù)庫中的序列數(shù)據(jù)或其他數(shù)據(jù)進行比較,確定其在進化樹中位置,從而鑒定樣本中可能存在的微生物種類。一般包括以下三個步驟：①DNA獲得；②16SrRNA基因片段的獲得；③通過16SrRNA基因片段分析對微生物進行分類鑒定。隨著分

8、子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，目前16SrRNA序列分析技術(shù)在海洋微生物分類中占有越來越重要的地位。戴欣等[24]通過對南海海底沉積物中分離到菌株ZS110的序列分析表明，ZS110是一株芽孢桿菌屬(Bacillus)的枯草芽孢桿菌種(Bacillussubtilis)。Glovanoni[25]利用16SrRNA基因序列分析技術(shù)研究了馬尾藻海中浮游細菌的遺傳多樣性。Elke[26]等研究發(fā)現(xiàn)16SrRNA基因序列分析對于海洋細菌多