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《KJ 201707 食品中嗎啡、可待因成分的快速檢測膠體金免疫層析法》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、附件1食品中嗎啡、可待因的快速檢測膠體金免疫層析法（KJ201707）1范圍本方法規(guī)定了食品中嗎啡、可待因的膠體金免疫層析快速檢測方法。本方法適用于經(jīng)調(diào)味料、火鍋底料、麻辣燙底料或其他食用湯料等勾兌、調(diào)配或添加形成的液體食品；經(jīng)調(diào)味醬、調(diào)味油脂、火鍋底料、麻辣燙底料、蘸料或其他調(diào)味料等勾兌、調(diào)配或添加形成的半固體食品，醬油；經(jīng)香辛香料、復(fù)合調(diào)味料等勾兌、調(diào)配或添加形成的固體食品，食用醋（含以食用醋為主的調(diào)味料）中嗎啡、可待因的快速測定。2原理本方法采用競爭抑制免疫層析原理。樣品中的嗎啡、可待因經(jīng)水提取后與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合，抑制抗體和
2、檢測線（T線）上抗原的結(jié)合，導(dǎo)致檢測線顏色深淺的變化。通過檢測線與控制線（C線）顏色深淺比較，對樣品中嗎啡、可待因進(jìn)行定性判定。3試劑與材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。3.1試劑甲醇。3.2參考物質(zhì)嗎啡、可待因參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子量見表1，純度均≥99%。表1嗎啡、可待因參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子量序號中文名稱英文名稱CAS登錄號分子式相對分子量1嗎啡Morphine57-27-2C17H19NO3285.34C18H21N
3、O3?H3PO42磷酸可待因CodeinePhosphate41444-62-6424.39?3/2H2O注：或等同可溯源物質(zhì)?！?——3.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.3.1嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1mg/mL）：精密稱取適量嗎啡、可待因參考物質(zhì)（3.2），用甲醇（3.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別制成濃度為1mg/mL的嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)儲備液。-20℃避光保存，有效期1年。3.3.2嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)中間液（10μg/mL）：精密移取嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1mg/mL）（3.3.1）1mL分別置于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀釋至刻度，搖勻
4、，制成濃度為10μg/mL的嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)中間液。-20℃避光保存，有效期3個月。3.3.3嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)工作液（1μg/mL）：精密移取嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)中間液（10μg/mL）（3.3.2）1mL分別置于10mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為1μg/mL的嗎啡、可待因標(biāo)準(zhǔn)工作液。4℃避光保存，有效期1個月。3.4材料嗎啡、可待因膠體金免疫層析檢測卡，及配套的試劑（可選），適用基質(zhì)為食品。4儀器和設(shè)備4.1天平：感量為0.01g。4.2讀數(shù)儀：產(chǎn)品配套可使用的檢測儀器（可選）。4.3環(huán)境條件：溫度10—40℃，相對濕度≤80%
5、。5分析步驟5.1試樣制備取適量樣品，液體樣品或半固體樣品充分混勻，固體樣品充分粉碎混勻。5.2試樣提取和凈化5.2.1液體食品：吸取試樣（盡量避免吸取油脂層）測定。層析展不開時，用0.45μm微孔濾膜過濾后測定。5.2.2半固體食品及醬油：準(zhǔn)確稱取試樣1g±0.1g于15mL具塞離心管中，加2—3mL水，大力振搖至均勻（必要時置約70℃水浴加熱），靜置5—10min，吸取水層（盡量避免吸取油脂層或沉淀）測定。層析展不開時，用0.45μm微孔濾膜過濾后測定。5.2.3固體食品及食用醋：準(zhǔn)確稱取試樣1g±0.1g于15mL具塞離心管中，加8—1
6、0mL水，大力振搖1—2min至均勻，靜置5—10min，吸取水層測定。層析展不開時，用0.45μm微孔濾膜過濾后測定。注：試樣提取和凈化（5.2）過程可按照試劑盒說明書，不做限定。5.3測定步驟測試前，將未開封的檢測卡恢復(fù)至室溫。緩慢滴加3—4滴待測溶液至檢測卡加樣孔中，靜置，5—10min內(nèi)對結(jié)果進(jìn)行判定。注：測定步驟建議按照試劑盒說明書。—2——5.4質(zhì)控試驗每批樣品應(yīng)同時進(jìn)行空白試驗和加標(biāo)質(zhì)控試驗。5.4.1空白試驗：準(zhǔn)確稱取空白試樣1g±0.1g，按照5.2和5.3步驟與試樣同法操作。5.4.2加標(biāo)質(zhì)控試驗：稱取空白試樣，分別添加適
7、量標(biāo)準(zhǔn)工作液（3.3.3），使液體、半固體試樣或醬油試樣中嗎啡、可待因含量均為40μg/kg，使固體或食用醋試樣中嗎啡、可待因含量均為100μg/kg，按照5.2和5.3步驟與試樣同法操作。注：根據(jù)每次試驗時的基質(zhì)類型做相應(yīng)的基質(zhì)加標(biāo)質(zhì)控試驗。6結(jié)果判定要求采用目視法對結(jié)果進(jìn)行判定，示意圖如圖1和圖2所示。結(jié)果判定也可使用膠體金讀數(shù)儀，具體操作與判定原則參照讀數(shù)儀使用說明書。結(jié)果判定建議按照試劑盒說明書。6.1比色法6.1.1無效控制線（C線）不顯色，無論檢測線（T線）是否顯色，表示操作不正確或檢測卡已失效。6.1.2陰性結(jié)果控制線（C線）顯
8、色，檢測線（T線）顏色比控制線（C線）顏色深或檢測線（T線）顏色與控制線（C線）顏色相當(dāng)，均表示樣品中不含嗎啡、可待因或含量低于方法檢測限，判為陰性。6.1.3陽性
