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1、副溶血弧菌及其檢測方法1.副溶血弧菌副溶血性弧菌(又稱嗜鹽菌VibrioParahaemolyticus)是革蘭氏陰性多形態(tài)桿菌或稍彎曲弧菌。本菌嗜鹽畏酸，在無鹽培養(yǎng)基上，不能生長，3%～6%食鹽水繁殖迅速，每8～9分鐘為1周期，低于0.5%或高于8%鹽水中停止生長。在食醋中1～3分鐘即死亡，加熱56℃5～10分鐘滅活，在1%鹽酸中5分鐘死亡。副溶血性弧菌食物中毒也稱嗜鹽菌食物中毒，是進食含有該菌的食物所致，主要來自海產品或鹽腌漬品，常見者為蟹類、烏賊、海蜇、魚、黃泥螺等，其次為蛋品、肉類或蔬菜。臨床上以急性起病、
2、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。主要病理變化為空腸及回腸有輕度糜爛，胃粘膜炎、內臟(肝、脾、肺)淤血等。已知副溶血弧菌有13種O抗原及65種K抗原，據(jù)其發(fā)酵糖類的情況可分為5個類型。各種弧菌對人和動物均有較強的毒力，其致病物質主要有分子量42000的致熱性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH類似溶血毒(TRH)，具有溶血活性、腸毒素和致死作用。2.副溶血弧菌的檢測方法（1）溶血性試驗我妻氏用高鹽血瓊脂培養(yǎng)基，在限定的條件下培養(yǎng)副溶血性弧菌時出現(xiàn)的溶血反應，稱此溶血性能為“神奈川現(xiàn)象”。此試驗要求是用人或兔
3、的新鮮紅血球制備高鹽血平板，經37℃、24h培養(yǎng)，如在單個菌落周圍呈現(xiàn)透明溶血環(huán)或在菌落下面有明顯溶血者，為“神奈川現(xiàn)象”陽性，若不出現(xiàn)透明溶血環(huán)或無明顯溶血者，為“神奈川現(xiàn)象”陰性。有致病性的副溶血性弧菌，多數(shù)為神奈川現(xiàn)象陽性，但亦有少數(shù)為陰性。（2）血清學試驗副溶血性弧菌有三種抗原，即O抗原（菌體抗原），Ｋ抗原（莢膜抗原）及Ｈ抗原（鞭毛抗原），其中血清學分類上有意義的是前兩者：O抗原有13種血清群，K抗原有65種血清型。進行副溶血性弧菌血清學鑒定時，可用O抗原分群，將18-24h的培養(yǎng)物，用3％食鹽水作成較濃的
4、菌懸液，121℃高壓1h或100℃煮沸后，用此菌懸液進行O抗血清玻片凝集試驗，同時用無菌生理鹽水作對照，如O凝集反應陽性時，可用不經加熱的菌懸液進行Ｋ抗血清玻片凝集反應分型判定。天津生物芯片公司的診斷血清產品覆蓋了該菌所有的O血清群及K血清型。【推薦產品】貨號品名規(guī)格產品簡介IM-VP009副溶血弧菌K抗原全套診斷血清1ml*74瓶/套9種多價，65種單價IM-VP006副溶血弧菌O抗原全套診斷血清1ml*14瓶1種多價，13種單價（1）核酸擴增試驗所有副溶血弧菌分離株都含有不耐熱溶血毒素（TLH），這種溶血素是副
5、溶血弧菌所特有的，因此它的編碼基因tlh基因常被用作檢測副溶血弧菌的靶基因。而tlh并不是一個毒素基因，真正與致病相關的是副溶血弧菌的耐熱直接溶血素（TDH）和溶血相關溶血素（TRH），因此它們的編碼基因tdh、tlh基因常被用作副溶血弧菌致病性檢測的特異基因。基于此，天津生物芯片推出一系列常規(guī)PCR試劑盒及熒光PCR試劑盒。1）常規(guī)PCR：鑒定標準是通過電泳來判斷是否有擴增的核酸片段以及擴增產物的大小是否正確?！鞠嚓P試劑推薦】貸號產品名稱包裝規(guī)格（次/盒）Cat.No.CP018副溶血弧菌核酸擴增（PCR）檢測試
6、劑盒20次/盒Cat.No.CP051副溶血弧菌多重核酸擴增（PCR）檢測試劑盒20次/盒2）實時熒光PCR：通過對實時熒光PCR反應的每一個循環(huán)產物進行熒光信號的實時監(jiān)測來判斷分析。?貨號名稱規(guī)格說明Cat.No.FP045副溶血弧菌核酸擴增（PCR-熒光探針法）檢測試劑盒20次/盒ToxR基因-保守基因Cat.No.FP047副溶血弧菌TDH基因核酸擴增（PCR-熒光探針法）檢測試劑盒20次/盒TDH基因-毒力基因Cat.No.FP048副溶血弧菌TRH基因核酸擴增（PCR-熒光探針法）檢測試劑盒20次/盒TR
7、H基因-毒力基因
